脂多糖体外刺激对未成熟星形胶质细胞氧化损伤的机制研究

【摘要】脑白质损伤是早产儿脑损伤的主要类型。其病理特点主要是反应性星形胶质细胞胶质化、小胶质细胞浸润、少突胶质细胞损伤和髓鞘损害及轴突损伤等。流行病学研究表明,宫内感染在早产儿脑白质损伤的发生机制中起了重要的作用。宫内感染导致脑白质损伤,其不仅仅是少突胶质细胞损伤的过程,星形胶质细胞在疾病的发生发展中也发挥了重要的作用。星形胶质细胞氧化损伤在脑白质损伤的发生机制中可能有重要作用,但感染／炎症是否导致未成熟星形胶质细胞的氧化损伤及其机制尚不清楚。因此,本研究通过星形胶质细胞培养,研究脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)体外刺激对未成熟星形胶质细胞的氧化损伤影响,以及星形胶质细胞培养液细胞因子巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)是否参与这一过程。而且予茶多酚(TP-EGCG)干预,探讨TP-EGCG对LPS体外刺激后未成熟星形胶质细胞氧化损伤的保护作用；以及星形胶质细胞培养液细胞因子MIP-1β是否参与这一过程,为将来脑白质损伤的防治提供理论依据。目的：研究LPS体外刺激后未成熟星形胶质细胞的总超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量及细胞因子MIP-1β水平的变化,探讨LPS体外刺激对未成熟星形胶质细胞的氧化损伤作用,以及这一作用是否有细胞因子MIP-1β参与；另外通过予TP-EGCG干预后检测星形胶质细胞总SOD活力、MDA含量、凋亡细胞数与总细胞数的百分比及细胞因子MIP-1β等水平的变化,探讨TP-EGCG是否对LPS体外刺激后星形胶质细胞氧化损伤有保护作用。方法：1.星形胶质细胞培养：不同浓度LPS(5μg/mL、10μg/mL)分别刺激不同时间(1天、3天、7天)后,比色法检测星形胶质细胞培养液总SOD活力和MDA含量变化,观察星形胶质细胞氧化损伤情况。ELISA法检测星形胶质细胞培养液细胞因子MIP-1β的浓度变化。2.TP-EGCG干预：以LPS(5μg/mL)刺激3天,同时予TP-EGCG干预后,比色法检测星形胶质细胞培养液总SOD活力和MDA含量变化,观察星形胶质细胞氧化损伤情况；以LPS(5μg/mL)刺激1天、3天,通过TUNEL法检测凋亡细胞数与总细胞数百分比的变化,观察细胞凋亡情况；ELISA法检测星形胶质细胞培养液细胞因子MIP-1β的浓度变化。结果：1.LPS(5μg/mL,分别刺激1天、3天、7天时星形胶质细胞培养液总SOD活力较对照组差异均无显著意义(P>0.05)。LPS(5μg/mL)刺激3天时星形胶质细胞培养液MDA含量较对照组明显增加(p<0.05);LPS(10mg/mL)刺激1天、3天、7天及LPS(5μg/mL)刺激1天、7天时MDA含量较对照组差异均无显著意义(P>0.05)。LPS(5μg/mL)刺激1天和7天、LPS(10μg/mL)刺激1天和3天星形胶质细胞培养液MIP-1β浓度明显降低(P<0.05);LPS(5μg/mL)刺激3天、LPS(10μg/mL)刺激7天星形胶质细胞培养液MIP-1β浓度较对照组差异无显著意义(P>0.05)。2.予TP-EGCG干预后刺激3天星形胶质细胞培养液总SOD活力与LPS组及对照组比较明显减少,差异具有显著意义(P<0.05)。予TP-EGCG干预后刺激3天星形胶质细胞培养液MDA含量较LPS组比较明显减少(P<0.05),但与对照组比较差异不明显(P>0.05)。