食品中3-氯-1，2-丙二醇对小鼠T淋巴细胞抑制作用及机制研究

【摘要】本研究为中国博士后科学基金一类项目801120106201。3-氯-1，2-丙二醇(α-chlorohydrin，3-MCPD)是目前被国际上广为关注的食品污染物—氯丙醇类化合物中最常见的代表物质。在食品工业中，利用酸水解植物蛋白工艺生产氨基酸的过程中，会不可避免地产生氯丙醇类副产物，其中3-MCPD的含量最高。与传统的发酵酿造工业相比，酸水解工艺具有生产时间短，成本低等优点，因此被广泛应用。利用酸水解蛋白进一步加工得到配制酱油等调味品，因此在配制酱油和相关调味品中3-MCPD的污染较为常见。本研究以3-MCPD(+)为研究对象，以18-22gBALB/c小鼠为实验动物，在非细胞毒剂量范围内，探究3-MCPD(+)对小鼠是否具有体内外的免疫抑制作用，如果具有免疫抑制作用，探索其发生抑制作用的机制。主要取得如下研究结果：(1)通过MTT法筛选出3-MCPD(+)的非细胞毒剂量范围，并进一步确定3-MCPD(+)的实验剂量。在0～4mM范围内，吸光度值与空白值相比没有显著性差异，说明该剂量范围是BALB/c小鼠脾淋巴细胞的非细胞毒剂量范围。进一步通过刀豆蛋白A(ConA)的诱导确定1，2，4mM剂量的3-MCPD(+)对脾淋巴细胞的增殖具有抑制作用。(2)系统研究了3-MCPD(+)对BALB/c小鼠脾淋巴细胞产生免疫抑制作用的机制。进行具有代表性的免疫学实验如流式细胞术分析、ELISA试剂盒检测、RNA提取和半定量反转录聚合酶链反应、细胞内钙离子的荧光测定，结果确定1，2，4mM剂量的3-MCPD(+)对小鼠脾淋巴细胞具有免疫抑制作用。采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测分析3-MCPD(+)对ConA激活的信号通路NF-κB、NFAT、AP-1的影响，发现3-MCPD(+)抑制了NF-κB、NFAT2、AP-1代表性蛋白的表达。得出结论：经ConA刺激后，NF-κB、NFAT2、AP-1蛋白的表达量增多，但是随着3-MCPD(+)剂量的不断升高，三种蛋白的表达量逐渐减少，呈剂量依赖关系。3-MCPD(+)对BALB/c小鼠脾淋巴细胞具有免疫抑制作用，这种抑制作用可能是通过抑制NF-B，NFAT及AP-1信号通路来实现的。(3)构建二硝基氟苯(DNFB)所致的迟发型超敏反应(DTH)小鼠模型。进行外耳廓组织学分析。结果表明：3-MCPD(+)对BALB/c小鼠具有体内的免疫抑制作用。综上所述，食品中氯丙醇类化合物的代表物质3-MCPD对BALB/c小鼠体内外都具有免疫抑制作用，这种抑制作用呈现出剂量依赖性，从而为食品中3-MCPD进一步的安全性评价提供毒理学依据。
【作者】张爽；
【导师】卢静；
【作者基本信息】吉林大学，食品工程，2014，硕士
【关键词】3-MCPD(+)；细胞因子；NFAT；DTH；免疫抑制；

【参考文献】
[1]刘鹏.石墨烯和氧化铜复合材料的制备及电容性能研究[D].上海大学,化学工艺,2013,硕士.
[2]彭兰.政治关联、多元化战略与企业绩效[D].宁波大学,企业管理,2014,硕士.
[3]叶兵剑.高速公路预制T梁非结构性裂缝机理研究[D].武汉理工大学,桥梁与隧道工程,2013,硕士.
[4]殷晓芬.城市居民不平等感知现状及影响因素研究[D].南京大学,社会学,2013,硕士.
[5]王新.论刑事被害人国家补偿制度之本土建构[D].山东大学,法律（专业学位）,2012,硕士.
[6]常艳萍.Hp感染动物模型的建立及重组Bb-vacA-hpaA疫苗的免疫保护性研究[D].大理学院,病原生物学,2013,硕士.
[7]龙威,黄荣华.石墨烯的化学奥秘及研究进展[J].洛阳理工学院学报(自然科学版),2012,01:1-4+12.
[8]高阎龙.广义线性模型框架下基于个体数据的RBNS预测[D].华东师范大学,精算学,2013,硕士.
[9]张璞.夜间通风相变储能材料的适宜性研究[D].西安建筑科技大学,建筑技术科学,2013,硕士.
[10]邢岩.基于DSP2812的高功率因数整流器的设计与实现[D].东北大学,电路与系统,2010,硕士.
[11]李晓云.厦门国贸海运有限公司的营运模式研究[D].厦门大学,工商管理（EMBA）,2014,硕士.
[12]曹辉波.阳离子醚化聚乙烯醇苯丙乳液增干强剂的研究[D].北京林业大学,林产化学加工工程,2013,硕士.
