联合抗CTLA-4抗体及JAK2抑制剂治疗小鼠乳腺癌的实验研究

【摘要】背景和目标:乳腺癌是女性人群中高发肿瘤之一，传统的治疗方法不仅给患者带来巨大的创伤，而且癌细胞微小转移无法及时检测，因而无法对所有患者远处转移做出评估和治疗，限制患者治疗后的生存率。随着肿瘤生物治疗的研究进展，似乎为弥补传统治疗的缺陷带来了希望。细胞毒性T淋巴细胞相关抗原（CytotoxicTlymphocyteantigen，CTLA-4）作为免疫治疗的靶点之一，用抗CTLA-4抗体封闭CTLA-4信号通路，提高荷瘤机体的免疫能力，治疗黑色素瘤已经取得了重大的突破。然而，单用抗CTLA-4抗体在治疗乳腺癌的研究中，发现没有明显的效果。本实验探索了小鼠乳腺癌模型的免疫状态，首次提出并试验了联合抗CTLA-4抗体和JAK2抑制剂治疗小鼠乳腺癌。方法:首先建立小鼠皮下乳腺癌模型，同样条件下用未做任何处理的小鼠作对照，建模21天后，解剖小鼠取脾，用细胞流式术检测：CD4+、CD8+T细胞百分比，骨髓源性抑制细胞（myeloid-derivedsuppressorcells,MDSCs）和调节性T细胞（regulatoryTcells,Tregs）的百分比；取小鼠骨髓检测MDSC的百分比。继而，与前述同样条件建模，将小鼠分成5组，分别为：空白对照组、溶剂对照组、anti-CTLA-4组、JAK2抑制剂组及联合用药组。接种第3天开始用药，直到第21天。用细胞流式术对荷瘤小鼠脾和骨髓的细胞亚型进行检测，用免疫组化对肿瘤微环境中凋亡细胞和微血管密度（microvesseldensity，MVD）进行检测。结果：一、荷瘤小鼠免疫效应细胞减少，免疫抑制细胞百分比增高。1.正常组小鼠脾组织淋巴细胞中CD8+T细胞所占的百分比为22.49±1.07；荷瘤小鼠脾组织淋巴细胞中CD8+T细胞所占的百分比为14.74±1.86。二者相比较，荷瘤小鼠脾组织淋巴细胞中CD8+T细胞的百分比明显下降（P＜0.01）。2.正常小鼠脾组织Treg所占CD4+T细胞的百分比为13.73±1.12；荷瘤小鼠脾组织该指标为27.43±0.99。荷瘤小鼠脾细胞中CD4+T细胞中Treg的百分比明显高于正常组（P＜0.001）。3.正常组小鼠脾及骨髓非淋巴细胞的单个核细胞中MDSC所占的比例分别为11.59±3.03和19.71±2.73。荷瘤小鼠脾和骨髓在非淋巴细胞的单个核细胞中MDSC所占的比例分别为87.50±1.60和94.69±0.82。荷瘤小鼠脾和骨髓细胞中MDSC的百分比明显高于正常组小鼠脾和骨髓的含量（P＜0.001）。二、用药治疗后，荷瘤小鼠肿瘤生长情况、免疫细胞的变化及肿瘤微环境的改变。1.联合用药组的荷瘤小鼠肿瘤生长速度明显低于对照组和单独用药组（P＜0.05）。2.联合用药组的荷瘤小鼠脾组织淋巴细胞中CD8+T细胞明显增高（P＜0.05）。但是与对照组相比较，单用或联合用药后MDSC无论是在荷瘤小鼠的脾还是在骨髓的量都没有明显的变化。3.在肿瘤微环境中，与对照组相比较，单用anti-CTLA-4或JAK2抑制剂都会使肿瘤微环境中细胞凋亡增加（P＜0.001），联合用药组肿瘤微环境中细胞凋亡数目明显高于任一单独用药组（P＜0.05）。联合用药组肿瘤微环境中MVD明显低于其它组（P＜0.001），单用任何一种药物治疗后，MVD明显低于空白和溶剂对照组（P＜0.001）。结论:1.荷瘤小鼠模型中，脾淋巴细胞中的细胞毒性T淋巴细胞（CD8+T细胞）的百分比明显减低，免疫抑制细胞（MDSC，Treg）的百分比明显增高，因此小鼠乳腺癌模型机体中细胞免疫能力下降。2.联合抗CTLA-4抗体和JAK2抑制剂明显抑制肿瘤生长，且促进肿瘤微环境中肿瘤细胞凋亡，减少肿瘤微环境中微血管生成。
【作者】王建霞；
【导师】李伟；
【作者基本信息】吉林大学，病理学与病理生理学，2014，硕士
【关键词】抗CTLA-4抗体；JAK2抑制剂；乳腺癌；免疫治疗；动物模型；

【参考文献】
[1]孙志勤.数据仓库技术在CRM中的应用研究[D].大连海事大学,2002.
[2].2012年度中国科技论文统计与分析[J].科学,2014,02:60-62.
[3]刘新霞.人民币汇率升值对中国外贸的影响及对策建议[D].山东大学,工业工程（专业学位）,2012,硕士.
[4]郑丹.用于细胞培养的聚乙烯醇/海藻酸钙水凝胶力学性能的模拟及定量控制[D].重庆大学,化学,2014,硕士.
[5]甄志刚.商品蛋鸡新城疫免疫技术的研究[D].吉林大学,兽医,2012,硕士.
[6]熊翥.一条好的地震偏移剖面从何而来[J].石油地球物理勘探,1993,01:112-119+126.
[7]王霞.中职学生音乐素质养成研究[D].宁波大学,教育管理（专业学位）,2013,硕士.