刺激1天时LPS组、LPS+EGCG组与TP-EGCG组之间相比较,星形胶质细胞凋亡细胞数/总细胞数百分比差异无显著意义(P>0.05),其与对照组比较差异也无显著意义(P>0.05);LPS刺激3天时星形胶质细胞凋亡细胞数/总细胞数百分比较对照组明显增加,差异具有显著意义(P<0.05),且予TP-EGCG干预后星形胶质细胞凋亡细胞数/总细胞数百分比较LPS组明显减少,差异具有显著意义(P<0.05),TP-EGCG刺激3天与对照组比较,星形胶质细胞凋亡细胞数/总细胞数百分比明显减少,差异具有显著意义(P<0.05)。予TP-EGCG干预后刺激3天及单用TP-EGCG刺激3天星形胶质细胞培养液MEP-1β浓度较LPS刺激组及对照组降低均无显著意义。结论：1.不同浓度的LPS体外刺激对星形胶质细胞氧化损伤的影响程度可能是不同的。2.TP-EGCG对星形胶质细胞及LPS体外刺激条件下的星形胶质细胞可能有抗氧化、抗凋亡作用,表明TP-EGCG对LPS体外刺激引起的星形胶质细胞氧化损伤可能有保护作用。
【作者】李亚红；
【导师】袁天明；
【作者基本信息】浙江大学，儿科学，2013，硕士
【关键词】脂多糖；星形胶质细胞；超氧化物歧化酶；丙二醛；茶多酚；

【参考文献】
[1]樊博.条索状和颗粒状胶原生物玻璃分别修复骨缺损的有效性研究[D].第四军医大学,外科学,2014,硕士.
[2]窦军.磁控溅射法制备TiNi合金薄膜及其性能分析[D].吉林大学,材料物理与化学,2013,硕士.
[3]孙明昌.弹性轮对动力学性能研究及有限元分析[D].西南交通大学,车辆工程,2003,硕士.
[4]戴小平.160KA预焙铝电解槽工艺与控制技术综合优化的研究[D].中南大学,有色金属冶金,2004,硕士.
[5]刘亮.互联网研究的后亚文化理论构建[D].华中科技大学,传播学,2013,硕士.
[6]王潇.碳纳米管氯化改性及其去除消毒副产物三氯甲烷的研究[D].哈尔滨工业大学,2013.
[7]韦春妹.论铁凝小说中乡土书写的两歧性[D].华中师范大学,现当代文学,2014,硕士.
[8]苗文莉.市民化进程中农民工公共服务供给问题研究[D].延安大学,行政管理,2014,硕士.
[9]罗洁琪.外资并购反垄断法律控制[D].中国政法大学,法律,2004,硕士.
[10]卞冬磊.古典心灵的现实转向：读报纸与现代性（1894-1911）[D].复旦大学,传播学,2013,博士.
[11]李冠甲.干旱胁迫下不同冬小麦品种形态及生理性状差异[D].河南农业大学,作物栽培学与耕作学,2012,硕士.
[12]吕鑫.飞机蒙皮检测机器人的吸附系统设计与研究[D].南京航空航天大学,精密仪器及机械,2013,硕士.
[13]刘钉材.学生宿舍管理系统的设计与实现[D].电子科技大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[14]杜晓红,陈永发,赫忠慧.北京市大学生体育锻炼态度和行为的调查研究[J].首都体育学院学报,2007,01:70-72.
[15]郑元润,周广胜.基于NDVI的中国天然森林植被净第一性生产力模型[J].植物生态学报,2000,01:9-12.
[16]王方.金刚石纳米颗粒和石墨烯组合可实现“超润滑”[N].中国有色金属报,2015-06-20007.
[17]强科凤.街头服饰风格流变特点的研究[D].陕西科技大学,设计艺术学,2013,硕士.
[18]赖日昌.中药保留灌肠治疗气虚下陷型直肠内脱垂的临床观察[D].福建中医药大学,中医外科学（专业学位）,2014,硕士.
[19]陈庚,丁新,袁松鹤,徐,蔡永.网络课程要素分析及建设[J].开放教育研究,2008,06:73-79.
[20]尹春天,古志民,廖祥文.基于搜索结果的预取技术研究[J].计算机应用,2004,01:48-50.
[21]程宏建.中印经济社会发展比较研究[D].吉林大学,技术经济及管理,2014,硕士.
[22]周媞.论保险法上的投保人告知义务[D].宁波大学,民商法学,2014,硕士.
