内皮祖细胞与小肠粘膜下层组织的生物相容性研究

【摘要】目的：本实验将大鼠骨髓源性血管内皮祖细胞（EPCs）与小肠粘膜下层组织（SIS）复合培养，观察单纯EPCs和转染血管内皮生长因子165（VEGF165）的EPCs在SIS上的生长、迁移情况，研究EPCs与SIS在体外的生物相容性。方法：使用密度梯度离心法分离、EGM-2MV培养基培养扩增EPCs，利用pAdEasy系统构建携有VEGF165的重组腺病毒载体，Ad-VEGF165体外转染EPCs，CCK-8法检测转染后EPCs生长增殖情况，ELISA法检测上清中VEGF的分泌量。将单纯EPCs、转染VEGF的EPCs、空病毒转染的EPCs分别与SIS进行复合培养，CCK-8法检测细胞生长增殖情况，扫描电镜观察细胞在SIS上生长情况，ELISA法检测复合培养后细胞上清液中VEGF和ANG-1生长因子的分泌情况。结果：ELISA法检测转染后EPCs上清中VEGF明显高表达。CCK-8结果显示复合培养后EPCs生长旺盛，转染组与较其它组细胞生长有显著差异。扫描电镜观察显示细胞与SIS复合培养3～5天后，可见SIS表面EPCs黏附良好，生长旺盛，细胞表面可见明显的蛋白分泌颗粒。ELISA法检测显示复合培养后转染组VEGF较其它组有显著差异,ANG-1各组之间无显著差异。结论：从形态学和细胞功能分泌两方面证实SIS作为天然支架材料与EPCs具有良好的生物相容性。
【作者】赵铁军；
【导师】李晓强；
【作者基本信息】苏州大学，普通外科学，2014，硕士
【关键词】血管内皮生长因子；内皮祖细胞；小肠粘膜下层组织；腺病毒；

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