[8]HeLijun.第二语言阅读中词义推测过程探析[D].西安外国语大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[9]田甜.消费者创新性对手机银行使用意愿的影响研究[J].郑州航空工业管理学院学报,2014,05:59-64.
[10]宋乐乐.数学文化在小学数学教科书中的呈现研究[D].东北师范大学,教育,2012,硕士.
[11]王书荣.基于WEB的选课排课管理系统的设计与实现[D].华侨大学,计算机技术,2013,硕士.
[12]赵思齐.语义场和语境理论对听力测试表现的影响[D].首都师范大学,英语语言文学,2014,硕士.
[13]黄璟.管子在子位吹歌中的地位与作用[D].中国音乐学院,音乐学,2012,硕士.
[14]苏芸.Al_2O_3-H_2O纳米流体热物性及相变蓄冷特性的研究[D].天津商业大学,制冷及低温工程,2013,硕士.
[15]贾海永.TJLF公司的不锈钢产品经营模式研究[D].河北工业大学,工商管理,2013,硕士.
[16]仝爱平.转苜蓿防御素alfAFP基因和苦瓜几丁酶McChit1基因提高番茄对青枯病菌（Ralstonia solanacearum）抗性的研究[D].西南农业大学,生物化学与分子生物学,2004,硕士.
[17]姜立强.论中国共产党的政治合法性[D].河海大学,马克思主义理论与思想政治教育,2004,硕士.
[18]方明.中国现金管理类理财产品比较研究[D].复旦大学,金融学,2012,硕士.
[19]何昌箐.顺应论视角下金融英语新闻标题的汉译研究[D].广东外语外贸大学,商务英语研究,2013,硕士.
[20]陈皓勇,谭科,席松涛,杨星,王江,王中夫.海上风电的经营期成本计算模型[J].电力系统自动化,2014,13:135-139.
[21]刘谦.电力线通信技术浅析[J].电信网技术.2004(01)
[22]彭贤锋.汶川地震北川灾区林地土壤种子库研究[D].北京林业大学,工程绿化,2013,硕士.
[23]刘霞,袁新苗.先秦至隋唐时期浙商发展概况及商人社会地位综述[J].现代物业(中旬刊),2013,02:18-20.
[24]王晓琴.金融发展对出口商品贸易结构优化的实证分析[D].杭州电子科技大学,国际贸易学,2013,硕士.
[25]王铖.农村集体土地承包经营权流转问题实证研究[D].安徽大学,法律,2012,硕士.
[26]李元.赢创公司发展战略分析[D].上海交通大学,工商管理,2013,硕士.
[27]蒋仙华.智能家居系统的研究与开发[D].浙江大学,2004.
[28]张红.内切纤维素酶突变库的构建与初步筛选[D].吉林大学,生物医学工程,2013,硕士.
[29]殷成志.数字相控阵雷达多目标及环境模拟系统[D].南京理工大学,电子与通信工程,2012,硕士.
[30]张晓波.电动汽车发展对配电网的影响及接入技术要求[J].山东工业技术,2014,20:232+234.
[31]杨炼.政府信息公开法治化理论研究[D].湖南师范大学,法学理论,2004,硕士.
[32]王瑜.农村高中英语教师对新课程的适应性研究[D].湖北大学,课程与教学论,2012,硕士.
[33]宋国伟.基于BREW平台的手机短消息应用设计[D].西安电子科技大学,电子与通信工程,2012,硕士.
[34]赵姗姗.宗教与美国人权外交政策[D].复旦大学,国际政治学,2012,硕士.
[35]刘念.骨形态发生蛋白与纳米银颗粒的相互作用及其应用研究[D].广东工业大学,应用化学,2014,硕士.
[36]柳连忠.高职课程内容开发研究[D].河北师范大学,职业技术教育学,2012,硕士.
[37]韩克伟.汽油相关体系的临界温度和临界压力测定与研究[D].天津大学,化学工艺,2013,硕士.
[38]李丹.基于遗传算法的城市轨道交通列车节能操纵方法研究[D].北京交通大学,2014.
[39]赵俞玲.647例胃癌Lauren分型临床与病理特点研究[D].吉林大学,临床医学,2014,硕士.
[40]贺媛.大众媒介与城市文化关系研究[D].上海大学,艺术学,2013,硕士.
[41]靳玉蕾.抗寒低木质素巨尾桉的定向培育研究[D].华侨大学,生物化学与分子生物学,2014,硕士.
[42]潘江爽.新疆少数民族小学汉语课程资源应用现状调查研究[D].新疆师范大学,课程与教学论,2013,硕士.
[43]黄忠华,杜雪君.两岸房地产市场发展与调控政策:经验、比较与启示[J].台湾研究,2014,03:49-61.
[44]苏华.ERC—10静电示波仪省纸方法比较[J].石油地球物理勘探,1985,03:327.
[45]阮程广.通用技术课程网络教学平台设计与实现[D].浙江工业大学,计算机技术,2012,硕士.
[46]唐美娟.时标上二阶及四阶动力方程两点边值问题弱解的存在性[D].湖南师范大学,应用数学,2014,硕士.
[47]张英隆.我国工程造价咨询业的发展与展望[J].现代物业(上旬刊),2015,02:36-39.
[48]苏尤玛（EnkhtuvshinSOYOLMAA）.主要国家对蒙古国直接投资比较研究[D].大连海事大学,国际贸易学,2014,硕士.
[49]姜翠.丙型肝炎病毒自发清除者的血清代谢组学研究[D].吉林大学,内科学,2013,硕士.
[50]王斌.表面织构化活塞环/缸套摩擦学性能仿真及试验研究[D].北京交通大学,2014.