TRAIL和Fas L在急性心肌梗塞缺血再灌注对心肌组织损伤中的作用研究

【摘要】心肌梗塞是指在冠状动脉发生病变的基础上，冠状动脉血液供应急剧减少或被迫中断，相应的使心肌出现严重而持久性的急性缺血，最终导致心肌组织发生缺血性坏死。冠状动脉粥样斑块消融或血管疏通后，血液会发生倒灌注入心脏，引发心肌缺血性再灌注损伤，这种损伤会导致心肌细胞坏死。缺血性再灌注损伤对组织的破坏是严重的。在坏死的组织细胞核中，DNA链遭到破坏，PARP-1大量激活，PAR聚合物在细胞核和胞浆中大量积累，改变线粒体膜电位和膜通透性，细胞色素C等大量凋亡相关蛋白从线粒体释放进入胞浆，引发caspase级联效应；同时TRAIL和FasL等坏死因子大量激活，裂解细胞膜质成分，对受损伤的组织细胞进行更严重的破坏。目的：本研究旨在探讨TRAIL和FasL两种坏死因子能否作为在急性心肌梗塞后发生缺血再灌注对大鼠心肌组织的损伤检测指标，为这两种因子在临床上界定心肌损伤提供参考；同时进行对以PARP-1和TRAIL、FasL为基础的细胞死亡机制的初探。方法：针对大鼠进行急性心肌梗塞缺血再灌注造模，搜集再灌注组和假手术组的血液样本和心肌组织样本。通过PCR及Westernblot等基因相关检测技术测定大鼠血清中TRAIL和FasL两种坏死因子的含量，并针对心肌梗塞后发生再灌注损伤情况检测以上两种因子的变化情况。并通过HE染色观察造模对心肌组织造成的影响。此外，我们体外培养了人心肌HCM细胞，首先对细胞做出撤离血清及给予不同浓度的过氧化氢处理1h，然后去除过氧化氢并补充血清继续培养6h，最后收集HCM细胞，应用PCR及Westernblot等技术检测细胞中TRAIL和FasL两种因子的变化情况。结果：对搜集到的血液样本检测显示，血清中活性TRAIL含量在假手术组要高于再灌注造模组，而游离的FasL含量则正好相反；对诱导体外培养的人心肌HCM细胞发生坏死的研究结果显示，随着活性氧物质的积累，细胞中FasL的表达均呈上升趋势，而TRAIL呈现下降趋势。结论：TRAIL的活化程度与心梗及再灌注损伤呈负相关，而FasL则呈正相关，这一点通过体外培养人心肌HCM细胞也得到了证实。PARP-1和TRAIL、FasL涉及急性心梗心肌再灌注损伤机制。
【作者】王英波；
【导师】郑杨；
【作者基本信息】吉林大学，临床医学，2014，硕士
【关键词】急性心肌梗塞；缺血性再灌注损伤；TRAIL；FasL；凋亡；坏死；

【参考文献】
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