中国大陆日本血吸虫对吡喹酮的敏感性研究

【摘要】血吸虫病是由血吸虫感染引起的一种严重危害人类健康、影响社会经济发展的重大传染病。我国主要流行日本血吸虫病。经过多年综合防治，目前我国的血吸虫病流行区已被压缩在长江中下游沿岸湖南、湖北、江西、安徽和江苏5省的江湖洲滩地区和云南、四川2省的部分大山区。截止2010年，全国仍有血吸虫病人约32.6万例。药物化疗是降低血吸虫病疫情，控制该病传播的一项重要措施。吡喹酮是目前现场用于日本血吸虫病病原学治疗的唯一商品化药物，该药的大规模广泛应用，在血吸虫病防治中起到了关键性作用。但大规模反复使用抗虫药易导致抗药性的产生。自1980年代以来，我国流行区现场已经服用了超过5000万人份的吡喹酮，虽然在中国尚未发现日本血吸虫对吡喹酮产生抗性的直接证据，但在重流行区的易感人群中已发现有对药物敏感性下降的病例。鉴于我国在中、高度流行区服用吡喹酮面广量大，随着同一易感人群反复使用吡喹酮频率的增加，以及在实施全民化疗中服用吡喹酮剂量不足的概率相对增多，日本血吸虫会否在长期亚治疗剂量吡喹酮的药物选择压力下，出现药物敏感性降低或者诱导出日本血吸虫吡喹酮抗性株，引起了高度广泛关注。更值得注意的是，我们的实验室研究已经证实，在多轮亚治疗剂量吡喹酮药物压力下，可诱导出日本血吸虫吡喹酮抗药性。因此，系统调查当前中国大陆日本血吸虫对吡喹酮的敏感性，建立日本血吸虫吡喹酮敏感性监测/检测相关技术，现场监测吡喹酮的治疗效果及监测抗性产生，是我国血吸虫病防治工作科研亟待解决的重大课题，具有重大现实意义，亦是防治工作的实际需要。本研究内容主要包括如下四个部分。1中国大陆日本血吸虫成虫对吡喹酮的敏感性目的：调查并比较中国大陆不同分离株日本血吸虫、日本血吸虫与曼氏血吸虫、日本血吸虫吡喹酮敏感株与抗性株成虫对吡喹酮的敏感性差异。方法：用日本血吸虫湖南华容株、湖南敏感株、湖北公安株、湖北株、江西南昌株、安徽株、江苏敏感株、本室传代株、湖南抗性株、江苏抗性株和曼氏血吸虫尾蚴感染小鼠，每虫株感染鼠分别予以37.5、75、150、300mg/kg和600mg/kg吡喹酮一次灌胃给药。给药后15d解剖感染鼠，统计吡喹酮给药后各虫株减虫率，计算各虫株吡喹酮的半数有效剂量（50%effectivedose,ED50值）。结果：中国大陆不同分离株日本血吸虫的吡喹酮ED50值为134.3~187.0mg/kg，曼氏血吸虫吡喹酮ED50值为96.3mg/kg。湖南敏感株吡喹酮ED50值为134.4mg/kg，湖南抗性株吡喹酮ED50值为468.8mg/kg；江苏敏感株吡喹酮ED50值为165.4mg/kg，江苏抗性株吡喹酮ED50值为554.9（330.9~930.7）mg/kg。结论：中国大陆各分离株日本血吸虫对吡喹酮的敏感性无显著差异；日本血吸虫和曼氏血吸虫吡喹酮ED50值差异无统计学意义；血吸虫吡喹酮ED50值作为定量指标，能够客观反映血吸虫种群对吡喹酮的敏感性，可用于评估血吸虫对吡喹酮产生抗性的风险。2中国大陆日本血吸虫尾蚴对吡喹酮的敏感性目的：测定并比较中国大陆不同分离株日本血吸虫、日本血吸虫与曼氏血吸虫、日本血吸虫吡喹酮敏感株与抗性株尾蚴对吡喹酮的敏感性差异。