奥沙利铂联合五氟尿嘧啶术前短程冲击化疗对大肠癌组织survivin基因表达的影响

【摘要】
【作者】沈依；
【导师】金志明；
【作者基本信息】苏州大学，外科学，2014，硕士
【研究背景及目的】大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，对人类生命有极大的危害。近年来，随着国内膳食结构的改变等原因，大肠癌的发病率和死亡率显著上升。其发病率约排在恶性肿瘤的第三位，且具有年轻化方向的趋势。大约有30%-50%的患者会发生转移性复发，并成为导致患者死亡的主要原因。手术是大肠癌最重要的治疗手段,但进展期大肠癌的复发率仍然很高。近年来，新辅助化疗作为综合治疗的一种方法在大肠癌中的应用已得到越来越多的关注。新辅助化疗是指在施行手术或放疗之前应用的全身性化疗,其目的是：①使原发肿瘤或转移病灶缩小,降低肿瘤分期,使不能切除的肿瘤变成可以切除,提高根治性手术的切除率,降低肿瘤复发率；②控制术前存在的微小癌及亚临床病灶,抑制由于手术作用引发的肿瘤增殖刺激，控制医源性转移；③在损伤肿瘤病灶的血管供应及淋巴管之前进行化疗,使化疗药物容易在肿瘤局部达到有效浓度,起到高剂量杀伤作用；④为术后判定或选择抗癌药物提供依据,有助于术后化疗方案的选择,并可协助评价预后,防止远处转移。尽管目前临床上缺乏随机对照研究的资料肯定其疗效,但结直肠癌病人术前新辅助化疗的应用已经越来越普遍。但是，术前新辅助化疗并非没有缺点。化疗药物的毒副作用可能会影响将患者机体术前调节到最佳状况的准备；大剂量多疗程的辅助化疗甚至使有些患者由于骨髓抑制不得不延期手术；对化疗不敏感的肿瘤患者来说，存在延误治疗、使病期进展的风险。Li等在96例直肠癌术前新辅助化疗病人中，进行术后伤口愈合的系列研究,结果发现：新辅助化疗组病人切口愈合延缓的发生率为32.3%，明显高于对照组的15.8%；术后切口感染的发生率化疗组病人为21.9%，也明显高于对照组的12.6%。所以，目前对于术前新辅助化疗的方案及疗程尚未有统一的意见。术前短程化疗可以减少大剂量化疗对手术的影响，同时不会延误有不全性梗阻或缓慢出血的结直肠肿瘤病人的手术治疗时间，提高手术安全性。刘伟平等研究报告，术前短程冲击化疗后行根治性手术治疗，术后化疗组疗效明显高于对照组，并且毒副反应少，结束一个疗程的术前短程冲击化疗后均能行正常手术。奥沙利铂作为第三代铂类药物，抗癌活性强，与5-Fu有协同作用，对多种肿瘤有效，毒副作用低，已经广泛的应用。近期有学者研究表明奥沙利铂化疗能够通过改变p38有丝分裂原激活蛋白（Mitogen-activatingprotein，MAP)和蛋白酶体(proteasome)来降低结肠癌细胞中调亡抑制基因（survivin）的活性，诱导肿瘤细胞凋亡。Survivin是凋亡抑制蛋白(Inhibitorofapoptosis，IAP)家族的新成员，是目前发现最强的凋亡抑制因子。Survivin功能复杂，具有抑制细胞凋亡，促进细胞转化并且参与细胞的有丝分裂、血管的生成和肿瘤细胞耐药性的产生等作用。Sohn等在HCT116人结肠癌细胞中发现奥沙利铂能有效抑制肿瘤细胞浆中Survivin的表达。本研究通过对大肠癌患者术前奥沙利铂联合五氟尿嘧啶短程冲击化疗后，对手术切除的肿瘤组织进行检测调亡抑制基因Survivin的表达，进一步评估术前短程辅助化疗对大肠癌患者的治疗价值。
