香雪球（Lobularia maritima(L.) Desv.）离体快繁体系的建立和多倍体的诱导

【摘要】香雪球(Lobulariamaritima(L.)Desv.)是十字花科(Cruciferae),香雪球属(Lobularia)植物,植株矮小而多分枝,是布置岩石园的优良花卉,可作盆栽和地被等,同时还对重金属Ni有较好的吸附作用。目前对香雪球组织培养和多倍体诱导研究较少。本研究以香雪球种子为试验材料,建立了组织培养快繁体系；同时利用秋水仙素对香雪球种子和组培苗茎段进行了多倍体诱导研究,获得了四倍体香雪球,并对二倍体、四倍体植株的生理特性和抗重金属Ni进行了比较,为香雪球的倍性育种奠定了基础,也为促进香雪球在生态环境修复方面应用提供了参考依据。1、香雪球离体再生体系。研究表明,香雪球无菌体系以种子浸泡3-4h,75%乙醇处理60s和0.1%升汞处理8min的效果最好,无污染,萌发率为86.7%。初代培养中,通过茎段和叶片诱导芽分化的最适培养基均为MS+1mg/L6-BA+0.1mg/LNAA,茎段愈伤组织的诱导率为100%,不定芽分化率为90.0%,叶片愈伤组织的诱导率为100%,不定芽分化率为73.3%。继代培养的最适培养基为MS+0.5mg/L6-BA+0.05mg/LNAA,增殖系数为6.57,芽多且粗壮,芽最长约7cm,无愈伤产生。生根的最适培养基为1/2MS+0.5mg/LIBA,主根长,而且粗壮,须根也较多,植株长势好,呈深绿色。组培苗移栽成活率为80.0%。2、香雪球根尖染色体制片条件优化。采用去壁低渗火焰干燥法的处理流程为：种子萌发30h时取根,8-羟基喹啉预处理3h,固定2h以上,酶解(3%纤维素酶、0.3%果胶酶)1.5-2h,再固定2h,Giemsa染色8-10min。在此条件下能积累较多的中期分裂相,且染色体制片效果良好。3、采用浸泡法对香雪球种子的诱导和混培法对香雪球茎段的诱导,试验结果为：浸泡法通过0.2%的秋水仙素处理香雪球种子36h效果最佳,诱变率为26.7%,纯合四倍体(2n=4x=48)植株得率为3.3%。混培法处理的茎段在含0.3%秋水仙素的MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA分化培养基中处理15d效果最佳,诱变率达20.0%,纯合四倍体植株得率为4.0%。4、四倍体植株特性如下(1)外部形态：四倍体茎增粗,叶色浓绿,叶片的长度小于二倍体,宽度和厚度均大于二倍体,四倍体叶长、叶宽、叶厚分别为二倍体的76.1%、124.5%、155.0%,叶形指数为二倍体的105.4%。(2)气孔：四倍体植株气孔变大,密度下降,为二倍体的66.9%,保卫细胞增加,其长度和宽度分别为二倍体的113.9%、111.2%,叶绿体数目增加,为二倍体的119.6%。(3)重金属Ni2+吸附：在吸附时间为80main时,二倍体和四倍体对Ni2+的吸附量分别为10.30mg/g和14.72mg/g,四倍体植株比二倍体植株对Ni2+吸附量增加4.42mg/g。
【作者】赵敏；
【导师】眭顺照；李名扬；郭启高；
【作者基本信息】西南大学，花卉学，2014，硕士
【关键词】香雪球；组织培养；多倍体；秋水仙素；

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