[13]徐拓倩.动员方式与抗议模式：三起工人抗争事件的比较[D].复旦大学,社会学,2012,硕士.
[14]疏松桂.带有缓冲库的综合制造系统(CIMS)分析及其可靠性的研究[J].自动化学报,1992,01:15-22.
[15]陈勋敏.德兴地区金矿控矿构造的遥感分析[J].江西地质科技.1995(01)
[16]刘家利.各类因素协同考虑的多中心开环VRP问题研究[D].西南交通大学,管理科学与工程,2014,硕士.
[17]谢发尹,王景代,林融冰,孟宇,吴昌新,孙传棋.(Nd-Pr)FeB速凝薄片厚度对其微观结构的影响[J].稀有金属.
[18]陈翔.黄药子抑制胃癌生长转移的实验研究[D].山东大学,外科学（专业学位）,2014,博士.
[19]周芳名.丹参micoR828全长基因的克隆、表达分析及遗传转化[D].西南大学,植物学,2013,硕士.
[20]程盼盼.基于金属纳米颗粒调控的表面等离子增强有机太阳能电池研究[D].苏州大学,无机化学,2013,硕士.
[21]刘建根.冗余余数系统在高斯噪声下的纠错[D].兰州大学,计算数学,2012,硕士.
[22]查璇.论二语语块运用对于口译质量的影响[D].北京第二外国语学院,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[23]潘裕焕,庄颂新.自动生产线和柔性制造系统的建模、分析与控制[J].自动化学报,1987,04:312-318.
[24]柯云霞.电子商务时代下的图书市场营销策略研究[D].内蒙古大学,工商管理,2013,硕士.
[25]范斌.基于Web服务的分布式数据挖掘系统研究[D].武汉理工大学,计算机应用技术,2004,硕士.
[26]卜小霞.锂铌钛微波介质陶瓷纳米粉体的制备及其性能研究[D].青岛理工大学,建筑与土木工程,2013,硕士.
[27]王伟.新媒体时代的政府传播[D].西南政法大学,政治学理论,2012,硕士.
[28]崔与烈.沈阳公安系统信息化建设评价研究[D].吉林大学,项目管理,2014,硕士.
[29]冯婧.论我国刑事诉讼案件的事实认定[D].宁波大学,诉讼法学（专业学位）,2013,硕士.
[30]毛杰.城市社区休闲空间公正评价研究[D].西安外国语大学,人文地理学,2014,硕士.
[31]刘玉玲,王晓萍,祝宇慧,刘向东,刘旭.国外大学光电工程专业课程教学模式的调查与分析[J].高等教育研究学报,2014,03:35-38.
[32]陈康玮.基于UG与VERICUT数控加工仿真技术应用[D].西安工业大学,机械工程,2013,硕士.
[33]张井志.人字形板式换热器换热流动特性的数值分析与实验研究[D].山东大学,工程热物理,2013,硕士.
[34]崔学开.对消防入警大学生的体能现状及发展对策的研究[D].北京体育大学,体育教育训练学,2013,硕士.
[35]魏衡江.用激光技术测量钢水中的碳[J].冶金自动化,1993,01:59.
[36]安冉.我国科技创新对区域经济增长的溢出效应分析[D].山东财经大学,统计学,2014,硕士.
[37]李丹.MicroRNA218在胶质瘤中的表达及对胶质瘤细胞迁移与侵袭的影响[D].广州医科大学,外科学,2014,硕士.
[38]张卫.冶金系统第二届微型计算机应用工作经验交流会在沈阳召开[J].冶金自动化,1983,S1:73.
[39]王广启.高固体含量城市污泥热水解—厌氧消化中试研究[D].清华大学,环境科学与工程,2013,硕士.
[40]张静.BT模式中的政府行为风险与防范问题研究[D].山东大学,公共管理（专业学位）,2013,硕士.
[41]翟羽行.汽车座椅点云数据的网格与曲面重构处理[D].吉林大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[42]孙冠杰.可扩展网络附属存储系统集群模块的设计与实现[D].南京大学,软件工程（专业学位）,2013,硕士.
[43]徐晓妹.中美两国金融市场联动效应研究[D].吉林大学,世界经济,2013,硕士.
[44]杨流家.环境侵权归责原则研究[D].西南政法大学,民商法学,2012,硕士.
[45]王磊.P2P文件分发网络测量系统的设计与实现[D].华中科技大学,通信与信息系统,2013,硕士.
[46]虞晓芬,金细簪.城市征地拆迁中谋利型抵制行为的思考[J].城市发展研究,2013,12:151-153.
[47]杨希来.互联网环境下反脚本类病毒技术的研究[D].沈阳工业大学,计算机应用技术,2004,硕士.
[48]陈学文.中华青鳉胚胎发育及胚胎低温保存的初步研究[D].上海海洋大学,水产养殖,2013,硕士.
[49]覃永国.非树枝晶合金坯料感应二次加热研究[D].东北大学,工程热物理,2010,硕士.
[50]韩霜,张邻,谭智华,程南该.动态竞争环境下的物流配送中心双层规划模型[J].控制与决策,2014,11:2055-2060.