Toll样受体4在柯萨奇B4病毒致ICR小鼠胰腺损伤中的作用研究

【摘要】研究背景及目的：柯萨奇B4病毒（CoxsackievirusB4，CVB4）感染是影响1型糖尿病（Type1diabetes,T1D）发生发展的重要环境因素，但其具体的作用机制还尚不明确。Toll样受体4（Toll-likereceptor4,TLR4）作为Toll样受体家族的主要成员之一，对病原微生物感染早期的特异性识别及介导炎症反应均具有十分重要的意义。TLR4明显表达于人及大鼠胰腺组织的腺管上皮细胞及血管内皮细胞，在急性、慢性胰腺炎等胰腺组织炎性病变过程中发挥重要作用。因此，本实验研究通过检测CVB4感染ICR小鼠后胰腺组织中TLR4在基因及蛋白质水平的表达情况，并检测TLR4通路相关细胞因子的表达水平，明确TLR4在CVB4感染小鼠胰腺组织损伤中的具体作用，为研究CVB4感染影响T1D的作用机制提供一定的理论基础。材料及方法：利用本实验室保存的CVB4jlu06病毒株感染ICR小鼠建立动物感染模型，对照组小鼠以相同方式注射磷酸盐缓冲液（PBS），分别分为19天、35天、50天的感染组及对照组（10只/组），在各时间点取得各组小鼠的胰腺组织进行实验。采用相应试剂盒检测小鼠血糖浓度及胰腺组织中CVB4的存在情况。通过实时定量PCR及流式细胞术分别检测TLR4在胰腺组织中基因及蛋白质水平的表达情况，ELISA方法检测细胞因子IL-6、IL-10、TNF-α和MCP-1的表达水平。实验结果及结论：与对照组相比，感染CVB4jlu06的ICR小鼠出现糖代谢异常，血糖浓度明显升高。且感染组小鼠多食多饮多尿，与对照组相比体重增长缓慢，尤其在19天后增长幅度明显减小。用ELISA法在19天时可在胰腺组织中明显检测到病毒，在35天时仍可检测到较弱的病毒存在。此外，胰腺组织中TLR4的基因及蛋白表达水平在感染病毒35天后均明显升高(p<0.05)，细胞因子IL-6、TNF-α、MCP-1的含量在感染35天后也出现明显升高(p<0.05)。TLR4在CVB4jlu06感染的小鼠胰腺组织中有较明显的表达升高，且TLR4通路相关细胞因子在受感染胰腺组织中表达量也升高，CVB4感染可能通过TLR4通路诱导促炎症因子的高水平表达，使胰腺细胞发生炎性损伤，进而促进T1D的发生发展。
【作者】呼洁；
【导师】李凡；
【作者基本信息】吉林大学，微生物学，2014，硕士
【关键词】柯萨奇B4病毒；胰腺；1型糖尿病；TLR4；细胞因子；小鼠；

【参考文献】
[1]孔晓岚,熊永建.石墨烯纳米十字结电子输运性质[J].宁波大学学报(理工版),2010,03:99-102.
[2]扈永培.柞蚕丝素蛋白的阳离子化及其用作基因载体的初步研究[D].苏州大学,纺织工程,2013,硕士.
[3]刘颖.论假释制度及其法律监督[D].中国政法大学,法律,2003,硕士.
[4]柴同志,谢小龙,乔新明.MBBR工艺在几种典型废水处理中的应用[J].科技资讯,2014,03:136-137.
[5]谢京佳.A公司中层管理者胜任力研究[D].北京交通大学,2014.
[6]汤广福.2006年国际大电网会议系列报道——高压直流输电和电力电子技术[J].电力系统自动化,2007,08:1-6+35.
[7]闻意.差别化住房政策对商品住房市场的影响研究[D].哈尔滨工业大学,土地资源管理,2014,硕士.
[8]刘娜.叙事教学在幼儿生命教育中的应用研究[D].山东师范大学,学前教育学,2013,硕士.
[9]盛立,杨慧中.基于完备容差关系的扩充粗糙集模型[J].控制与决策,2008,03:258-262.
[10]王爱华,陶旭莲,唐金蓉,袁振明.外气对铝合金力学性能的影响[J].中国气功科学.1995(02)
[11]闫雯.新华制药股份有限公司内部控制分析[D].北京交通大学,2013.
[12]程世东.片段弓技术用于上颌双侧尖牙唇侧易位阻生的治疗[D].大连医科大学,口腔临床医学,2012,硕士.
[13]颜丽芬.超顺磁氧化铁标记对大鼠脂肪干细胞及其心肌样分化细胞转铁蛋白受体和铁蛋白表达的影响[D].南方医科大学,影像医学与核医学,2012,硕士.
[14]杜彦玲.人民监督员制度存在的问题及对策分析[D].河北师范大学,马克思主义基本原理,2013,硕士.
