褪黑素对大鼠冻存卵巢组织自体异位移植影响的研究

【摘要】前言近年来肿瘤发病有年轻化趋势。随着各种诊疗技术的不断发展,女性癌症患者的生存率已明显提高。但放化疗在极大程度缓解癌症病情的基础上,也对卵巢组织造成严重的不可逆损伤,导致卵巢早衰。针对年轻患者,肿瘤治疗既要提高生存率又要重视其生活质量,保存其卵巢功能。冻存卵巢组织移植为保存年轻癌症患者的生殖内分泌功能提供了一种值得期待的选择方式,这一研究领域在近年来逐渐受到关注,也取得了一些可喜的成果。冻存卵巢移植过程影响因素众多,近年来研究表明,褪黑素(melatonin,MT)可能通过抗氧化损伤和促进卵泡发育等方面影响移植卵巢的功能。深入研究褪黑素在冻存卵巢移植过程中的作用和影响机制,对于优化卵巢移植技术程序,提高卵巢移植的成功率,更好的保存年轻患者生殖内分泌功能具有一定的意义。本课题在性成熟SD大鼠冻存卵巢组织自体异位移植过程中给予褪黑素,通过抗氧化酶测定以及组织切片卵泡计数了解褪黑素的不同给予时机对卵巢组织的短期影响。通过阴道涂片、性激素测定以及组织切片卵泡计数来了解褪黑素对不同移植部位的卵巢组织的中长期影响。旨为提高移植卵巢组织质量,优化卵巢移植程序提供理论依据。第一部分褪黑素给予时机对冻存移植卵巢组织的短期影响目的：褪黑素的不同给予时机对冻存自体移植卵巢组织抗氧化能力及卵泡剩余的短期影响。方法：将性成熟SD大鼠根据褪黑素的不同给予时机随机分为对照组、冻存前组、移植后组和冻存前+移植后组,分别给予褪黑素20mg/kg×2天或等量生理盐水腹腔注射,通过检测移植48小时后的卵巢组织的SOD活力、GSH-PX活力以及MDA含量,判断褪黑素对冻存移植卵巢组织抗氧化能力的影响。通过组织连续切片HE染色光镜下观察卵泡计数及分类判断褪黑素对移植卵巢组织的组织结构和卵泡剩余的影响。结果：冻存前组及冻存前+移植后组的卵巢组织GSH-PX活力明显高于对照组(P<0.05),冻存前组卵巢组织MDA含量明显低于对照组(P<0.05),SOD活力在各组间无显著差异。卵巢组织冻融后卵泡数量下降,自体移植48小时后卵泡数量进一步下降,各级卵泡构成比在组间无明显差异。冻融及缺血缺氧损伤对窦状卵泡影响更大。结论：褪黑素可以提高大鼠冻存自体移植卵巢组织的抗氧化能力,但对短期内卵泡剩余无明显影响。在冻存前或冻存前+移植后给予褪黑素可起到相应的保护作用。第二部分褪黑素对不同异位移植部位的冻存卵巢组织的中长期影响目的：研究褪黑素对肾被膜下、腿部肌肉以及颈部皮下自体移植的冻存卵巢组织结构和生殖内分泌功能的中长期影响。方法：将性成熟SD大鼠根据不同的自体移植部位随机分为肾被膜下组、腿部肌肉组及颈部皮下组,每一大组根据是否给予褪黑素分为褪黑素组和对照组,通过阴道涂片及血清E2测定判断卵巢组织生殖内分泌功能恢复情况,通过组织连续切片HE染色光镜下卵泡分类及计数判定卵泡剩余及发育情况。结果：除颈部皮下组2只大鼠外,其余大鼠在冻存卵巢组织自体移植后7-9天均可恢复动情周期,血清E2水平与移植前无明显差异。褪黑素组与对照组血清E2水平无明显差异。移植后30天各部位的卵巢组织卵泡构成比与冻存前相比均有显著差异(P<0.05),卵泡逐渐发育成熟。肾被膜下组中,褪黑素组与对照组相比卵泡构成比有显著差异(P<0.05)。各组间的卵泡计数无显著差异。结论：大鼠冻存卵巢组织自体异位移植可基本维持生殖内分泌功能。