乳腺癌循环肿瘤细胞与分子生物学特征的相关性分析

【摘要】背景：乳腺癌是目前发病率较高的恶性肿瘤，在肿瘤发展早期就可远处转移播散，术后复发和转移是影响预后的关键因素；循环肿瘤细胞(CTCs)存在于患者外周血中，是造成肿瘤转移和复发的主要原因[1]。为寻找敏感的早期诊断靶点及个体化治疗方案，人们从基因分子生物学水平研究乳腺恶性肿瘤。其中ER、PR、HER-2、Ki67和P53得到大家的关注，但上述指标的检测往往只针对原发肿瘤，不能在治疗过程中,特别是辅助治疗进行连续的检测，从而限制其作为有效的疗效监测指标。CTCs作为外周血的乳腺癌相关指标检测，可以随时抽取，进行实时的“液体活检”，能帮助我们更好的进行指导乳腺癌的个体化治疗[2]。CTCs检测与分析技术（TheCellSearchSystem）能够捕捉到血液中极其微量的循环肿瘤细胞，只需应用7.5ml的血液样本，即可从400多亿的血细胞中检测到单一的一个CTCs，效果十分精准。由此，我们通过该技术检测的CTCs计数与浸润性乳腺癌患者的临床特征和ER、PR、HER-2、Ki67和P53免疫组化指标以及乳腺癌分子亚型进行相关性分析，寻找一种联合的预测乳腺癌早期诊断和预后的指标。目的：通过TheCellSearchSystem检测浸润性乳腺癌患者中循环肿瘤细胞的计数并在一定基数水平上评价CTCs与乳腺癌患者临床和分子生物学特征的相关性分析。方法：1.收集2011年12月—2013年12月在我省乳腺外科经乳腺肿物空芯针穿刺病理活检或术后病理诊断为浸润性乳腺癌的患者53例入组。应用细胞搜寻装置（TheCellSearchSystem）在行化疗、放疗等辅助治疗前对入组的浸润性乳腺癌患者的外周血进行CTCs计数检测及基数评价。检测前制定外周血的获取、存储、运输的统一标准。2.应用免疫组化方法检测入组的浸润性乳腺癌患者的ER、PR、HER-2、P53、Ki67的表达情况。3.根据TheCellSearchSystem检测到CTCs计数情况分为≥5CTCs/7.5ml组21例；＜5CTCs/7.5ml组32例；同时收集10例乳腺良性肿物患者的外周血标本作为对照组。4.分析比较乳腺癌患者CTCs计数与患者发病年龄、家族史、月经情况、TNM分期和M期的转移或复发性乳腺癌患者的相关性；CTCs计数与ER、PR、HER-2、Ki67、P53状态以及浸润性乳腺癌分子亚型的关系。结果：1.10例乳腺纤维腺瘤患者均未检出CTCs。CTCs计数表达水平与浸润性乳腺癌患者的家族史、月经情况之间差异无统计学意义(P＞0.05)；而发病年龄中≥60岁组的CTCs计数与其他年龄组比较有差异(P＜0.05)。2.CTCs与TNM分期具有显著相关性，TNM分期中各组CTCs差异有统计学意义(P=0.01)。复发／转移性乳腺癌(Ⅳ／M1期)患者CTCs表达水平显著高于可手术乳腺癌(Ⅰ期、Ⅱ、ⅢA期，M0期)的患者(P=0.001)。3.CTCs计数在ER、PR、HER-2、Ki67不同受体状态患者中差异无统计学意义(P＞0.05)；P53在CTCs计数指标上与其他组相比较有弱相关性(P=0.075)。4.LuminalB型、TNBC型与LuminalA型乳腺癌在CTCs计数指标上有明显的差异，差异有统计学意义(P=0.01)。结论：1.CTCs细胞搜寻装置（TheCellSearchSystem）具有极高的特异性，主要应用于转移或复发浸润性乳腺癌患者；CTCs计数与乳腺癌的临床TNM分期相关:CTCs≥5临界基数值时发生远处转移的可能性明显增高。故可用于独立评价乳腺癌肿瘤负荷，对精确分期以及准确评估患者病情、判断预后具有重要意义。2.CTCs计数表达水平与浸润性乳腺癌患者ER、PR、HER-2、Ki67、P53无确定性相关，其中P53在CTCs计数表达水平呈弱相关，随着样本量的增加，有可能存在相关趋势，故可以联合评价乳腺癌的病情和判断预后。3.CTCs计数与乳腺癌患者Luminal分型相关：LuminalB型、TNBC型乳腺癌的高增殖性与侵袭性可能是导致其更易发生血行转移、CTCs检出率高的重要原因,而体内出现CTCs的差异将直接影响乳腺癌分子亚型患者的生存和预后情况。
【作者】王丽娟；
【导师】徐景伟；
【作者基本信息】吉林大学，外科学，2014，硕士
【关键词】乳腺癌；循环肿瘤细胞（CTCs）；分子生物学；相关性分析；

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