fad3b乳腺特异表达盒转基因小鼠的研制

【摘要】长链n-3多不饱和脂肪酸(n-3PUFAs)对人类的健康发挥着重要作用,而由于哺乳动物体内没有产生n-3PUFAs的脂肪酸去饱和酶基因,所以哺乳动物均不能自身产生n-3PUFAs。目前,常用于转基因动物的脂肪酸去饱和酶基因是fat-1,fat-1转基因小鼠和家畜的研究已经有不少报道。在本实验中,使用了来源于亚麻的脂肪酸去饱和酶基因fad3b,即将fad3b基因连入乳腺特异表达载体pBC-as1中,并通过M.MunⅠ和ApaⅠ进行双酶切,得到了不含标记基因、抗性基因的fad3b乳腺特异基因表达盒pBC-as1-fad3b,其长度为12188bp,通过原核注射的方法制备转基因小鼠,并且繁殖到F3代。经鉴定,fad3b在Founder、F1、F2、F3代转基因小鼠的基因组中均有整合、表达。该研究证明,基因表达盒可以在哺乳动物体内整合、表达并可以稳定遗传给下一代。同时,选取四个与脂肪酸合成和代谢相关的基因,分别为：脂肪酸合成酶(fattyacidsynthase,FASN),激素敏感脂酶(hormone-sensitivelipase,HSL),脂蛋白脂酶(lipoproteinlipase,LPL)和乙酰辅酶A羧化酶(acety-CoAcarboxylase,ACC),荧光定量PCR方法检测fad3b基因整合到小鼠基因组以后,在各个组织中对这四个基因表达情况的影响。
【作者】谌颜；
【导师】李光鹏；
【作者基本信息】内蒙古大学，动物学，2014，硕士
【关键词】fad3b基因；基因转移体；转基因小鼠；脂肪酸；

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