Sirtuins在喉癌细胞及其耐药株中表达水平的实验研究

【摘要】目的：喉癌是头颈部常见的恶性肿瘤，治疗手段通常为手术辅以抗肿瘤综合治疗，尽管几十年来对其治疗水平不断挺高，但据统计喉癌患者的5年生存率并没有呈现显著的提升。细胞多药耐药的产生是导致化疗效果欠佳的重要因素，细胞耐药相关基因MDR1及MRP可通过两种不同途径介导细胞产生耐药性。Sirtuins基因与细胞应激及氧化所致疾病有着密切的关联，其在不同肿瘤发生发展中的作用已逐渐被知晓，但Sirtuins在喉癌细胞及其耐药株中所发挥的作用仍不明确，本研究拟探讨Sirtuins在人喉癌细胞株Hep-2及其耐药株Hep-2/v中的表达及调控作用，以及Sirtuins与耐药基因的相关性，为喉癌的抗肿瘤治疗提供新的可能的途径。方法：通过实时定量RT-PCR对Sirtuins和MDR1在Hep-2和Hep-2/v中的表达进行定量分析，采用免疫荧光染色检测Sirtuins及耐药相关基因MDR1、MRP在Hep-2和Hep-2/v中的表达情况，利用免疫组化SP染色方法检测14例喉癌的组织标本中Sirtuins、MDR1及MRP基因的表达水平，并将结果进行统计分析。结果：1.实时定量RT-PCR结果显示，多药耐药性人喉癌细胞Hep-2/v中Sirtuins蛋白及MDR1的mRNA水平较Hep-2中明显升高；2.免疫荧光染色显示，多药耐药性人喉癌细胞Hep-2/v中SirT1、SirT3、SirT6、MDR1及MRP蛋白表达水平较Hep-2中显著提高。3.免疫组化结果显示，SirT1、SirT3、SirT6、MDR1及MRP抗体阳性表达为棕黄色颗粒，均定位于细胞浆。在喉癌组织中以上5种抗体的蛋白表达较癌旁组织均有所增高。对喉癌及癌旁组织中MDR1和MRP的蛋白表达量与Sirtuins表达的关系进行直线回归分析，结果显示：MDR1蛋白表达量与SirT1的变化呈正的直线相关（r=0.4，p<0.01），MRP蛋白表达量与SirT6的变化呈正的直线相关（r=0.61,p<0.01）。结论：Sirtuins蛋白在多药耐药性人喉癌细胞中的高表达，提示其可能在喉癌细胞耐药机制中发挥着重要作用，并与肿瘤多药耐药性基因MDR1、MRP的转录和表达相关。推测未来可能采用Sirtuins抑制剂或基因靶向治疗，为人喉癌及其他相关肿瘤耐药性的治疗提供了一种新的方法。
【作者】李涵宇；
【导师】祝威；
【作者基本信息】吉林大学，耳鼻咽喉科学，2014，硕士
【关键词】Sirtuins；MDR1；MRP；喉癌；耐药；

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