蒙药荜茇宁的光谱分析方法及其与牛血清白蛋白相互作用的研究

【摘要】荜茇宁(Piperlonguminine,GBN)是蒙药荜茇的降血脂活性成分,为胡椒碱类衍生物,迄今尚无有效测定生物样品中GBN的方法。本研究工作以GBN为研究对象,建立了能够准确检测生物样品中GBN的新方法,并采用荧光光谱法、紫外吸收光谱法研究了GBN与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。这一工作对理解GBN在生物体内的代谢过程以及阐明GBN在体内的药理作用具有重要的理论意义。首先将稀土配合物偶氮胂Ⅲ-La(Ⅲ)作为光谱探针,在酸性条件下,以偶氮胂Ⅲ-La(Ⅲ)与GBN形成组成比为1：1：2配合物为基础,研究了GBN与偶氮胂Ⅲ-La(Ⅲ)作用的紫外-可见吸收光谱、共振瑞利散射光谱,分别建立了褪色分光光度法、共振瑞利散射法测定生物样品中GBN的新方法。方法的线性范围分别为0.02733～0.5466μg/mL、0.02733-5.466μg/mL,检出限为0.02206μg/mL、0.00859μg/mL。利用该体系对生物样品中的GBN进行测定,并与已有测定GBN的方法进行比较,发现在灵敏度、抗干扰性等方面均有提高。还根据GBN具有荧光特性且荧光强度可被表面活性剂吐温-20增敏的特性,建立了胶束增敏荧光法测定GBN,线性范围为0.02733-8.199μg/mL,检出限为0.001690μg/mL,可用于生物样品经适当分离后GBN的测定。在此基础上,采用同步荧光技术消除生物样品的背景荧光对GBN荧光光谱的干扰,建立了直接测定血清中GBN含量的新方法,线性范围为0.005466～3.2796μg/mL,检出限为0.001197μg/mL,可快速进行大鼠血清中GBN含量的直接荧光测定。拟定的荧光方法灵敏度高、选择性好,实际样品测定结果令人满意。在GBN与蛋白质相互作用方面,采用紫外-可见吸收光谱法和荧光光谱法,在模拟生理环境条件下,分别研究了胡椒碱(Piperine,PP).姜黄素(Curcumin,Cur)与GBN之间的相互作用,探讨其对GBN与BSA作用的影响。结果表明,GBN、PP、Cur与BSA的相互作用过程均属于静态猝灭,结合常数Ka(BSA-GBN)<Ka(BSA-PP)、Ka(BSA-GBN)>Ka(BSA-Cur);计算不同温度下的结合参数、作用距离及相应热力学参数,推断其作用力类型分别为静电作用、疏水作用、疏水作用；标记竞争实验显示,与BSA的作用位点为siteⅠ、siteⅡ、siteⅡ；紫外吸收光谱、同步荧光光谱显示GBN、PP、Cur改变了色氨酸残基周围的环境,对BSA构象产生了影响。多元配体的协同性作用分析表明,GBN、PP、Cur单独与BSA的结合作用是负协同性的；PP、Cur分别与GBN共存时,对GBN与BSA的相互结合无协同性作用,但是K(BSA-PP-GBN)>K(BSA-GBN)、K(BSA-Cur-GBN)>K(BSA-GBN)，表明三元体系中GBN与BSA的结合稳定性增加,PP、Cur对GBN与BSA结合的作用属于添加。三维荧光光谱的Stokes位移和荧光强度变化,进一步说明GBN与PP、Cur之间存在相互作用。
【作者】苗澍；
【导师】敖登高娃；
【作者基本信息】内蒙古大学，化学，2014，硕士
【关键词】荜茇宁；褪色分光光度法；共振瑞利散射法；同步荧光光谱法；牛血清白蛋白；相互作用；

【参考文献】
[1]滕凯.恩度联合肝动脉化疗栓塞后肝癌患者血清VEGF、HIF-1A、OPN、CTGF的动态变化[D].山东大学,临床医学（专业学位）,2013,硕士.
[2]胡明星,黄运生,陈学.烧结杯点火装置控制系统[J].冶金自动化,2011,03:47-50.
[3]王珊.基于贝叶斯信息融合的测量不确定度评定[D].合肥工业大学,仪器仪表工程（专业学位）,2014,硕士.
[4]邢艳东.道路交通事故受害人社会救助基金请求权问题研究[D].吉林大学,法律,2014,硕士.
[5]蒋嵘,霍建国,杨帆.基于数据挖掘技术的边防管理决策支持系统[J].军事运筹与系统工程,2001,02:48-51.
[6]谭金凤.知觉负荷调节作用与工作记忆引导效应的交互[D].西南大学,发展与教育心理学,2014,硕士.
[7]刘欣华.模因理论应用于高中英语写作的实证研究[D].渤海大学,学科教学（专业学位）,2014,硕士.
[8]方周菲.熊胆对自发性高血压大鼠血压，心血管结构和功能的影响[D].福建医科大学,内科学,2014,硕士.
[9]石杰.基于身份的认证密钥协商协议研究[D].黑龙江大学,应用数学,2013,硕士.
[10]沈杰.基于WINCE5.0的PC/104主板设计[D].浙江工业大学,2013.
[11]马燕.第三人介入情形下安全保障义务人的补充责任探析[D].暨南大学,法律,2013,硕士.
[12]赵建东,王浩,刘文辉.高速公路旅行时间的自适应插值卡尔曼滤波预测[J].华南理工大学学报(自然科学版),2014,02:109-115.
