KiSS-1基因对妊娠滋养细胞生物学行为影响及其在复发性流产中作用机制的研究

【摘要】目的：探讨KiSS-1基因对妊娠滋养细胞生物学行为的影响及其在复发性流产中的作用机制。方法：①免疫组织化学方法检测kisspeptin、GPR54在复发性流产患者绒毛及蜕膜组织中表达水平；②构建重组质粒pcDNA3.1（+）-KiSS-1；③将重组质粒pcDNA3.1（+）-KiSS-1转染至人滋养层肿瘤JAR细胞株，建立单克隆细胞系；④应用RT-PCR及WesternBlot方法分别检测转染细胞KiSS-1的mRNA及编码多肽kisspeptin表达；⑤检测KiSS-1基因及外源性kisspeptin对JAR细胞生长增殖、软琼脂克隆形成能力及迁移侵袭能力的影响。结果：①复发性流产患者绒毛kisspeptin、GPR54的表达均明显低于正常妊娠者（P<0.05），蜕膜组织kisspeptin的表达明显低于正常妊娠者（P<0.05），蜕膜组织中GPR54的表达在两组间无明显差异；②成功构建重组质粒pcDNA3.1（+）-KiSS-1，并经PCR和测序鉴定无误；③将重组质粒pcDNA3.1（+）-KiSS-1成功转染至人滋养细胞肿瘤株JAR细胞；④筛选出稳定转染的细胞，并通过RT-PCR和WesternBlot鉴定目的基因KiSS-1mRNA和编码多肽kisspeptin均成阳性表达；⑤KiSS-1基因和kisspeptin对JAR细胞的生长增殖及克隆形成能力无影响，但明显抑制其迁移和侵袭能力。结论：Kisspeptin在复发性流产患者母胎界面绒毛和蜕膜组织的表达均低下，GPR54在复发性流产患者母胎界面绒毛组织表达低下。KiSS-1基因及其产物kisspeptin能显著抑制滋养细胞迁移及侵袭能力，推测KiSS-1基因在妊娠期母胎界面的表达调控对妊娠的维持起重要作用，其表达异常与复发性流产有关。
【作者】田冀雯；
【导师】张弘；
【作者基本信息】苏州大学，妇产科学，2014，硕士
【关键词】KiSS-1；kisspeptin；GPR54；复发性流产；

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