丙戊酸钠对PD细胞模型的保护作用研究

【摘要】帕金森病(Parkinson’sdisease,PD)是一种常见的进展缓慢的神经系统退行性疾病，到目前为止，PD还不能完全治愈，探寻该病更好的治疗策略是亟待解决的难题。丙戊酸钠(valproate,VPA)，在临床上用于治疗双相精神障碍和癫痫,也可用于缓解神经退行性疾病的症状；现有研究表明，VPA在体内外都具有神经保护和神经营养作用，促进神经细胞轴突生长，抑制神经细胞凋亡。成束和延伸蛋白(fasciculationandelongationproteinzeta1,FEZ1)在神经细胞发育、胞内运输、细胞凋亡和神经递质的释放中起到重要的作用，参与中枢神经系统发育及轴突的生长和成束。肾上腺嗜铬细胞瘤PC12，可以合成分泌多巴胺，是多巴胺能神经元体外培养的细胞模型，常被用来建立体外PD细胞模型。目的：研究VPA对PC12细胞增殖、迁移及对FEZ1表达的影响；建立PD细胞模型，探讨VPA对6-OHDA诱导的PC12细胞损伤的神经保护和抗氧化作用。方法：(1)采用0.5、0.75、1.0mM的VPA分别处理PC12细胞24h，观察细胞的形态学变化和细胞迁移作用的影响，以MTT法检测VPA对细胞增殖作用的影响，采用real-timePCR与Westernblot检测FEZ1的表达变化。(2)建立PD细胞模型，将细胞分组：正常对照组、6-OHDA组、VPA(0.5、0.75、1.0mM)+6-OHDA组；观察各组细胞的动态变化，以MTT法检测各组细胞的增殖情况，采用real-timePCR与Westernblot检测FEZ1及凋亡相关基因的表达变化，检测各组细胞的SOD活性和MDA含量。结果：(1)MTT及细胞划痕结果显示，VPA能促进PC12细胞增殖与迁移，并呈剂量依赖性；real-timePCR与Westernblot结果显示，VPA能促进FEZ1mRNA和蛋白的表达，并呈剂量依赖性。(2)用6-OHDA处理PC12细胞制备PD细胞模型，PC12细胞增殖受到抑制；而用VPA预处理24h后，再以6-OHDA处理24h，细胞凋亡状况有所缓解，细胞皱缩数量降低，突起伸长，相互接触的细胞数量增多。real-timePCR与Westernblot检测各处理组FEZ1、Bcl-2和Bax的表达结果显示：6-OHDA组与正常对照组相比，FEZ1和Bcl-2表达下降，Bax表达上升；VPA+6-OHDA组与6-OHDA组相比，FEZ1和Bcl-2表达上升，Bax表达下降。SOD活性和MDA含量的检测结果显示：6-OHDA组与正常对照组相比SOD活性下降，MDA含量上升，VPA+6-OHDA组与6-OHDA组相比，SOD活性增加，MDA含量下降。结论：(1)VPA在实验浓度范围内能促进PC12细胞增殖、迁移，提高FEZ1mRNA及其蛋白表达，呈剂量依赖性。(2)VPA使6-OHDA诱导的PD细胞模型FEZ1和Bcl-2表达上调、Bax表达下调，提高细胞的抗氧化水平，减轻氧化应激对细胞的损伤，进而减少细胞凋亡和促进细胞增殖，发挥神经保护作用。
【作者】齐秀明；
【导师】夏春林；
【作者基本信息】苏州大学，细胞生物学，2014，硕士
【关键词】丙戊酸钠；PC12；帕金森病；细胞凋亡；FEZ1；氧化应激；

【参考文献】
[1]舒童.我国出版集团产权改革与绩效研究[D].山东大学,政治经济学,2013,硕士.
[2]王夏青.论惩罚性赔偿在我国经济法法律责任中的适用[D].对外经济贸易大学,法律,2004,硕士.
[3]黄筱庆,刘正士.新型净化消声器的声学及流场特性数值仿真分析[J].青岛理工大学学报,2014,05:.
[4]刘占锋.利用作物模拟模型辅助冬小麦限水灌溉决策的研究[D].河北农业大学,作物栽培学与耕作学,2004,硕士.
[5]高福祥.组合机床电气设备质量抽检概况[J].组合机床与自动化加工技术.1990(05)
[6]郭琦.西部少数民族地区文化产业发展研究[D].内蒙古科技大学,区域经济学,2013,硕士.
[7]张明林.具有混沌特性的秘密分享算法设计与实现[D].哈尔滨工业大学,计算机技术,2013,硕士.
[8]邱爽.登革热患者尿液中病毒核酸检测及其临床意义[D].广州医科大学,内科学（专业学位）,2014,硕士.
[9]张建鹏.不同认知方式个体在文本阅读中的插图效应[D].山东师范大学,基础心理学,2013,硕士.
[10]张强.杨浦滨江工业遗产保护与公共空间整治研究[D].清华大学,建筑学,2013,硕士.
[11]胡宇苗,尚智慧,李贤英,张灯青,金武松.新型含炔基吡啶的六苯并蔻衍生物的合成[J].合成化学,2014,04:529-531.
