鹿茸中水溶性多糖提取方法的研究及应用

【摘要】鹿茸中药用价值成分已经受到广泛的重视，本文对比了高压脉冲电场（PEF）和超声波提取方法对鹿茸中水溶性多糖的提取效率，并优化了两种提取方法的提取条件。鹿茸多糖为糖胺聚糖（GAG），是酸性粘多糖，本文选择效率高、损失少的Sevage法，并与乙醇沉淀相结合的方法对提取得到的GAG进行分离纯化，研究了获得的三种粗分多糖的活性。本文还继续对鹿茸多糖加以利用，根据鹿茸多糖的活性，研制了鹿茸多糖营养饮料。具体研究结果如下：（1）超声波作用下鹿茸中水溶性多糖提取及条件优化的研究结果以超声波法作为提取鹿茸中水溶性多糖的方法，并且固定超声波处理的其他因素，以鹿茸多糖提取率为指标，通过单因素试验，确定提取鹿茸中水溶性多糖的最适条件为：液料比12，木瓜蛋白酶与中性蛋白酶各添加1.5%，超声功率200W，超声温度40℃，超声时间40min。利用响应面法优化超声波处理条件，得到数学模型的回归方程如下：R=5.18+0.072A+0.15B+1.21C+0.080D-0.12AB+0.15AC+0.48AD+0.045BC-0.45BD+0.017CD-0.45A2-0.58B2-0.64C2-0.54D2计算得到最佳参数组合为：超声功率209W，液料比12.08，温度49.9℃，超声时间42.3min。此时多糖的提取率约为5.8%。（2）PEF作用下鹿茸中水溶性多糖提取及条件优化的研究结果以PEF作为提取鹿茸中水溶性多糖的提取方法，并且固定电场处理的其他因素，以鹿茸多糖提取率为指标，通过单因素试验，确定提取鹿茸中水溶性多糖的最适条件为：液料比12，电场强度25kV/cm，脉冲数8，木瓜蛋白酶添加量3%。利用响应面法优化电场处理条件，得到数学模型的回归方程如下：R’=5.65+0.28A-0.022B+0.023C+0.71D-0.065AB+0.18AC+0.0075AD+0.005BC-0.0025BD+0.21CD-0.51A2-0.15B2-0.67C2-0.48D2计算得到最佳参数组合为：电场强度26.6kV/cm，脉冲数8.38，料液比11.7，酶添加量3.6%。此时多糖的提取率能达到5.97%左右。（3）鹿茸多糖的粗分及其抗氧化活性的研究对鹿茸粉末进行酶解提取得到的水溶液中主要含有鹿茸多肽、鹿茸多糖以及少量鹿茸蛋白。本文采用Sevage法去除蛋白质，并辅以乙醇沉淀的方法获得粗分多糖。其中多肽能够溶于70%的乙醇，乙醇浓度70%时获得多糖沉淀量最大，对沉淀进行收集后进行下一步的分离研究，采用离子交换树脂DEAE-Sephadex分离得到三种鹿茸多糖：GAG1、GAG2、GAG3。对提取得到的三种鹿茸多糖进行体外抗氧化活性检测，通过粗分获得抗氧化活性较高的鹿茸多糖。分别检测三种鹿茸多糖对超氧阴离子自由基、DPPH自由基以及羟自由基的清除率。其中，0.25mg/mL的GAG1对超氧阴离子自由基清除率达到6%，对DPPH自由基清除率达到12%，对羟自由基清除率达到57%。0.25mg/mL的GAG2对超氧阴离子自由基清除率达到12%，对DPPH自由基清除率达到28%，对羟自由基清除率达到61%。0.25mg/mL的GAG3对超氧阴离子自由基清除率达到4%，对DPPH自由基清除率达到8%，对羟自由基清除率达到33%。（4）山楂鹿茸多糖抗氧化饮料的研究结果通过本试验研究得到的活性较高的鹿茸多糖，对其进行山楂鹿茸多糖抗氧化饮料的研发。