[13]陈志杰.中小企业电子商务绩效影响因素经验研究[D].南京财经大学,国民经济学,2012,硕士.
[14]潘军华.散装粉料运输车罐体结构强度分析与优化设计[D].长安大学,机械工程（专业学位）,2014,硕士.
[15]曹海燕.上下料机械手柔性手腕的运动分析及优化设计[D].江南大学,机械设计及理论,2012,硕士.
[16]蔡继峰.巢湖市中庙镇产业结构性调整背景下的旧城更新[D].清华大学,建筑设计及其理论,2002,硕士.
[17]周展.大型民族管弦乐《抒情变奏曲》的解读与指挥诠释[D].中国音乐学院,音乐学,2012,硕士.
[18]陈朝猛.太阳能电池装备多学科协同设计的数据管理方法研究[D].上海大学,机械制造及其自动化,2014,硕士.
[19]倪春岩.辽机股份铸件产品国际营销策略[D].大连理工大学,工商管理,2003,硕士.
[20]杨龙海.肺癌相关蛋白OLC1在非小细胞肺癌患者外周血血浆中的水平及其临床意义[D].北京协和医学院,肿瘤学,2014,博士.
[21]杨传得.花生脂肪酸分析技术研究及鲁丰2号高油酸突变体差异表达基因分离[D].吉林农业大学,作物生物技术,2012,硕士.
[22]卞亚峰.基于零件加工过程的毛坯尺寸基准的研究与应用[D].太原科技大学,机械制造及其自动化,2013,硕士.
[23]陈娜.复合材料充气舱体振动及衰减特性研究[D].哈尔滨工业大学,工程力学,2014,硕士.
[24]王志坚.基于Petri网的企业信息化系统建模及关键技术研究[D].中南大学,2007.
[25]赵伟.特殊地块整理效益评价的理论和方法探讨[D].华中师范大学,地理信息系统,2013,硕士.
[26]张方.扬子鳄的行为和时间分配研究及其分类地位探讨[D].安徽师范大学,动物学,2004,硕士.
[27]芦风娟.基于语料库的英语谚语及其变体使用研究[D].山西师范大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[28]吕小红.舰载战术导弹垂直发射系统——未来海战的关键[J].飞航导弹.2006(02)
[29]薛珊珊.中国上市商业银行绩效评价研究[D].贵州财经大学,数量经济学,2013,硕士.
[30]李林,孙旺宁,田士兵,夏晓翔,金爱子,李俊杰,顾长志.花瓣状少层石墨烯纳米片复合纳米硅锥阵列结构的场发射特性研究[A].中国电子学会真空电子学分会、大功率微波电真空器件技术国家级重点实验室.中国电子学会真空电子学分会第十九届学术年会论文集（下册）[C].中国电子学会真空电子学分会、大功率微波电真空器件技术国家级重点实验室:,2013:5.
[31]夏维力李晓歌.校企合作创新网络信任的动态演进分析[J].计算机工程与应用.
[32]李辉.张家港暨阳湖欢乐世界儿童主题公园设计[D].湖南大学,工业设计工程,2013,硕士.
[33]师海涛.辽河油田洼60断块薄层稠油水平井优化设计[D].东北石油大学,石油与天然气工程（专业学位）,2013,硕士.
[34]孟楠.弹载图像记录器及单元测试装置的研制[D].中北大学,测试计量技术及仪器,2014,硕士.
[35]王铁方.蜜网模型的研究[D].成都理工大学,2004.
[36]赵文元.征地补偿纠纷司法解决机制研究[D].西南大学,民商法学,2013,硕士.
[37]熊娟.基于图像处理的月球撞击坑识别技术研究[D].华东交通大学,应用数学,2014,硕士.
[38]蔚晓晖.基于短多壁碳纳米管的葡萄糖氧化酶电极的研制[D].郑州大学,2014.
[39]周默涵.王朔小说的影像转化[D].扬州大学,中国现当代文学,2012,硕士.
[40]佀庆帅.益气通络法治疗气虚血瘀型特发性肺纤维化的临床疗效观察[D].北京中医药大学,中医内科学,2014,硕士.
[41]孙莉.办公空间情感化设计表达运用研究[D].西南交通大学,设计艺术学,2013,硕士.
[42]杜娟.咔唑类染料敏化剂的合成及在太阳能电池中的应用研究[D].郑州大学,有机化学,2013,硕士.
[43]路冰.钢板—混凝土组合悬臂梁拟静力试验研究[D].哈尔滨工业大学,防灾减灾工程及防护工程,2014,硕士.
[44]钟生贵,黄垠瑜.铁路远程视频监控系统功能与应用的探讨[J].中国铁路.2008(05)
[45]戎晓霞.不确定优化问题的若干模型与算法研究[D].山东大学,2005.
[46]卢艳霞.汽车尾气能量转换基础研究[J].北京交通大学学报,2014,02:85-88.
[47]汪礼亮.作为业界“游戏”的中国新闻奖论文评选[D].安徽大学,新闻学,2014,硕士.
[48]孙红艳.孙星衍与《续古文苑》研究[D].郑州大学,中国古代文学,2013,硕士.
[49]黎黎.卢梭的主体性教育思想研究[D].湖南师范大学,教育史,2014,硕士.
[50]伸浩通.北方地区农村住宅供暖季适宜通风方式研究[D].哈尔滨工业大学,建筑与土木工程,2014,硕士.