N~+离子注入甘草诱导根部基因差异表达的分析

【摘要】离子束生物工程自上世纪80年代提出以来,短短数十年发展迅速,在我国已成为对作物、植物、微生物等诱变育种、获得优良性状的主要诱变方式之一,取得了广泛的成果。离子束注入技术相比于其他物理化学诱变手段来说,具有损伤轻、突变频率高、突变谱宽的特点,利于筛选和获得突变种。甘草作为一种价值很高的药用植株,其代谢产物甘草酸及其他化合物有很高的药用价值,其次,作为牧区主要牧草之一,还具有防风固沙、为牲畜提供混合牧草原材料的主要作用。甘草相关的研究近年来日渐增多。离子束诱变育种在甘草的应用也有报道,主要集中在离子注入对甘草当代抗逆性、酶活、基因多态性的分析,对于离子注入造成的甘草当代基因表达多态性的研究尚未见报道。本论文研究了不同剂量N+离子注入甘草对甘草萌发的影响以及离子注入甘草诱导的当代幼根中基因的差异表达。主要结论如下：1.采用N+离子注入处理甘草种子,分6个剂量(2.6×1016ions/cm2,3.9×1016ions/cm2,5.2x1016ions/cm2,6.5×1016ions/cm2,9.1×1016ions/cm2)进行处理,测定其发芽指标,发现发芽率、发芽势、发芽指数三个指标均随剂量的升高呈类似“马鞍形”曲线,各处理组发芽率均高于对照组,证实了在此剂量范围内N+离子注入对甘草种子的萌发具有促进作用,在注入剂量为2.6×1016ions/cm2时对甘草种子发芽的促进作用最大,并在注入剂量7.8×1016ions/cm2时达到第二个峰值,发芽率、发芽势和发芽指数3个指标反应的趋势几乎相同,且处理间具有显著性。2.利用cDNA-AFLP分子标记技术N+离子注入甘草种子诱导甘草当代幼根中基因差异表达进行了分析。利用反转录技术获得氮离子注入甘草幼根以及未经氮离子注入的甘草幼根的cDNA,使用PstI和MseI两种限制性内切酶进行双酶切,设计接头与预扩增引物以及对应的9对选扩引物,进行特异片段扩增及测序,经过分析,9对选扩引物共81个引物搭配的扩增结果,共出现条带数1576条,其中差异条带数286条,约占总条带数的20%,将多态性片段进行克隆和测序,共有92个样品长度与分离纯化片段基本一致具有可靠性,利用BLAST对测序结果进行同源性比对分析,其中53条测序序列检索到与之同源性高的DNA序列或已知功能的蛋白mRNA序列。
【作者】刘腾；
【导师】那日；郭九峰；
【作者基本信息】内蒙古大学，生物物理学，2014，硕士
【关键词】离子束；甘草；诱变育种；cDNA-AFLP；差异表达；

【参考文献】
[1]余秋平.刍议社会参与学校管理[D].江西师范大学,教育管理,2004,硕士.
[2]屠芳奇,高裕江.伊东丰雄建筑中的新型多米诺实验解读[J].建筑师,2014,03:87-91.
[3]何庆.基于C管理模式的税务文化建设研究[D].华中师范大学,公共管理,2014,硕士.
[4]周恒俊,曹晋彰,郭创新,曹一家.基于ASOA集群智能微网的信息化管理平台设计[J].电力系统自动化,2010,13:66-71.
[5]周贤栋.浅析宽带流媒体平台[J].铁道通信信号.2005(11)
[6]吴生海.干湿复合橡胶沥青路面关键技术研究[D].长安大学,道路与铁道工程,2014,硕士.
[7]徐飞.正在发展的虚拟影像[D].中央美术学院,摄影,2013,硕士.
[8]刘帅奇,胡绍海,肖扬,安永丽.基于局部混合滤波的SAR图像边缘检测[J].电子与信息学报,2013,05:1120-1127.
[9]周朋朋.法律监管对审计质量和审计收费的影响：来自沪深上市公司的经验证据[D].山东财经大学,会计学,2012,硕士.
[10]孟祥然.高品质谐振腔精确光存储时间测试方法的研究[D].中北大学,测试计量技术及仪器,2013,硕士.
[11]罗辉.汽车旅馆顾客需求研究[D].中南林业科技大学,旅游管理,2013,硕士.
[12]石岩.FcγⅡB I232T基因多态性与膜性肾病易感性的研究[D].吉林大学,内科学,2014,硕士.
[13]崔彦婷.社会拒绝增强社会痛苦：不同自我反思方式的调节作用[D].郑州大学,应用心理学,2013,硕士.
[14]何伟娜.基于Seam架构的信息发布系统的设计与实现[D].西安电子科技大学,计算机技术,2010,硕士.
[15]徐鑫.四川省TC连锁药店供应链管理系统的设计与实现[D].电子科技大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[16]徐斌斌.磁场/温度/pH响应性纳米微胶囊的制备及表征[D].安徽大学,高分子化学与物理,2014,硕士.
