去瘀生新外治法及接骨膏对家兔骨折愈合中BMP-2表达的实验研究

【摘要】目的:通过对历代关于闭合性骨折的诊治文献研究,论证“去瘀生新”外治法治疗闭合性骨折的理论依据及用药规律。在此基础上,建立家兔骨折模型,通过外敷具有“去瘀生新”作用的土家验方接骨膏来印证“去瘀生新”理论的合理性；再行组织学和免疫组化检测来评价骨折愈合情况及BMP-2在家兔骨折愈合过程中的表达,从分子水平探讨土家族药接骨膏促进家兔骨折愈合的作用机制。方法:（1）理论研究:通过查阅大量古今文献,对闭合性骨折病因病机、治则治法等进行系统归纳和整理,探讨并阐述“去瘀生新”外治法在闭合性骨折治疗中的理论价值和应用价值。（2）实验研究:选取60只成年健康日本大耳白兔,制成左侧桡骨中下段3mm骨缺损模型,随机分为接骨膏实验组（简称实验组）和模型对照组（简称对照组）,并分3W、6W、10W三组实验周期,每组每期10只。于造模术后1d待切口干燥后实验组给予土家族药接骨膏外敷,按小夹板固定治疗骨折原理包扎固定；对照组不敷药,仅以同样大小的小夹板包扎固定。达到试验周期行DR摄片后用空气栓塞法处死动物,取骨组织常规脱钙后行石蜡包埋并行组织切片,HE常规染色和免疫组化检测,以从分子水平探讨BMP-2在骨折愈合过程中的表达及变化情况。（3）所有数据均采用SPSS17.0软件包进行统计学处理,用x±s表示,均采用两个样本均数比较的t检验。结果:（1）闭合性骨折外治法理论探讨:去瘀生新外治法是中医闭合性骨折治疗的重要组成部分；在这一理论指导下所选用的外用膏药更有其独特优势,应用历史悠久,方法便捷,疗效显著,经济安全,是闭合性骨折外治的常用方法。（2）运用具有去瘀生新作用的土家验方接骨膏外敷治疗家兔骨折的实验研究结果如下:DR摄片:第3W末两组均可见到较为清晰的骨折线,实验组骨痂阴影密度相比对照组较高；第6W末实验组骨折线接近消失,实验组骨痂阴影密度、骨痂生长面积均优于对照组；第10W末实验组骨痂生长速度较快,骨折断端骨性连接,骨折线完全消失,髓腔完全再通；对照组仍可见到模糊的骨折线,但有明显骨痂形成并桥接骨折断端,面积缩小,髓腔未通。第3W、6W、10W实验组骨痂生成质量、阴影密度均高,骨痂质量评分均明显优于对照组,有极显著差异（P＜0.01）。HE染色:在光镜下观察,实验组与对照组比较,第3W末实验组骨折区域有大量纤维组织连接,较对照组早,并可见有钙盐团沉积,有些区域偶可见少量骨小梁和软骨成分形成；第6W末实验组骨折区域内纤维骨痂形成及OB（成骨细胞）数量、骨痂量较对照组多,有板层骨形成,软骨成分较少,骨髓腔基本再通；第10W末实验组骨折断端骨痂量明显多于对照组,有大量板层骨连接,骨髓腔再通,骨性愈合时间较对照组早；对照组可见骨小梁形成,软骨成分较少。免疫组化检测:实验组各时相点所测得骨形态发生蛋白-2（BMP-2）及其平均观密度值（MOD值）与对照组各时相点所测BMP-2MOD值行两样本均数比较的t检验,均有极显著性差异（P<0.01）；且实验组各时相点BMP-2的表达量均明显高于对照组,表达时间明显延长。结论:在“去瘀生新”理论指导下所选药物制成的膏药应用历史悠久,使用方法便捷,疗效显著,是闭合性骨折外治的常用方法。土家族药接骨膏具有活血化瘀、消肿止痛、续筋接骨等作用,运用它来外敷治疗闭合性骨折,能明显改善骨折局部的瘀肿症状,加速血肿吸收及钙盐沉积。能通过增强并延长各时相点BMP-2在骨折局部的表达量促进骨折局部骨痂形成,提高骨痂质量,加速骨痂生长速度及骨性愈合,从而提高骨折愈合质量并缩短愈合时间。为进一步阐明接骨膏促进骨折愈合的作用机理及“去瘀生新”在闭合性骨折中的应用及其地位奠定了一定的理论基础。
【作者】肖锋；
【导师】陈龙全；
【作者基本信息】湖北民族学院，中医基础理论，2014，硕士
【关键词】去瘀生新；闭合性骨折；接骨膏；骨形态发生蛋白-2；土家族药；

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