[15]王永固,张庆.MOOC:特征与学习机制[J].教育研究,2014,09:112-120+133.
[16]汪坤,李巍,李莉莉.宽带无线接入——WiMAX[J].电信网技术.2005(03)
[17]安小坤.镍集流体锗负极材料的制备及电化学性能研究[D].哈尔滨工业大学,化学工程与技术,2014,硕士.
[18]陈明涛.商标连续不使用撤销制度中的“商标使用”分析[J].法商研究,2013,01:144-151.
[19]李纯.水木清华,祖国以光[J].中国青年,2011,09:14-17.
[20]阙盈盈.基于人物角色法的网络商店商品陈列的研究[D].浙江理工大学,应用心理学,2014,硕士.
[21]郭晓娇.中小学体育教师教学技能现状及对策研究[D].淮北师范大学,体育教育训练学,2014,硕士.
[22]王雪.支持车联网连接的车载信息服务系统客户端设计与实现[D].吉林大学,计算机应用技术,2014,硕士.
[23]本报特约撰稿吴康迪.石墨烯何以结缘诺贝尔奖[N].计算机世界,2010-10-25037.
[24]薛彦明.六方氮化硼微米纳米材料的制备、表征和应用[D].河北工业大学,2014.
[25]何文勇.基于光谱与纹理的高光谱影像半监督降维与融合研究[D].上海大学,信号与信息处理,2013,硕士.
[26]晁晓洁.基于提升小波的故障诊断方法研究[D].沈阳理工大学,控制理论与控制工程,2013,硕士.
[27]赵慧慧.社会企业的内在张力[D].华中师范大学,社会学,2014,硕士.
[28]张海峰.河北省游泳运动员竞技提高阶段训练特征分析[D].河北师范大学,运动训练,2011,硕士.
[29]孙铭.基于精益运营模式的T港口装卸成本管理研究[D].天津大学,项目管理,2013,硕士.
[30]闫向旭.万经书法与书学思想研究[D].首都师范大学,美术学,2014,硕士.
[31]闫子飞.面向中医舌诊的舌下静脉特征获取与分析[D].哈尔滨工业大学,2010.
[32]孔烨.基于老年人服务需求的老年公寓发展研究[D].河北经贸大学,社会保障,2012,硕士.
[33]宋捷,党耀国,林晨昱.人员面试的灰色群决策模型研究[J].控制与决策,2011,04:507-512.
[34]里天姝.有限元法分析多用唇弓和摇椅弓在矫治深覆（牙合）时的作用效果[D].大连医科大学,口腔临床医学,2012,硕士.
[35]赵莉.SET-LRP法合成丙烯酰胺类聚合物的研究[D].吉林大学,高分子化学与物理,2014,硕士.
[36]雍熙.平阳霉素治疗血管瘤临床研究—单中心21年治疗回顾性分析[D].川北医学院,外科学,2014,硕士.
[37]刘治德,王勇.美国反辐射导弹的发展历程和方向[J].飞航导弹.2005(03)
[38]孙岩.基于IOS平台的个人移动网络电视系统设计与实现[D].北京工业大学,软件工程（专业学位）,2013,硕士.
[39]肖海英.尚真求理 洗尽铅华[D].河南大学,美术学,2004,硕士.
[40]李建中.中国山楂果实中生理活性成分的HPLC分析研究[D].河北农业大学,农产品加工及贮藏工程,2004,硕士.
[41]许雅芬.孤残儿童融入寄养家庭的需求问题研究[D].福建师范大学,社会工作（专业学位）,2012,硕士.
[42]王丽红.秦皮乙素对Hepa1-6细胞及其小鼠皮下移植瘤的抑制作用与机制的研究[D].辽宁医学院,药物分析学,2012,硕士.
[43]记者庞利萍　特约记者顾定槐.碳材料创新亟待高端发力[N].中国化工报,2011-08-03002.
[44]曾玉华.三氧化二砷、顺铂对人卵巢癌细胞株SKOV3的联合作用及相关机制的研究[D].重庆医科大学,妇产科学,2004,硕士.
[45]曹纪铭.基于.NET的流通企业ERP软件研究与实现[D].首都经济贸易大学,信息经济,2004,硕士.
[46]孙智杰.《幼儿园教育指导纲要》颁布以来幼儿园体育活动开展情况调查及分析[D].南京体育学院,体育教育训练学,2013,硕士.
[47]丁雅桑.声乐专业之视唱练耳教学研究[D].武汉音乐学院,音乐与舞蹈学,2013,硕士.
[48]张婧姝.沙特经济发展对维持社会稳定的作用研究[D].北京外国语大学,阿拉伯语语言文学,2013,硕士.
[49]陈庚.整合多层次数据多方位解析和注释人类转录组[D].华东师范大学,生物医学,2014,博士.
[50]钟平先.A公司研发和生产质量控制流程优化研究[D].山东大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.