[23]郑丽敏.即食凉拌菜中单增李斯特菌的风险评估与管理[D].上海理工大学,食品科学,2012,硕士.
[24]张晓雪.电视购物的公共规制研究[D].湖南大学,公共管理,2014,硕士.
[25]杨康,张仲义.基于复杂网络理论的供应链网络风险传播机理研究[J].系统科学与数学,2013,10:1224-1232.
[26]王春丽.HQ公司精益生产现场管理策略研究[D].吉林大学,工商管理,2012,硕士.
[27]苏朋勃.大跨鞍形屋盖多目标等效静风荷载研究[D].北京交通大学,结构工程,2013,硕士.
[28]迟月婷.疏排桩支护基坑内力与变形分析[D].中国地质大学（北京）,地质工程,2013,硕士.
[29]赵春.PKCβ/Egr-1介导ox-LDL诱导的血管内皮细胞炎症应激机制的研究[D].福建医科大学,老年医学,2014,硕士.
[30]荆晓艳.思想政治教育视野下高校学生社区文化建设研究[D].重庆交通大学,思想政治教育,2011,硕士.
[31]廖益文.基于二阶嵌套模拟法估计VaR的研究[D].北京化工大学,应用数学,2013,硕士.
[32]BennyPingLaiLo,SergioA.Velastin.用于公众交通系统的分布式智能监控系统中的视听信息融合(英文)[J].自动化学报,2003,03:393-407.
[33]胡北稳.应用于伺服系统的12位、40MHz Pipelined ADC设计[D].华中科技大学,微电子学与固体电子学,2013,硕士.
[34]周娟.低剂量力达霉素通过下调Oct4抑制小鼠胚胎癌细胞P19生长机制的研究[D].吉林大学,内科学,2013,硕士.
[35]张远瑶.突发事件中政务微博客对信息公开的影响研究[D].大连理工大学,行政管理,2013,硕士.
[36]郑乃行.基于Qt,OSG的特征树结构的可复用式二次开发框架的研究和应用[D].杭州电子科技大学,计算机软件理论,2014,硕士.
[37]许华岚.商品防伪认证网络系统的设计与实现[J].福建电脑,2005,06:58-59.
[38]闫勇.汽车覆盖件成形工艺数值模拟与试验研究[D].天津大学,汽车工程,2004,硕士.
[39]张扬.防屈曲支撑作为可替换耗能元件抗震性能试验研究[D].北京建筑大学,结构工程,2013,硕士.
[40]马燕玲.机载航电系统导航信息的融合与管理[D].南京航空航天大学,导航、制导与控制,2013,硕士.
[41]堵芳.糖尿病及伴有不稳定型心绞痛患者血清中血管生成因子浓度的变化[D].广西医科大学,心血管内科（专业学位）,2013,硕士.
[42]黄怀宁.输水隧洞预应力混凝土管片衬砌设计方法研究[D].北京交通大学,桥梁与隧道工程,2013,硕士.
[43]韩巧焕.蜂窝网络中的资源分配和小区间干扰协调[D].西安电子科技大学,通信与信息系统,2012,硕士.
[44]刘静.城镇化背景下农村教学社区研究[D].湖南大学,教育经济与管理,2013,硕士.
[45]丁丹丹.传播学视角下的新任汉语二语教师课堂用语研究[D].广东外语外贸大学,汉语国际教育,2013,硕士.
[46]罗冰,蒋浩,宋豪,刘舒畅.零位校准在标定在线红外水分仪中的应用[J].轻工科技,2015,03:110-112.
[47]吴启常,王泰昌,冯又东.我国不同级别高炉的基建投资和生铁成本的比较[J].炼铁.1998(03)
[48]曹卉.铅镉对小鼠卵泡颗粒细胞凋亡及凋亡基因表达的影响[D].扬州大学,动物胚胎工程与生物技术,2011,硕士.
[49]陈学萍.质量管理方法在安徽山鹰纸业“年产30万吨造纸项目”中的应用[D].南京理工大学,项目管理,2012,硕士.
[50]陈雅琪.非上市公司股权交易市场监管制度研究[D].华中师范大学,民商法,2014,硕士.