羟基积雪草苷体内外抗辐射损伤及机制研究

【摘要】目的：研究羟基积雪草苷(madecassoside，MC）体内外抗辐射作用及其机制。方法：①NIH3T3正常细胞株，采用60Coγ15Gy（每分钟照射2Gy）剂量辐射造成细胞损伤模型，用MTT法观察MC对辐射造成细胞损伤的保护作用；邻苯三酚自氧化法被用来产生超氧阴离子自由基O2-，使用酶标仪测定MC清除超氧阴离子O2-自由基的清除率；使用总SOD活性检测试剂盒（NBT法）检测给药辐射后，细胞裂解液中SOD水平；使用细胞周期试剂盒和细胞凋亡试剂盒考察MC在不同浓度下或者不同时间点对辐射后细胞周期和凋亡的作用。②建立X射线10Gy剂量下小鼠损伤模型，记录小鼠体重变化；测定脾脏指数、胸腺指数；用MTT方法测定脾淋巴细胞增殖；苏木素伊红（hematoxylinandeosim,HE）染色，借助于相应的损伤评分方法考察MC对辐射造成小鼠小肠损伤的保护作用。结果：①MTT结果显示，MC的3个浓度（15μg/mL、7.5μg/mL、3.75μg/mL）均对辐射后的NIH3T3细胞有保护作用，而在1.88μg/mL时显示没有效果；MC浓度在2.0mg/mL时，对O2-自由基的清除率达到44%，但低于同浓度的阳性对照抗坏血酸（VC）（74%）；MC浓度在120μg/mL，60μg/mL，30μg/mL能提高细胞裂解液中SOD水平，但在15μg/mL时不能显著提高该水平；辐射后48小时，与模型组细胞相比，MC(7.5μg/mL，3.75μg/mL)能够使细胞S期时长延长，G2期和SubG1期减少，从S期到G2期顺利过渡，缓解了细胞周期的阻滞。细胞分别辐射后24小时、48小时，与模型组相比，15μg/mL的MC可以逆转辐射引起的细胞凋亡，并使细胞达到或接近正常状态。②10Gy辐射后9天内，MC未能阻止接受辐射的小鼠体重的下降；在辐射后第8天，MC可以提高大部分受辐射小鼠的脾脏指数和胸腺指数；MC大剂量组（25mg/kg）能提高脾淋巴细胞增殖活力；形态学观察MC能够使辐射后（5小时、第2天和第8天）的小鼠小肠上皮组织结构趋于完整。结论：MC具有一定的抗辐射作用。其机制可能与抗氧化，防止细胞凋亡和提高小鼠免疫功能有关。
【作者】孙仁来；
【导师】明志君；
【作者基本信息】苏州大学，药学（专业学位），2014，硕士
【关键词】羟基积雪草苷；抗辐射；抗氧化；周期；凋亡；

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