方法：取一定数量日本血吸虫湖南华容株、湖南敏感株、湖北公安株、湖北株、江西南昌株、安徽株、江苏敏感株、本室传代株、湖南抗性株、江苏抗性株和曼氏血吸虫尾蚴分别暴露于10-5、5×10-6、10-6、5×10-7mol/L和10-7mol/L吡喹酮溶液中，20、40、60、80min和100min后，在解剖镜下观察各虫株尾蚴的断尾变化，统计断尾率，计算40min时的吡喹酮半数致死浓度（50%lethalconcentration，LC50）。结果：经相同浓度吡喹酮溶液作用一定时间后，各分离株日本血吸虫尾蚴断尾率差异无统计学意义（P>0.05）；在药物浓度和作用时间相同的条件下，曼氏血吸虫尾蚴断尾率均高于日本血吸虫，江苏敏感株和湖南敏感株尾蚴断尾率均高于抗性株（P<0.05）。吡喹酮作用40min后，各虫株日本血吸虫尾蚴的吡喹酮LC50值差异无统计学意义（P>0.05）；日本血吸虫与曼氏血吸虫尾蚴吡喹酮LC50值差异无统计学意义（P>0.05）；湖南抗性株和江苏抗性株尾蚴吡喹酮LC50值显著高于湖南敏感株和江苏敏感株（P<0.05）。结论：中国大陆不同分离株日本血吸虫尾蚴对吡喹酮的敏感性无显著差异；在相同浓度吡喹酮作用一定时间后，曼氏血吸虫尾蚴断尾率高于日本血吸虫尾蚴，但两者40min时吡喹酮LC50值差异无统计学意义。血吸虫尾蚴吡喹酮LC50值能够反映血吸虫种群对吡喹酮的敏感性，可用于检测/监测血吸虫中间宿主螺体内血吸虫对吡喹酮抗药性的产生。3中国大陆日本血吸虫毛蚴对吡喹酮的敏感性目的：测定并比较中国大陆不同分离株日本血吸虫、日本血吸虫与曼氏血吸虫、日本血吸虫吡喹酮敏感株与抗性株毛蚴对吡喹酮的敏感性差异。方法：取一定数量日本血吸虫湖南华容株、湖南敏感株、湖北公安株、湖北株、江西南昌株、安徽株、江苏敏感株、本室传代株、湖南抗性株、江苏抗性株和曼氏血吸虫毛蚴分别暴露于10-5、5×10-6、10-6、5×10-7mol/L和10-7mol/L吡喹酮溶液中，1、3min和5min后，在解剖镜下观察各虫株毛蚴的形态变化，计算毛蚴变形率。结果：暴露于相同浓度吡喹酮溶液一定时间后，各分离株日本血吸虫毛蚴发生形态学变化，但变形率差异无统计学意义（P>0.05）；在药物浓度和暴露时间相同的条件下，曼氏血吸虫毛蚴变形率均高于日本血吸虫（P<0.05），江苏敏感株和湖南敏感株毛蚴变形率均显著高于抗性株（P<0.05）。结论：中国大陆不同分离株日本血吸虫毛蚴对吡喹酮的敏感性无显著差异；在暴露于相同浓度吡喹酮溶液一定时间后，曼氏血吸虫毛蚴变形率高于日本血吸虫；暴露于一定浓度吡喹酮溶液后的血吸虫毛蚴变形率能够定量反映血吸虫种群对吡喹酮的敏感性差异，可用于检测/监测终宿主体内血吸虫吡喹酮抗药性的产生。4日本血吸虫病低度流行区吡喹酮敏感性现场调查目的：评估日本血吸虫病低度流行区现场吡喹酮敏感性。方法：2010年11月至2011年3月，选择日本血吸虫病低度流行区江西省永修县吴城镇三山村和旭光村作为研究现场，对2村6～65岁年龄村民采用尼龙绢集卵孵化法进行血吸虫感染检查。三山村采用40mg/kg吡喹酮一次顿服疗法，旭光村采用30mg/kg吡喹酮2日疗法（总量60mg/kg）对粪检阳性村民实施首次抗血吸虫治疗；治疗后6周采用相同的粪检方法复查粪便，调查患者阴转率，评估吡喹酮化疗效果。