寡核苷酸MTO1进入人牙周膜细胞的时相观察
【摘要】实验目的:探讨寡核苷酸MT01(一种根据人线粒体DNA序列设计的寡脱氧核苷酸)进入人牙周膜细胞的机制,为寡核苷酸MT01能够抑制牙槽骨吸收奠定实验基础。实验方法:体外培养并鉴定人牙周膜细胞,Cy5染色的MT01(工作浓度为1.0μg/ml)与人牙周膜细胞共培养15分钟,30分钟,1小时,3小时,6小时,12小时,24小时,36小时及48小时。激光共聚焦显微镜观察记录以上9个时间点MT01进入人牙周膜细胞的情况,对不同时间点人牙周膜细胞内MT01的荧光强度进行比对分析。采用SPSS17.0软件,配对样本t检验方法统计学分析两组间结果,P<0.05有统计学差异,P<0.01有显著统计学差异。实验结果:1.0μg/mlMT01进入人牙周膜细胞15分钟,30分钟,1小时,3小时,6小时,12小时,24小时,36小时及48小时荧光强度分别为:1484±128,1771±206,2773±1364,1874±121,2437±293,3170±297,2442±273,2285±45,2119±374。其中12小时实验组荧光强度与15分钟、30分钟、6小时,48小时实验组荧光强度相比较均有显著差异(P<0.01)。其余组间比较均无统计学差异。实验结论:1.寡核苷酸MT01无需载体,通过胞吞作用快速进入人牙周膜细胞胞质内,并且一定浓度的寡核苷酸MT01进入人牙周膜细胞呈时间依赖性:12小时达到峰值。2.寡核苷酸MT01分布在人牙周膜细胞内两端,具有细胞极性。
【作者】王旋;
【导师】林崇韬;
【作者基本信息】吉林大学,口腔医学,2014,硕士
【关键词】寡核苷酸;MT01;人牙周膜细胞;激光共聚焦显微镜;
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