人IL-15在K562细胞中的表达研究

【摘要】白细胞介素15（Interleukin-15,IL-15）是一种多能的细胞因子，能够促进淋巴细胞和NK细胞的增殖且对免疫系统中各种免疫细胞都具有重要的调节作用。IL-15表现出与IL-2在抗肿瘤、免疫调节等方面相似的生物学作用而备受关注。本实验利用RT-PCR技术从人外周血单个核细胞中克隆了人IL-15cDNA部分序列，并以其为模板分别扩增出IL-15编码序列（codingsequence，CDS）以及引入CD8α跨膜肽的IL-15编码序列，利用基因组技术构建分泌型人IL-15克隆载体pMD–T-IL-15、表达载体pVITRO2-IL-15以及膜结合型IL-15克隆载体pMD–T-mbIL-15、表达载体pVITRO2-mbIL-15。分别将表达载体转染K562细胞，检测分泌型IL-15在K562细胞中表达情况，并通过细胞流式技术鉴定，以期获得能稳定表达的膜结合IL-15的K562细胞株。对进一步研究其在免疫系统中的重要作用，并为其在肿瘤基因治疗、免疫治疗等奠定了基础。结果表明，本实验成功克隆了人IL-15CDS序列，在此基础上正确构建了重组人IL-15分泌型真核表达载体pVITRO2-IL-15和重组人IL-15跨模型真核表达载体pVITRO2-mbIL-15。最后通过将重组真核表达载体分别转染K562细胞，检测了分泌型IL-15在K5625细胞中的表达，并获得稳定表达膜结合IL-15蛋白的重组K562细胞株。
【作者】秦颖；
【导师】颜炜群；
【作者基本信息】吉林大学，生物医学工程，2014，硕士
【关键词】白细胞介素15；克隆；表达；转染；K562细胞；

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