柔肝健脾法对药物性肝损伤作用机制及小鼠模型CYP2E1表达的影响研究

【摘要】目的：以柔肝健脾、活血散瘀法为指导配伍用药，探讨该法在药物性肝损伤中的应用。通过实验观察柔肝降酶方对CCl4诱导的小鼠肝损伤的肝功能指标ALT、AST，病理变化及肝脏CYP2E1表达的影响，探讨柔肝健脾、活血散瘀法对药物性肝损伤的治疗作用及其机制，为柔肝降酶方在药物性肝损伤的临床应用奠定基础。方法：选用6周龄雄性昆明种小鼠60只，适应性喂养一周后，随机分6组，依次为：正常组10只、模型组10只、西药甘草酸二铵肠溶胶囊组10只、中药高剂量组10只、中药中剂量组10只、中药低剂量组10只。采用20%四氯化碳橄榄油，按5ml/kg，腹腔注射，每周2次，4周后，开始灌胃，正常组、模型组灌胃等体积的生理盐水，持续灌胃4周。末次灌药后，禁食不禁水24小时，处死小鼠，眼球取血，检测血清中ALT、AST含量。肝脏组织病理切片观察。采用免疫组织化学染色方法检测肝脏CYP2E1的表达。数据通过SPSS软件统计，采用t检验进行组间两两比较，用均数标准差（xs）表示。结果：（1）血清转氨酶检测结果：与空白组小鼠血清ALT、AST比较，模型组含量均明显升高，有统计学意义（P<0.01），表示造模成功；西药组及中药组血清ALT、AST明显低于模型组，有统计学意义（P<0.05）；中药高剂量组血清ALT、AST明显低于西药组（P<0.05）；低剂量组ALT、AST下降，但与模型组比较无统计学意义（p﹥0.05)。中药组组间比较，中剂量组血清ALT、AST明显低于低剂量组（P<0.01，P<0.05），高剂量组血清ALT、AST明显低于中剂量组（P<0.01）。（2）肝组织病理切片观察结果：广泛的肝细胞肿胀，可见大量出血灶，出血周围肝细胞变性、坏死，汇管区及小叶内炎性细胞浸润。与模型组相比较，西药组和中药高、中剂量组均有不同程度的改善，以中药高剂量组的改善效果更好，中药低剂量组与模型组比较无明显变化。（3）免疫组织化学染色检测结果：各组小鼠CYP2E1均呈不同程度阳性表达。各组阳性率比较，模型组CYP2E1阳性率大于正常组，差异有统计学意义（P＜0.01）；西药组和中药组CYP2E1阳性率均小于模型对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）；中药高剂量组与西药组阳性率比较，有统计学意义（P＜0.05）。结论：小鼠由CCl4诱导出现肝损伤，肝功能指标ALT、AST明显升高，肝细胞肿胀，出现大量出血灶，有变性、坏死，炎性浸润，客观反映了药物性肝损伤的模型。中药柔肝降酶方可以降低肝损伤后小鼠异常的肝功能指标，降低血清转氨酶，改善相应的病理改变，该方剂通过影响肝组织CYP2E1的表达，达到治疗药物性肝损伤的目的，为其临床应用奠定基础。
【作者】黄爱；
【导师】袁德培；
【作者基本信息】湖北民族学院，中医基础理论，2014，硕士
【关键词】药物性肝损伤；柔肝健脾法；机制；细胞色素P4502E1；

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