叶黄素的超声皂化制备工艺及高速逆流色谱纯化的研究

【摘要】叶黄素是一种天然色素，易在光照、空气存在的条件下发生氧化反应。叶黄素的抗氧化功能使其具有多种药理活性，在自然界中大多以叶黄素酯的形式存在。但是在人体内，叶黄素酯的吸收利用度较低，叶黄素酯通过皂化反应转化为叶黄素后，人体的吸收利用率有显著提高。本文以万寿菊颗粒为提取原料，应用超声波技术、高效液相色谱技术、质谱技术、高速逆流色谱技术以及细胞生物学技术对叶黄素的提取、纯化、鉴定、抗氧化活性进行了系统研究，研究内容包括以下几个方面：1、通过超声皂化反应与水浴皂化反应的比较，发现超声皂化反应用时短，效率高，且皂化反应完全；采用四因素三水平正交试验，优化超声皂化的最佳工艺条件，确定超声皂化20min，KOH浓度为1.5mol/L，料液比为1:10，皂化温度为50℃时，叶黄素产率最高,产率为1.420%以上。2、采用质谱技术鉴定超声皂化前后提取物成分；根据2010版中国药典附录中规定的中药质量标准分析方法的验证指导原则，进行高效液相色谱法测定叶黄素含量的方法学考察，以及超声皂化产物的稳定性考察。3、采用高速逆流色谱技术制备了叶黄素纯品。叶黄素极性较小，根据其极性选择适宜的两相溶剂系统进行高速逆流色谱分离试验，实验结果表明，采用正己烷：乙醇：水的溶剂系统，在150min内各峰分离度良好，能够分离得到叶黄素纯品，纯度可达99.0%以上。4、选择非洲绿猴肾细胞(VERO细胞)进行叶黄素的抗氧化功能试验，利用H2O2建立氧化损伤模型，考察不同浓度的叶黄素对细胞存活率的影响。实验结果证明，在氧化损伤的同时加入叶黄素，细胞存活率有显著性提高，叶黄素能够保护VERO细胞，减小H2O2的氧化损伤作用。该论文确定了超声皂化法制备叶黄素的工艺，以及逆流色谱纯化方法，并进行了初步的质量标准和稳定性及抗氧化活性研究，为深入开展叶黄素的开发研究提供了参考。
【作者】赵伟；
【导师】刘忠英；
【作者基本信息】吉林大学，药学（专业学位），2014，硕士
【关键词】叶黄素；超声波皂化；高速逆流色谱；抗氧化；

【参考文献】
[1]何波辉.S医院川港康复科技综合大楼建设项目管理研究[D].西南交通大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[2]吴桐.铰接构造框架式曲线梁桥三维地震反应的研究[D].东北林业大学,林区交通工程,2014,博士.
[3]陈玮.组合曝气复合MBR处理高速公路服务区污水试验研究[D].华东交通大学,市政工程,2013,硕士.
[4]张腾.单叶蔓荆果实的化学成分及生物活性研究[D].山东大学,生药学,2013,硕士.
[5]孔庆玮.论新时期以来青春文学的叛逆书写[D].山东师范大学,中国现当代文学,2013,硕士.
[6]黄璐.基于遗传算法的云计算任务调度算法研究[D].厦门大学,计算机软件与理论,2014,硕士.
[7]岳小莉.区级养老保险信息管理系统的设计与实现[D].西安电子科技大学,软件工程,2011,硕士.
[8]廉跃.论网络言论的立法规制[D].内蒙古大学,法律,2014,硕士.
[9]张超.一种遗传粒子群算法及其在集装箱装船顺序优化问题中的应用[D].大连海事大学,控制工程,2014,硕士.
[10]卢盈艳.苏州桃花坞大街改造[D].上海大学,艺术设计（专业学位）,2014,硕士.
[11]李谋玉.关于冷补沥青混合料胶结料的研究[D].重庆交通大学,材料学,2012,硕士.
[12]郭苗苗.人民币汇率传导效应与我国服装企业出口定价权[D].沈阳航空航天大学,企业管理,2013,硕士.
[13]张云芳.汉语特指疑问句及其对外汉语教学[D].华中科技大学,汉语国际教育,2013,硕士.
[14]刘娜.《环球时报》国内议题社评研究（2009.4-2014.3）[D].四川外国语大学,文艺学,2014,硕士.
[15]潘翔,张三元,叶修梓.三维模型语义检索研究进展[J].计算机学报,2009,06:1069-1079.
[16]朱绍勇.竞争、效率与股东价值创造能力[D].南昌大学,数量经济学,2012,硕士.
[17]李晓芳.双摆盘式柴油机工作过程仿真研究[D].中北大学,动力机械及工程,2013,硕士.