结果：2个村共粪检1242名居民，阳性43例，居民血吸虫感染率为3.46%。其中三山村粪检417例居民，阳性13例；旭光村粪检825例，阳性30例。43例粪检阳性居民均采用吡喹酮进行治疗，治疗后6周采用尼龙绢集卵孵化法再次粪检，未检出血吸虫阳性患者。结论：尽管在我国血吸虫病主要流行区采用吡喹酮实施大规模化疗已达30余年，但现场至今尚未发现日本血吸虫中国大陆株对吡喹酮敏感性下降的证据。
【作者】汪伟；
【导师】梁幼生；
【作者基本信息】江苏省血吸虫病防治研究所，病原生物学，2012，硕士
【关键词】日本血吸虫；吡喹酮；尾蚴；毛蚴；敏感性；抗药性；ED50；LC50；

【参考文献】
[1]丁庭芳.轴角位移编码器[J].冶金自动化,1976,02:106-114.
[2]何为.基于价值链分析的我国开发性金融转型路径研究[D].西北大学,金融学,2012,硕士.
[3]马昌国.一维磁性金属纳米线的细胞毒性研究[D].安徽大学,生物化学与分子生物学,2014,硕士.
[4]吴菡菱.方言经验对汉语儿童词意识发展的影响[D].福建师范大学,英语语言文学,2013,硕士.
[5]胡雪娇.BBS用户行为分析[D].首都师范大学,教育技术学,2014,硕士.
[6]吕鹏.生产内容:基于类型的广播节目体系建构策略研究[J].现代视听,2014,05:6-12.
[7]杜琳.建设工程招投标阶段沟通风险的协同管理研究[D].天津大学,工程管理,2013,硕士.
[8]饶念.化铣液铝离子控制工艺技术应用研究[D].南昌航空大学,环境工程,2012,硕士.
[9]姜涵.我国矿企境外投资的演化机制研究[D].中国地质大学（北京）,应用经济学,2013,硕士.
[10]赵红.民营高技术企业竞争力评价及提升[D].沈阳工业大学,企业管理,2003,硕士.
[11]项忠权.工业设备抗震[J].工程抗震.1986(02)
[12]何洁琼.我国开征社会保障税立法研究[D].北方工业大学,经济法学,2014,硕士.
[13]连燕云.神经导航中MRI图像脑肿瘤自动检测分割及DT-MRI研究[D].复旦大学,医学信息学,2011,博士.
[14]汤晨旭.中国留印海员战时工作队研究（1942-1945）[D].中国社会科学院研究生院,中国近现代史,2014,硕士.
[15]王国伟.竞技健美操六人操成套动作编排的研究[D].北京体育大学,体育教学,2013,硕士.
[16]金勇.论我国在押服刑人人格权的保护[D].中国政法大学,民商法学,2003,硕士.
[17]饶溯.扩散滤波方法在地震勘探中的应用研究[D].成都理工大学,固体地球物理学,2013,硕士.
[18]孙成禹,孙甜甜,彭洪超,肖云飞.单点地震数据的一致性组合叠加方法[J].石油地球物理勘探,2009,S1:23-28+167+7.
[19]刘博.面向安全基因匹配的整数全同态加密研究[D].哈尔滨工业大学,计算机科学与技术,2013,硕士.
[20]闫渊.基于信息论和函数依赖的半监督学习[D].吉林大学,软件工程,2013,硕士.
