Galectin-3沉默对胃癌细胞SGC-7901生长及化疗敏感性影响的实验研究

【摘要】目的：初步探讨siRNA沉默胃癌细胞SGC-7901中Galectin-3的表达后，细胞增殖、凋亡及对奥沙利铂化疗敏感性的变化。方法：根据Genbank中Galectin-3的编码区基因序列NM-002306及相关参考文献，合成特异性针对Galectin-3的siRNA及与Galectin-3无关的阴性对照siRNA，瞬时转染胃癌细胞SGC-7901；实验分为4组：空白对照组、空脂质体组、阴性siRNA组及Galectin-3siRNA组；利用RealtimePCR技术测定转染后24h各组细胞Galectin-3在mRNA水平上的相对表达量；Westernblot技术检测转染后72h各组细胞Galectin-3在蛋白水平上的相对表达量；CCK-8法测定各组细胞在转染后24h、48h、72h的A值，根据公式（1-实验组A值/空白对照组A值）*100%计算细胞增殖抑制率；AnnexinⅤ/PI染色，流式细胞仪检测转染72h后各组细胞凋亡率；细胞转染后，加入不同浓度的奥沙利铂（5、10、20、40、80ug/ml）培养48h，CCK-8法观察各组细胞的细胞增殖抑制率。结果：用荧光标记的siRNA转染24h后，采用流式细胞仪检测转染效率，结果为83.8%，符合后续实验要求；以△Ct值表达各实验组Galectin-3在mRNA水平的相对表达量，结果显示Galectin-3siRNA组表达量较空白对照组降低了87.8%（P＜0.05），以Galectin-3与内参的灰度值比值表达Galectin-3在蛋白水平的表达量，结果显示Galectin-3siRNA组表达量较空白对照组降低了90.4%（P＜0.05），而空脂质体组、阴性siRNA组与空白对照组相比差异均无统计学意义（P＞0.05），证明通过转染siRNA成功抑制Galectin-3在mRNA及蛋白水平的表达；转染后24h、48h和72h，Galectin-3siRNA组细胞增殖抑制率分别为（15.57±1.45）%、（32.90±0.76）%、（57.35±1.05）%，与其余对照组相比，差异有统计学意义(P＜0.05)；转染72h后，细胞凋亡率空白对照组为（21.87±1.36）%，空脂质体组为（24.67±1.40）%，阴性siRNA组为（27.73±2.55）%，Galectin-3siRNA组细胞凋亡率为（46.17±2.39）%，明显高于其余3个对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；单用不同浓度（5、10、20、40、80ug/ml）奥沙利铂处理的空白对照组，48h的细胞抑制率分别为（13.30±0.21）%、（26.82±0.55）%、（34.72±0.47）%、（41.32±0.05）%、（50.28±0.13）%，而用Galectin-3siRNA与奥沙利铂同时处理后，48h细胞抑制率显著提高，分别为（19.94±0.61）%、（40.04±0.14）%、（62.04±0.13）%、（81.13±0.68）%、（90.59±0.68）%，差异有统计学意义（P＜0.05）。而其余各对照组之间，差异无统计学意义（P＞0.05）。说明转染Galectin-3siRNA后，SGC-7901细胞对不同浓度奥沙利铂的化疗敏感性均提高。结论：1.本实验通过转染Galectin-3siRNA成功下调了胃癌细胞SGC-7901中Galectin-3的表达；2.胃癌细胞SGC-7901中Galectin-3的表达下降后，细胞增殖受抑制，凋亡增加；3.抑制胃癌细胞SGC-7901中Galectin-3的表达后，细胞对奥沙利铂的化疗敏感性增加。
【作者】陈微微；
【导师】严苏；
【作者基本信息】苏州大学，内科学，2014，硕士
【关键词】Galectin-3；胃癌；RNA干扰；增殖；凋亡；化疗敏感性；

【参考文献】
[1]曾志敏.基于粗糙集和实例推理的汽车拆解回收信息管理系统设计[D].合肥工业大学,机械设计及理论,2013,硕士.
[2]严汉彦.频率控制的三相提升机[J].冶金自动化,1988,03:49-51.
[3]王海凤.工业控制网络的异常检测与防御资源分配研究[D].浙江大学,控制理论与控制工程,2014,硕士.
[4]于俊珠.上市公司内部控制审计研究[D].河北大学,会计,2014,硕士.
[5]刘倩倩.国内主题公园的新媒体营销研究[D].西安外国语大学,旅游管理,2014,硕士.
[6]徐常练.用样点空间调序法消除多次波[J].石油地球物理勘探,1995,06:803-810+848.
[7]王琳.叶尔绍夫创作中的宗教主题[D].辽宁大学,俄语语言文学,2012,硕士.
[8]邢鹏.我国电视体育专题节目研究[D].东北师范大学,新闻学,2012,硕士.
[9]贾婷婷.基于价值网的移动商务商业模式研究[D].哈尔滨理工大学,管理科学与工程,2012,硕士.
[10]李林升.Cu-Cr合金的热型连铸[D].广东工业大学,材料加工,2004,硕士.
[11]胡铮.基于场所精神的老旧建筑改造与更新[D].天津大学,建筑与土木工程,2013,硕士.