[12]仲召阳.多肿瘤标志物诊断模式的建立和新型电化学免疫传感器的研制[D].第三军医大学,2010.
[13]马瑞伦.倾角校正(DMO)方法的比较[J].石油地球物理勘探,1994,S1:32-41+173.
[14]汪蓓.“把”字句的核心语义及其对外汉语教学[D].华中科技大学,汉语国际教育,2013,硕士.
[15]邹士梅.论刘小东油画的现实主义特征[D].苏州大学,美术学,2014,硕士.
[16]孙卫明.科学与工程计算中的Fourier级数多尺度方法[D].北京交通大学,2011.
[17]孙立宏.水稻品种抗褐飞虱基因的定位及分子标记辅助选择[D].南京农业大学,2005.
[18]金启宏.K、Na、Ca、Mg4种元素在疏叶骆驼刺体内含量分布特点的研究[J].植物生态学报,1996,01:80-84.
[19]马昕.农村互助养老模式研究[D].河北大学,社会学,2014,硕士.
[20]王智堂.穿芯式电流互感器的容量匹配与正确选型[J].冶金自动化,2006,03:68-69.
[21]袁嘉璐.基于HLA的VANET仿真平台构建与性能分析[D].北京交通大学,2014.
[22]孙玺亮.DA465QA发动机曲轴箱强制通风系统设计[D].吉林大学,动力工程,2012,硕士.
[23]高通.海洋可控源电磁发射系统辅助单元的软硬件研制[D].中国地质大学（北京）,地球探测与信息技术,2014,硕士.
[24]吴宏森.炼钢用铝弹发射的测速和计数[J].冶金自动化,1980,05:52-54.
[25]蒋勇英.远程监控系统在煤矿中应用的研究[D].辽宁工程技术大学,控制理论与控制工程,2004,硕士.
[26]朱建辉.复合材料螺栓连接渐进损伤分析与强度预测[D].南京航空航天大学,飞行器设计,2013,硕士.
[27]徐银雨.轻量级无线传感器网络安全认证方法研究[D].西安电子科技大学,信息安全,2012,硕士.
[28]陈华俊.个人金融服务中的客户关系管理策略研究[D].浙江大学,2002.
[29]张强,韩建民,梁吉庆,杨智勇,王军强.X2CrNiMoN22-5-3双相不锈钢MAG焊接头的组织与性能[J].热加工工艺,2014,01:202-204.
[30]王爱林.用于油气水三相流测量的气液分离装置的研究[D].东北石油大学,测试计量技术及仪器,2013,硕士.
[31]高剑超.琼东南盆地深水区晚渐新世—中新世丘状反射体地质解释及生物礁含气性分析[D].西北大学,矿物学、岩石学、矿床学,2014,硕士.
[32]吴浩.基于区间删失数据的两个估计问题[D].华中师范大学,概率论与数理统计,2014,硕士.
[33]马韶军.社区警务建设研究[D].大连理工大学,马克思主义理论与思想政治教育,2004,硕士.
[34]武红艳.人造冠对基牙周围组织影响的免疫学研究[D].第四军医大学,口腔临床医学,2004,硕士.
[35]司欢欢.炭负载铁基催化剂的制备及催化甲烷裂解性能[D].大连理工大学,化学工程与技术,2013,硕士.
[36]申雨鑫.论名片设计的多元化[D].吉林艺术学院,艺术设计,2012,硕士.
[37]李丽军.基于超电荷绿色荧光蛋白与纳米材料的传感及纳米材料毒性研究[D].湖南大学,2014.
[38]王文剑.中国的财政分权与地方政府规模及其结构——基于经验的假说与解释[J].世界经济文汇,2010,05:105-119.
[39]骆云志,刘治红.视频监控技术发展综述[J].兵工自动化,2009,01:1-3+11.
[40]李鹏.便携式数字存储示波器的设计研究[D].河南科技大学,测试计量技术及仪器,2014,硕士.
[41]周涛.合金渗碳钢20CrMnTi的成形磨削工艺试验及仿真研究[D].湖南大学,机械制造及其自动化,2012,硕士.
[42]蔡翊宇.氮化碳负载钯纳米粒子催化甲酸分解和硝基化合物加氢[D].上海交通大学,2014.
[43]曾文英.森林防火监测预警系统的设计与实现[D].江西师范大学,2004.
[44]邓玥.近红外激光光斑与可见光图像融合算法研究[D].中国科学院研究生院（长春光学精密机械与物理研究所）,机械工程,2012,硕士.
[45]刘明亮.土地利用规划的环境影响评价研究[D].湖南师范大学,自然地理学,2004,硕士.
[46]樊建平.建筑企业ERP系统的分析、设计及物资管理子系统的开发[D].华北电力大学（北京）,管理科学与工程,2003,硕士.
[47]朱燕琴.舟山群岛新区临港产业政策研究[D].浙江海洋学院,农村与区域发展（专业学位）,2014,硕士.
[48]于志刚.唐代的僧人、寺院与社会生活[D].郑州大学,中国古代史,2013,硕士.
[49]黄文韬.IT职业教育培训机构营销策略研究[D].天津大学,工商管理,2013,硕士.
[50]乔邦利.在多元化的进程中[D].中国艺术研究院,音乐学,2004,硕士.