[17]徐凝.牛化脓隐秘杆菌分离鉴定及毒力因子检测[D].东北农业大学,预防兽医学,2013,硕士.
[18]杜姗.西部地区小城镇发展模式研究[D].西安电子科技大学,企业管理,2012,硕士.
[19]张翠.水溶性沥青基多孔炭的制备及其在双电层电容器中的应用[D].天津大学,化学工艺,2013,硕士.
[20]鲁光.Pd/碳基气体扩散电极制备及还原CO_2制取液体燃料研究[D].北京林业大学,环境科学,2013,硕士.
[21]张剑.阳离子荧光染料的合成及应用研究[D].苏州大学,材料工程,2012,硕士.
[22]李阳.内质网应激调控乙酰肝素酶表达的机制及其对乳腺癌细胞侵袭迁移的影响[D].蚌埠医学院,药理学,2013,硕士.
[23]周丽慧.公司瑕疵设立研究[D].扬州大学,民商法学,2012,硕士.
[24]赵钦聪.中国围海造地引发的近海生态问题研究[D].渤海大学,科学技术哲学,2013,硕士.
[25]李青芮.低碳经济视角下产业集群发展研究[D].重庆大学,区域经济学,2014,硕士.
[26]罗涵.基于小型化毫米波磁控管谐振系统的设计及优化[D].电子科技大学,电子与通信工程（专业学位）,2012,硕士.
[27]张春妹.澳大利亚学历资格框架下职业教育与高等教育的衔接[J].高等职业教育(天津职业大学学报),2014,05:14-17.
[28]杜佳.于漪人文作文观及其对当今中学作文教学的启示[D].湖南师范大学,学科教学（专业学位）,2014,硕士.
[29]萌生.百万富翁Ⅲ(48)[J].股市动态分析,2011,09:32-33+51.
[30]肖艳勇.湖北人口城镇化发展相关问题研究[D].华中师范大学,政治经济学,2014,硕士.
[31]万姝岐,翁前锋.纳米氧化铜/石墨烯修饰电极的制备及对H_2O_2的检测[J].广州化工,2015,10:98-100+150.
[32]谢菲菲.京东商城在B2C电子商务市场的发展战略研究[D].西南交通大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[33]杨晓.产业结构与人才结构协调适配度研究[D].重庆大学,产业经济学,2014,硕士.
[34]李欣丰.堆积体高陡边坡开挖稳定性分析与加固技术研究[D].湖南大学,建筑与土木工程,2014,硕士.
[35]陈含影.支架式作文教学在落后山区中学实施的可行性分析[D].华中师范大学,学科教学,2014,硕士.
[36]王鹏.轻型直流输电系统鲁棒控制策略研究[D].西南交通大学,电力系统及其自动化,2013,硕士.
[37]关青梅.英汉语言学类学术书评的级差资源对比研究[D].宁波大学,外国语言学及应用语言学,2014,硕士.
[38]聂英石.电火花沉积铁基非晶合金涂层的微观组织和性能研究[D].沈阳理工大学,材料学,2013,硕士.
[39]李杨.中级阶段留学生听力难度构成因素及教学对策[D].上海外国语大学,汉语国际教育,2013,硕士.
[40]于鑫.鱼类耳石形态和微化学分析方法及其在群体识别中的实证研究[D].中国科学院研究生院（海洋研究所）,海洋生态学,2014,博士.
[41]江国栋,常青,杨福福,胡晓允,唐和清.超声辅助合成磁性四氧化三铁/氧化石墨烯复合物及其在染料去除中的应用（英文）[J].ChineseJournalofChemicalEngineering,2015,03:510-515.
[42]刘志丹.河南省农业产业化发展现状及对策探究[D].河南农业大学,农业科技组织与服务,2012,硕士.
[43]张岚.大德客家古村落空间营造对水体环境的适应性研究[D].华侨大学,建筑学（专业学位）,2014,硕士.
[44]陈志刘峰李哲中国科学技术发展战略研究院.慎防石墨成为下一个稀土产业[N].科技日报,2014-03-17001.
[45]王艳萍.当代中国的生存哲学[D].安徽师范大学,马克思主义哲学,2004,硕士.
[46]刘长民.山东省新型农村社区建设与发展研究[D].中国海洋大学,农业经济管理,2014,博士.
[47]关祎晨.公司董事注意义务研究[D].沈阳师范大学,民商法学,2014,硕士.
[48]张昂霄.明清“三姑六婆”群体研究[D].东北师范大学,中国古代史,2012,硕士.
[49]姚峰.水下机器人基础运动控制体系结构及运动控制技术研究[D].哈尔滨工程大学,机械电子工程,2012,硕士.
[50]周靖.心理咨询中求助者态度改变的影响因素[D].郑州大学,应用心理学,2013,硕士.