家兔胰岛细胞体外培养以及黑木耳多糖对其活性的影响

【摘要】胰岛细胞的体外培养,目前较成熟的培养体系是SD大鼠胰岛细胞的分离、纯化及体外培养。家兔与人类某些基因的序列同源性较高,因此,建立家兔胰岛细胞的体外培养体系具有重要科学意义。本项研究用胶原酶消化胰腺组织,用差速贴壁法,即利用胰岛细胞与成纤维细胞贴壁速率的差异,分离、纯化胰岛细胞。用胰岛细胞特异性染色——DTZ染色法对所得的胰岛细胞进行了鉴定。得到胰岛细胞之后,用四种培养基,即RPMI-1640培养基、M199培养基、DMEM低糖培养基、DMEM高糖培养基进行培养,培养五天后,用MTT法分别测定四种培养基培养后的胰岛细胞的细胞活性,实验数据表明,利用RPMI-1640培养基培养的胰岛细胞细胞活性更高,因此说明RPMI-1640培养基更适合家兔胰岛细胞的培养。在选择出最适培养基后,调整血清浓度分别为20%、15%、10%以及5%,同样,培养五天之后,MTT法测定胰岛细胞的细胞活性,实验数据证明RPMI-1640培养基在血清浓度为20%时候胰岛细胞活性更高,更适合胰岛细胞的培养。本次实验采用体外培养正常家兔胰岛细胞,以400mg/L,800mg/L浓度的黑木耳多糖加入培养基中培养,通过MTT法测定胰岛细胞的细胞活性,ELISA法检测低糖、高糖条件下胰岛素的分泌情况,RT-PCR检测各组胰岛细胞的抗凋亡基因bc1-2表达水平。实验结果表明,黑木耳多糖在400mg/L,800mg/L浓度下对于胰岛细胞的细胞活性、胰岛素分泌功能、胰岛细胞增殖无明显作用。
【作者】吴丹；
【导师】李煜；
【作者基本信息】内蒙古大学，动物学，2014，硕士
【关键词】家兔胰岛细胞；黑木耳多糖；细胞培养；胰岛素；

【参考文献】
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