在稳定剂的选择上，对SSPS和CMC-Na进行了单因素和正交试验。试验结果表明：0.12%的SSPS与0.25%的CMC-Na混合复合稳定剂效果较好。在甜味剂的选择上，对蔗糖和木糖醇分别进行了单因素和感官试验。试验结果表明：2%的蔗糖与4%的木糖醇作为复合甜味剂时感官评分最高。灭菌条件：灭菌温度为121℃，灭菌时间为10min。饮料可以贮藏半年以上。通过对饮料性状、卫生指标、理化指标、微生物指标的测定，可以确定所研制的饮料符合行业标准。最终通过模糊数学评价对饮料进行分级，获得93.87分，达到优秀标准。
【作者】金虹旭；
【导师】殷涌光；
【作者基本信息】吉林大学，食品科学与工程，2014，硕士
【关键词】鹿茸；PEF技术；超声波技术；分离纯化；抗氧化饮料；

【参考文献】
[1]刘瑞营.青岛国家高新区统筹规划科学布局打造高水平石墨烯产业集群[J].中国科技产业,2014,08:32.
[2]杨文生.基于监管视角的渔业互助保险运营绩效评价研究[D].中国海洋大学,农业经济管理,2014,博士.
[3]张园.论实验影像艺术的产生及其艺术特点[D].杭州师范大学,美术学,2013,硕士.
[4]张良.高压变频器控制单元总线板设计及阻抗匹配研究[D].山东大学,控制工程（专业学位）,2013,硕士.
[5]张东华.网络环境下档案信息资源整合探讨[J].档案学通讯,2005,03:74-77.
[6]宁涛.基于CAN总线的汽车控制系统的研究[D].合肥工业大学,车辆工程,2013,硕士.
[7]李哲.基于城市群发展模式的个体城市轨道交通线网规划研究[D].重庆交通大学,交通运输工程,2012,硕士.
[8]袁东振,张国治,黄纪念,芦鑫.用亚临界芝麻粕制备芝麻蛋白的工艺研究[J].河南工业大学学报(自然科学版),2014,06:49-55.
[9]洪博.按新旧规范设计的RC框架结构基于IDA的抗震研究[D].江苏科技大学,结构工程,2013,硕士.
[10]曾柔君.A公司连接器产品营销策略研究[D].广东工业大学,工商管理,2014,硕士.
[11]刘晓峰.造纸法再造烟叶原料及浆料的性能研究[D].华南理工大学,制浆造纸工程,2014,硕士.
[12]章谷雅.法人犯罪的刑事责任及其立法完善[D].四川大学,法律,2003,硕士.
[13]吴海京.某SUV高速追尾碰撞结构安全性优化研究[D].燕山大学,车辆工程,2014,硕士.
[14]钮艳华.外科手术导航中的增强现实技术研究[D].浙江大学,生物医学工程,2004,硕士.
[15]潘慧玲.广西黄冕林场林下经济效益分析[D].中南林业科技大学,林业,2014,硕士.
[16]陆晔.中国丰田汽车公司售后服务零件采购与库存管理优化研究[D].电子科技大学,工商管理（专业学位）,2012,硕士.
[17]庞沁.应急演练虚拟场景的信息追踪技术研究[D].华东理工大学,计算机技术,2013,硕士.
[18]刘燕.现代汉语词类划分标准研究[D].黑龙江大学,汉语言文字学,2013,硕士.
[19]高伟.黑龙江省邮政速递物流有限公司运输网路优化研究[D].哈尔滨理工大学,物流工程,2012,硕士.
[20]邴睿.我国牛结核病血清学筛查及其病原的分离鉴定[D].甘肃农业大学,预防兽医,2013,硕士.
[21]乌仁图雅.某些图的色轨道多项式及其应用[D].内蒙古大学,数学,2013,硕士.
