腔内电热损伤法建立猪良性胆管狭窄模型及新型可降解支架的实验研究

【摘要】目的本实验通过内镜下胆管腔内电热损伤的方法建立猪的良性胆管狭窄模型，探索使用电热鞘管建模的可行性及其安全有效参数；在此基础上，经内镜将一种新型生物可降解支架置入猪的损伤段胆管，观察该支架治疗良性胆管狭窄的安全性及有效性。方法第一部分将12头健康巴马小型猪随机分为3组：低能量组、中能量组以及高能量组。经内镜将一电热鞘管插入猪的胆总管中下段，然后以不同能量剂量电灼胆总管。术后每周1次行内镜下胆管造影，并检测血常规和血清肝功能，记录胆管狭窄（管腔直径≤50%胆管基线直径）形成时间，比较不同时间点各组实验猪胆总管狭窄成功率。术后1个月处死动物，解剖并观察胆总管及周围组织的损伤情况，留取胆管组织做病理学分析。第二部分根据生物可降解支架（Archimedes支架，直径2mm和3.2mm，开始降解时间分别为2-3w和3-6w）的降解时间不同，实验动物分2组：快速降解支架组（n=5）和中速降解支架组（n=5）。第一部分已造模成功的5头实验猪可先用10Fr扩张导管进行狭窄段胆管扩张，然后放置可降解支架，作为二期支架组；另用同样方法造模，并立即放置Archimedes可降解支架，作为一期支架组。术后每周1次行X线透视或胆管造影及肝功能检测，观察支架降解及支架治疗有效（ERC造影及解剖证实损伤段胆管直径＞50%胆管基线直径，肝功能较正常无显著变化）情况。分别于术后1、2、3个月处死动物，解剖观察并留取支架段胆总管组织做病理学检查。结果第一部分低能量组（20W*20s）中，2例（50%）动物未形成胆总管狭窄，病理检查见胆总管粘膜轻度炎症细胞浸润。中能量组（30W*20s）动物全部形成狭窄（n=4），术后1个月无胆管完全梗阻，血清胆红素中度升高，组织检查见上皮细胞明显增生但排列紊乱，伴大量慢性炎症细胞浸润，成纤维细胞及肌成纤维细胞增生，细胞外大量胶原沉积。高能量组（40W*20s）实验猪14天内均经胆管造影证实胆总管狭窄产生（n=4），3周时胆管造影见2例胆管完全梗阻，其中1头猪22天时死亡，解剖见胆管穿孔，周围组织紧密包裹，腹腔内胆汁渗漏、粘连严重，病理检查见胆管壁大片坏死，粘膜下胶原纤维增生，且排列致密、杂乱。根据设定的狭窄形成标准，三组间狭窄成功率无统计学差异(P=0.10)，但中、高能量组狭窄等级均高于低能量组（P<0.05）。第二部分共行10只动物研究，其中一期法5只，二期法5只，10根生物可降解支架均成功置入猪的胆总管内，无明显操作困难。术后3周，1例出现支架移位，2例发生支架断裂，出现胆管梗阻表现，其他动物体内支架(n=7)均逐步降解，降解速度与标示基本一致，未发生胆管梗阻等其他不良反应，治疗有效率为70%（7/10）。病理学检查显示，支架植入后1个月时胆管壁粘膜少量坏死、脱落，伴大量混合性炎症细胞浸润；2个月时部分上皮细胞及腺体增生，慢性炎症细胞减少；3个月时损伤处粘膜基本修复，粘膜下腺体显著增生，细胞外胶原纤维沉积，排列致密、杂乱，部分出现玻璃样变。结论1.内镜下使用电热损伤法建立猪良性胆管狭窄模型是一种有效且方便的方法，采用中等能量设置（即功率为30W、时间20s）较为可靠且安全，平均胆管狭窄形成时间为2周。2.Archimedes生物可降解支架在防治胆管良性狭窄方面具有一定的效果，该支架在猪狭窄胆管内的降解速度与体外研究基本一致，但支架设计仍需进一步改进与完善。
【作者】张洪战；
【导师】胡冰；
【作者基本信息】苏州大学，普通外科学（专业学位），2014，硕士
【关键词】胆管狭窄；支架；生物可降解；内镜逆行胆胰管造影；动物模型；猪；

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