肾被膜下和腿部肌肉与颈部皮下相比更适宜作为异位移植部位。褪黑素对血清E2水平无明显影响,褪黑素对移植至肾被膜下的卵巢组织具有促进卵泡发育成熟的作用。总结1.大鼠卵巢组织能够耐受冻融过程,在自体异位移植后卵泡可生长发育,并具有生殖内分泌功能。肾被膜下和腿部肌肉与颈部皮下相比,移植成功率更高,更适宜作为异位移植部位。2.褪黑素可以提高大鼠冻存移植卵巢组织的抗氧化能力,但对短期内卵泡剩余无明显影响。在冻存前或冻存前+移植后给予褪黑素可起到相应的保护作用,冻存前给药作用更佳。3.褪黑素对于肾被膜下卵巢组织具有促进卵泡发育成熟的作用。
【作者】李珺玮；
【导师】华克勤；
【作者基本信息】复旦大学，妇产科学（专业学位），2013，博士
【关键词】褪黑素；卵巢移植；玻璃化冷冻；大鼠；

【参考文献】
[1]郑吉,张海亮,骆欢,应富强.循环炉气网带式回火炉的流场均匀性[J].金属热处理,2014,03:134-137.
[2]郑伟.基督宗教传播的视觉媒介研究[D].黑龙江大学,宗教学,2014,博士.
[3]王聪维.分布式视频编码中边信息研究[D].西安电子科技大学,通信与信息系统,2012,硕士.
[4]刘志新.肯尼迪—约翰逊政府与核不扩散体系的建立[D].山东师范大学,世界史,2013,硕士.
[5]臧润国,杨彦承,蒋有绪.海南岛霸王岭热带山地雨林群落结构及树种多样性特征的研究[J].植物生态学报,2001,03:270-275.
[6]刘雷.RoHS检测用聚氯乙烯中镉、铬、汞、铅标准物质的研制[D].北京化工大学,材料科学与工程,2013,硕士.
[7]孙常防.双源CT支气管动脉成像技术在咯血诊断中的应用研究[D].泰山医学院,影像医学与核医学,2012,硕士.
[8]周康宁.V-4Cr-4Ti合金的电子辐照损伤研究[D].北京有色金属研究总院,材料科学与工程,2014,硕士.
[9]赵禹.正当防卫正当化根据的重新阐释[D].东北师范大学,刑法学,2012,硕士.
[10]王德升.SiCp/Al-Cu-Mg复合材料的制备和组织性能研究[D].北京有色金属研究总院,材料科学与工程,2014,硕士.
[11]黄先达.浅析汉代雕塑美学精神在当代雕塑中的应用[D].郑州大学,美术学,2013,硕士.
[12]范英明.鸡西市地税局管理信息系统设计与实现[D].吉林大学,软件工程（专业学位）,2014,硕士.
[13]靳晓婷.民间继承习惯与现行法冲突的原因分析[D].中国政法大学,比较法学,2014,硕士.
[14]张丽娜.历史街区的防灾减灾设计研究[D].重庆大学,建筑学（专业学位）,2014,硕士.
[15]张喜铭,姚建刚,李立颖,余虎,谷林峰.基于效用分析方法的发电企业最优报价策略[J].电力系统自动化,2005,07:12-16+78.
[16]王朋.大型挖泥船用回转支承轴承性能研究[D].浙江海洋学院,农业推广（专业学位）,2013,硕士.
[17]李艳波,刘雨,苏宝库.改进的小波阈值滤波算法在陀螺仪漂移伺服法测试中的应用[J].控制与决策,2010,05:681-685.
[18]刘云龙,李人厚,刘建书.基于PSR模型的规划算法[J].控制与决策,2009,02:289-292.
[19]戴伟,高佳琪,曹罡,欧阳峰.深圳市郊区大气中PM_(2.5)的特征分析[J].环境科学,2012,06:1952-1957.