[18]吴智铭,诸青.计算机管理信息系统的智能化问题[J].自动化学报,1989,06:561-568.
[19]林鹏.天井钻机多模态钻进电液控制系统研究[D].燕山大学,机械电子工程,2014,硕士.
[20]陈皓龙.郯庐及其旁侧地块（招远、蚌埠）断裂构造特征与演化[D].合肥工业大学,构造地质学,2014,硕士.
[21]张文生.延长石油集团科技创新激励机制研究[D].西北大学,高级工商管理（EMBA）（专业学位）,2014,硕士.
[22]张雪梅.广义Kirkman方的构造[D].河北师范大学,应用数学,2012,硕士.
[23]章发太.侨务数据仓库及其METL工具的研究与实现[D].华侨大学,2003.
[24]邵岩.移动机器人网络的嵌入式监控系统服务器设计[D].河北工业大学,控制工程,2013,硕士.
[25]冯吉祥,黄伟清.核岛设备承制厂资格评定(设备国产化的重要前期工作)[J].发电设备.1991(03)
[26]郭敏.概念层次网络理论及其在“把”字句理解中的应用[D].华南师范大学,英语语言文学,2003,硕士.
[27]施韬,许修超,沈佳燕.ASR-硫酸盐侵蚀双重作用下混凝土的损伤特点[J].新型建筑材料,2013,11:18-21.
[28]陈峰,吴奇兵,张慧慧,李三兵,赵亮.北京地铁1号线车站设施与客流关系分析[J].交通运输系统工程与信息,2009,02:93-98.
[29]谢华.我国商业银行竞争力与核心竞争力的探讨[D].四川大学,工商管理,2003,硕士.
[30]申梦童.甲醛和乙苯联合染毒对小鼠的神经毒性效应的研究[D].山西医科大学,劳动卫生与环境卫生学,2013,硕士.
[31]方丽娟.评“人道主义干涉”[D].浙江理工大学,马克思主义基本原理,2013,硕士.
[32]倪博溢,萧德云.非均匀采样系统的一种递推辨识方法[J].自动化学报,2009,12:1520-1527.
[33]云英（SupakarnKongsakorn）.从商业竞争的角度看泰国潮州华侨对中国的文化认同[D].复旦大学,中国语言与文化,2012,硕士.
[34]王进,展亮亮,许娟,陈智栋,曹剑瑜.锂离子电池负极材料SnO_2-Gn-C三元复合物的制备及其电化学性能[J].常州大学学报(自然科学版),2013,04:74-78.
[35]樊少薇.泰国职校学生汉语学习语音偏误研究[D].鲁东大学,汉语国际教育（专业学位）,2013,硕士.
[36]叶乔,曹华珍,逯东辉,郑国渠.Ti~(3+)掺杂的TiO_2纳米管阵列制备及其电化学阻抗谱研究[J].电镀与涂饰,2014,11:453-456+502.
[37]鲁青.非接触CPU可视卡读写器系统的研究与应用[D].广东工业大学,计算机应用技术,2014,硕士.
[38]戴连贵,丁月华.离散事件动态系统的分层最优监控[J].控制与决策,1999,04:77-81.
[39]周洋.猪印迹基因的克隆及印迹方向和表达模式分析[D].东北农业大学,发育生物学,2013,硕士.
[40]牟海军.VEGF、Endostatin、Endothelin-1在大肠腺瘤及大肠癌中的表达及意义[D].遵义医学院,消化内科,2013,硕士.
[41]吴星成.三维四元声子晶体的带隙与隔声性能研究[D].湖北工业大学,机械电子工程,2014,硕士.
[42]陆星家.重金属污染物在日本沼虾体内的行为研究[D].安徽师范大学,动物学,2004,硕士.
[43]赵耀锋.民国时期唐诗学研究[D].西北大学,中国古代文学,2014,博士.
[44]王越.我国非婚同居若干法律问题探析[D].吉林大学,法律,2013,硕士.
[45]庄涛.不同cNDF/rNDF日粮对断奶后3-6月龄公犊牛胃肠道发育的影响[D].扬州大学,动物营养与饲料科学,2012,硕士.
[46]花勇.某农用车车架静动态特性分析及结构优化[D].广西科技大学,机械设计及理论,2013,硕士.
[47]韦美丹.小胶质细胞α7-nAChR激活在Aβ介导神经干细胞失能中的作用及分子机制研究[D].南方医科大学,药理学,2012,硕士.
[48]鲍侠.行政领导责任性与绩效之间关系的研究[D].浙江大学,行政管理,2003,硕士.
[49]王红.《四库全书总目》著录西域文献研究[D].新疆大学,历史文献学,2013,硕士.
[50]范宏烨.中国长足寄蝇亚科分类及区系分布研究（双翅目：寄蝇科）[D].沈阳师范大学,动物学,2014,硕士.