[22]冯德,代书华,米扬扬.Al_3Nb/铝基复合材料微观组织及力学性能的研究[J].热加工工艺,2015,06:95-97.
[23]候万超.椭圆型方程组的正解和不同历史函数的功能[D].天津大学,应用数学,2013,硕士.
[24]刘桂彩.南京市公共场所居民参加体育锻炼现状研究[J].搏击(体育论坛),2014,04:15-18.
[25]尹娟.我国女性权益缺失的政治文化根源[D].苏州大学,政治学理论,2013,硕士.
[26]闫冬.多媒体课件画面美感构成研究[D].东北师范大学,教育技术学,2012,硕士.
[27]尹丹.国际反洗钱经验与中国反洗钱研究[D].西南财经大学,2005.
[28]曾雪磊.楔横轧多楔同步轧制空心车轴微观组织规律研究[D].宁波大学,机械制造及其自动化,2012,硕士.
[29]鲁兖.Huh7.5.1细胞感染HCV并干扰素治疗过程中miRNA表达谱的变化的研究[D].浙江大学,药理学,2012,硕士.
[30]王先柱,毛中根,刘洪玉.货币政策的区域效应——来自房地产市场的证据[J].金融研究,2011,09:42-53.
[31]徐志丹,莫宏伟.多目标扰动生物地理学优化算法[J].控制与决策,2014,02:231-235.
[32]许海超.高分子对蛋白质改性及蛋白质吸附的调控[D].苏州大学,高分子化学与物理,2014,硕士.
[33]王微.利用含钛高炉渣制备陶瓷的实验研究及其抗菌性的探讨[D].东北大学,环境科学,2010,硕士.
[34]王智勇.长春市重点高中篮球人才培养方式研究[D].吉林大学,体育,2013,硕士.
[35]管林波.移动机器人导航软件及部分关键技术研究[D].浙江大学,2014.
[36]鄂旭,方熠东,胡少华,金璐璐,林爽.面向水产品质量信息的知识发现研究[J].计算机技术与发展,2014,06:153-155.
[37]陈达.功能微球改性聚乳酸组织工程材料及其细胞相容性研究[D].浙江大学,材料物理与化学,2004,硕士.
[38]赵玉明,滕少华,张巍,伍乃骐.异常入侵检测中数据挖掘技术RIPPER的应用[J].广东工业大学学报,2005,03:48-52.
[39]杨光红,张嗣瀛.一类具有相似结构的组合系统的结构可控性与渐近合作性[J].自动化学报,1995,05:521-528.
[40]张敏.水稻硝运输辅助蛋白基因OsNAR2.1超量表达后的功能分析[D].南京农业大学,植物营养学,2012,硕士.
[41]贾云峰.企业终止经营业务的会计难题与对策研究[D].首都经济贸易大学,会计学,2013,硕士.
[42]李雅.中国残疾儿童教育保障制度研究[D].首都经济贸易大学,社会保障,2013,硕士.
[43]张璇璇.高校英语专业大学生职业生涯规划问题与对策[D].武汉理工大学,思想政治教育,2012,硕士.
[44]毕鹏宇.纺织品负离子特性及测试系统研究[D].东华大学,2007.
[45]黄赞武.轨道电路故障预测与健康管理关键技术研究[D].北京交通大学,2013.
[46]张虎.基于高速列车数字化仿真平台的代理系统的设计与实现[D].西南交通大学,信号与信息处理,2013,硕士.
[47]尤娟.清代文人三家道情[D].扬州大学,中国古代文学,2012,硕士.
[48]刘雨萌.旅游公共服务的供需耦合协调机理与均衡机制构建研究[D].燕山大学,行政管理,2014,硕士.
[49]余村.低功耗音频DSP并行编程环境设计与实现[D].上海交通大学,电子与通信工程,2013,硕士.
[50]王学军.房地产企业税收筹划问题研究[D].武汉纺织大学,MBA,2014,硕士.