[20]马文杰.高一函数教学中学生数学解题错误的实证研究[D].华东师范大学,学科教育,2014,博士.
[21]洪敏.北京市土地利用动态变化的研究[D].中国农业大学,土地资源管理,2004,硕士.
[22]王海.三一重工有限公司供应商管理研究[D].湖南大学,工商管理,2010,硕士.
[23]吴琼.POLD1反义RNA对人肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用[D].广西医科大学,生物医学工程,2013,硕士.
[24]高文琳.我国政府环境绩效审计评价体系探究[D].沈阳理工大学,会计学,2013,硕士.
[25]任小洋.果蔬农产品配送联盟的组建与利益分配研究[D].兰州理工大学,管理科学与工程,2014,硕士.
[26]周稳管政兵蔡宇杰宋晨萌廖祥儒.芽孢杆菌漆酶的研究进展[J].微生物学通报.
[27]王亦恩.基于优化后的粘弹性阻尼结构的动力分析[D].西南交通大学,工程力学,2013,硕士.
[28]孟丽娟.Z2CND18.12N钢疲劳裂纹损伤监测技术研究[D].大连理工大学,材料无损检测与评价,2013,硕士.
[29]胡杨.《环球时报》中英文版对美国形象的构建[D].内蒙古大学,新闻与传播,2014,硕士.
[30]张健平.我国集体土地用益物权抵押制度研究[D].安徽大学,法律,2013,硕士.
[31]肖杰.方山大鼓的田野考察与研究[D].南京航空航天大学,音乐学,2013,硕士.
[32]赵宽.国资改革背景下的央企集团投资能力预测[J].中国商贸,2015,01:179-181.
[33]张海娥.城乡交错带的旅游系统优化对策研究[D].云南财经大学,旅游管理,2014,硕士.
[34]杰克.瑞典电力产能综合资源战略规划[D].清华大学,管理科学与工程,2013,硕士.
[35]蒋枋栖.浅谈代词on在语用中的模糊性与复杂性[D].四川外国语大学,法语语言文学,2014,硕士.
[36]邸宝辉.全视技术的数字内容快速获取技术研究[D].吉林大学,计算机应用技术,2014,硕士.
[37]张海勃.四种改良剂对Cd胁迫下马铃薯生长发育的影响[D].内蒙古农业大学,果树学,2013,硕士.
[38]孙乃泉.塔里木盆地顺9井区柯坪塔格组沉积相与地震储层识别[D].西北大学,矿产普查与勘探,2013,博士.
[39]乔西现.关于塔河流域近期综合治理若干问题的思考[J].中国水利.2003(05)
[40]刘本喜.基于P2P网络借贷平台的投资人风险研究[D].首都经济贸易大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[41]王冬.大金电机公司质量成本改进研究[D].苏州大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[42]郑晨.激光熔覆NiCr/Cr_3C_2-WS_2高温自润滑耐磨复合涂层研究[D].苏州大学,机械制造及其自动化,2013,硕士.
[43]阿迪雅.马克思、恩格斯城乡统筹发展思想研究[D].内蒙古农业大学,马克思主义基本原理,2013,硕士.
[44]凌月红.高校大学生体育课健身运动处方教学模式对体质影响的研究[D].湖南师范大学,运动人体科学,2004,硕士.
[45]胡艳.微视频教学资源在初中英语课堂教学中的应用研究[D].华中师范大学,现代教育技术,2013,硕士.
[46]刘丽萍.过程完整化教学模式及其在英语教学中的应用[D].西北师范大学,教育,2003,硕士.
[47]浩洁.文学的想象力与思想的社会性[D].海南大学,文艺学,2012,硕士.
[48]张建华.河道工程移民安置研究[D].河海大学,水利工程,2003,硕士.
[49]毕强.长春市伊通河污水主管道改造工程设计研究[D].吉林大学,环境工程,2014,硕士.
[50]廖晒君.论中学剧本教学的突破[D].湖南师范大学,课程与教学论,2013,硕士.