[12]林昌荣,王尚旭.应用地震数据体结构特征法预测孔缝洞型油气储层[J].石油地球物理勘探,2008,04:415-421+366.
[13]杨俊阁.己二酸二酰肼合成实验研究及过程模拟[D].天津大学,化学工程,2013,硕士.
[14]朱林,祁亚淑,许兴.宁夏盐池不同坡位旱地紫苜蓿水分来源[J].植物生态学报,2014,11:1226-1240.
[15]曹萌.典型促销工具对促销效果的影响[D].吉林大学,企业管理,2014,硕士.
[16]辛妍.第三只眼看材料产业与环保[J].新经济导刊,2014,03:79-84.
[17]张晓霞.鄂尔多斯地区民间借贷的法律规制研究[D].首都经济贸易大学,民商法学,2013,硕士.
[18]王睿.基于纳米半导体构建的电化学和光电化学传感器用于环境污染物监测研究[D].华中科技大学,2014.
[19]郁凯.椿叶花椒果实精油及其精馏物对蚊虫的生物活性研究[D].中南林业科技大学,发酵工程,2014,硕士.
[20]王记昌,邰鑫.一种物料分拣系统的设计[J].电子制作,2015,13:41.
[21]徐立鸿,胡克定.时滞系统的多步预报控制[J].控制与决策,1994,03:200-204+210.
[22]赵玲.国际产业转移背景下的L公司外包供应商选择与评估研究[D].山东大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[23]李翠1,2,薛昱3,王文胜4.基于平均单调博弈广义解的收益再分配模型[J].控制与决策.
[24]周永光.DH公司发展战略研究[D].广东工业大学,工商管理,2013,硕士.
[25]孙志涛.Shh信号通路在MNNG转化GES-1细胞系恶变中的作用机制[D].山西医科大学,普通外科（专业学位）,2013,硕士.
[26]张艳娜.基于运动想象的中风患者肢体康复系统研究[D].杭州电子科技大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[27]李丹.基于位置的O2O电子商务用户接受影响因素研究[D].北京邮电大学,企业管理,2013,硕士.
[28]冀恬红.河南省大遗址保护与旅游开发模式研究[D].河南科技大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[29]李芳.Apelin促大鼠血管平滑肌细胞增殖的PI3K/Akt信号通路研究[D].南华大学,药理学,2008,硕士.
[30]陈海庆,赵峰,金莉,方新城.时态数据的一种挖掘算法[J].计算机与数字工程,2003,02:15-17.
[31]傅小敬.社会责任信息披露质量对公司价值的影响研究[D].西南大学,会计学,2013,硕士.
[32]王玢佳.青海省互助县小菜子沟滑坡成因与稳定性[D].中国地质大学（北京）,地质工程,2014,硕士.
[33]白青刚,夏瑞华,周海斌,廖晓春.采用高性能集成芯片的故障录波装置设计[J].电力系统自动化,2005,22:99-101.
[34]傅巍玮.分布式实时垂直搜索引擎研究与实现[D].湖南大学,计算机科学与技术,2011,硕士.
[35]刘燕.关于秦皇岛市大学生村官工作的调研报告[D].燕山大学,公共管理,2013,硕士.
[36]陶平锋.富阳实验中学职评信息管理系统的设计与实现[D].大连理工大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[37]郭琳.线性调频雷达的干扰技术及其实现[D].复旦大学,电子与通信工程,2012,硕士.
[38]梁艳美.RUNX3在口腔癌前病变及鳞癌中表达的研究[D].吉林大学,口腔临床医学,2013,硕士.
[39]宋立忠,鄢圣茂,杨立秋.不确定系统鲁棒自适应离散变结构控制[J].自动化学报,2011,08:1024-1028.
[40]辛玉.山东省聊城市人口和计划生育信息化管理的现状及对策研究[D].吉林大学,社会医学与卫生事业管理,2014,硕士.
[41]李云杰.哈萨克斯坦石油勘探开发合同模式研究[D].新疆大学,国际法学,2013,硕士.
[42]王天成,辛杰,魏新江.不确定广义时滞系统的鲁棒稳定方法研究[J].控制与决策,2007,09:1070-1072+1080.
[43]潘文霞,全锐,王飞.基于双馈风电机组的变下垂系数控制策略[J].电力系统自动化,2015,11:126-131+186.
[44]李钰.吉林省农户水稻销售行为及其影响因素研究[D].吉林农业大学,农村与区域发展,2012,硕士.
[45]胡小链.新型电子给/受体材料的设计、合成及在聚合物太阳电池中的应用[D].浙江大学,高分子材料,2013,博士.
[46]刘博龙.红松籽免疫活性肽的生产关键技术优化[D].吉林大学,食品工程,2014,硕士.
[47]李颖.真菌漆酶高效定向固定化新策略探索[D].山东大学,分析化学,2014,博士.
[48]陈小慧.面向泰国华校的汉语教学研究[D].华中师范大学,汉语国际教育,2014,硕士.
[49]柴志峰.养老地产经营模式分析[D].上海交通大学,高级工商管理（EMBA）,2013,硕士.
[50]尧智.汽车遮阳板模拟环境下转动耐久性测试装置的开发及测试方法的研究[D].吉林大学,车辆工程,2012,硕士.