[21]曾志勇.结合ELM和非负矩阵分解的数据表示方法的研究与应用[D].杭州电子科技大学,计算机应用技术,2014,硕士.
[22]王青.全频段电磁频谱监测设备总体方案及设计[D].西安电子科技大学,电子与通信工程,2012,硕士.
[23]张达.多网网关中IP/ATM适配与转发模块的设计与实现[D].西安电子科技大学,通信与信息系统,2011,硕士.
[24]李洁.煤炭企业社会责任绩效评价[D].中国矿业大学,会计学,2014,硕士.
[25]李娜.GASC1在食管鳞癌中的表达和临床意义[D].河南科技大学,肿瘤学,2014,硕士.
[26]童朝南,孙一康.确定采样周期T的实用方法[J].冶金自动化,1989,03:55-56.
[27]王坚强.信息不完全的多准则层次分类方法研究[J].控制与决策,2004,11:1237-1240+1245.
[28]罗宪君.履带式起重机整车电气系统设计[D].山东大学,机械工程（专业学位）,2012,硕士.
[29]卜灵.吴冠中绘画艺术特色研究[D].扬州大学,美术学,2012,硕士.
[30]赵梦遥.河北省旅游产业发展效率分析评价[D].河北经贸大学,产业经济学,2014,硕士.
[31]荀龙巧.林业产业对区域经济增长效应分析[D].江西财经大学,农业经济管理,2013,硕士.
[32]孙楠.DX市政工程公司人力资源战略与规划研究[D].天津大学,工商管理,2013,硕士.
[33]张磊.秦汉时期河洛地区少数民族研究[D].河南科技大学,专门史,2014,硕士.
[34]许萍.基于网络消费的商业模式创新的影响因素研究[D].西安电子科技大学,企业管理,2013,硕士.
[35]刘辉.技术进步促进农业结构优化的机理、模式及对策研究[D].湖南农业大学,农业经济管理,2004,硕士.
[36]张晶.关于长期持有风险资产收益率与风险的问题研究[D].哈尔滨工业大学,金融学,2013,硕士.
[37]徐妙君,顾沈明.面向Web的文本挖掘技术研究[J].控制工程,2003,S1:44-46+50.
[38]蔡章利.工业企业市场营销决策支持系统开发与研究[D].重庆大学,检测技术及自动化装置,2003,硕士.
[39]崔佳鹏.基于压缩感知的图像压缩技术研究与实现[D].哈尔滨工业大学,电子与通信工程,2013,硕士.
[40]龙泽筠.色彩词“青”的汉日对比研究[D].湖北工业大学,外国语言学及应用语言学,2014,硕士.
[41]王文强.美国经济发展面临的困境及其对中美经贸关系的影响[D].东北师范大学,世界经济,2012,硕士.
[42]陈钢.热力系统在线自适应优化调度研究[D].清华大学,动力机械及工程,2003,硕士.
[43]朱卫.饲料脂肪水平对点篮子鱼生长性能、营养成分及消化酶活性的影响[D].上海海洋大学,水生生物学,2013,硕士.
[44]陈艳丽.水培生菜有机态氮的营养效应及营养液溶氧管理技术研究[D].河南农业大学,蔬菜学,2004,硕士.
[45]吴杨.企业人性化管理问题研究[D].华中师范大学,工商管理,2014,硕士.
[46]李桢.我国被派遣劳动者劳权保障问题研究[D].内蒙古大学,法律,2014,硕士.
[47]朱彩蝶.职称评审学科组会议管理系统设计与实现[D].新疆大学,计算机技术,2013,硕士.
[48]董秀春.基于预测控制及模糊补偿的网络控制系统的研究[D].青岛科技大学,检测技术与自动化装置,2012,硕士.
[49]王一鑫.从批评话语角度对营养品广告英语的分析[D].山西师范大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[50]具钊汝.法洛四联症患儿HIRA基因的表达及其调控机制的初步研究[D].复旦大学,儿科学,2012,硕士.