【实验方法】对99例结直肠患者随机分为两组。实验组50例，进行术前奥沙利铂联合五氟尿嘧啶短程冲击化疗，三日后手术。对照组49例，常规术前准备后手术。1.观察和记录两组病人的一般资料，包括性别、年龄和体重。入院后、手术前和手术后抽外周血检查全血和肝、肾功能。严密观察和记录术后的不良反应，进行对比分析。2.免疫组化技术检测结直肠癌肿瘤组织中的survivin的强度。手术切除的肿瘤组织标本根据制造商的推荐应用辣根过氧化物酶技术（horseradish-peroxidasetechnique）进行survivin免疫组化染色。3.应用RT-PCR技术检测结直肠癌肿瘤组织中的survivinmRNA的表达量。应用RT-PCR技术检测手术切除的肿瘤组织标本的survivinmRNA的表达量。连续收集荧光信号，用SequenceDetectionSoftwareV1.2分析软件获取Ct值。根据Ct值和标准品浓度绘制标准曲线，计算扩增效率，计算SurvivinmRNA的相对定量数。4.统计学分析釆用SARS6.12统计软件进行数据处理，所有变量均用x±s描述，组间均数比较采用成组设计的t检验进行数据分析，计数资料的比较采用x2检验。
【实验结果】一、术前奥沙利铂联合五氟尿嘧啶短程冲击化疗对手术的不良影响实验组病人术后的不良反应，包括腹腔感染、吻合口瘘、腹泻、肠梗阻、肺部感染、尿路感染、切口感染等发生率，与对照组相似（P>0.05），均无统计意义,表明术前奥沙利铂联合五氟尿嘧啶短程冲击化疗是安全的，不会对手术造成明显影响。二、应用免疫组化技术检测结直肠癌肿瘤组织中的survivin基因表达的强度实验组和对照组肿瘤标本的survivin免疫组化的表达率分别为88.0%和95.90%，在两组间的差异有显著性（P<0.05）。在有淋巴结转移病例中，survivin的表达率在新辅助化疗实验组低于手术对照组，差异有显著意义（P<0.05）。三、应用RT-PCR技术检测结直肠癌肿瘤组织中的survivinmRNA的表达量实验组survivinmRNA表达平均水平为18.1356±16.3216，明显低于照组的平均水平32.3904±18.6915，有显著差异（P=0.0041）。
【结论】1.术前奥沙利铂联合五氟尿嘧啶短程冲击化疗后结直肠癌肿瘤组织的survivin基因表达比单纯手术组的表达低。2.术前奥沙利铂联合五氟尿嘧啶短程冲击化疗可以诱使结直肠癌肿瘤组织细胞凋亡。3.术前奥沙利铂联合五氟尿嘧啶短程冲击化疗对手术是安全的，不会引起术后短期内不良反应。
【关键词】survivin基因；新辅助化疗；奥沙利铂；五氟尿嘧啶；结直肠癌；

【参考文献】
[1]汪亮.MIMO/OFDM系统的同步与自适应调制算法[D].清华大学,通信与信息系统,2003,硕士.
[2]李明.氢气处理的纳米氧化铁光解水研究[D].苏州大学,凝聚态物理,2014,硕士.
[3]王萌.大型水平轴风力机叶片载荷计算与疲劳分析[D].新疆大学,控制理论与控制工程,2013,硕士.
[4]范丽娟.S企业供应链中EPC物联网的应用研究[D].北京交通大学,2014.
[5]程一,朱宗林,高金陵.使闭环系统对执行器失效具有完整性的动态补偿器设计[J].自动化学报,1990,04:297-302.
[6]谢敏.大学生思想政治教育的博弈分析[D].延安大学,思想政治教育,2014,硕士.
[7]龙华云.谈如何提高高校乐理教学质量[J].音乐时空(理论版),2015,06:156.
[8]韩冷.舒尼替尼治疗进展期肾癌63例的临床研究[D].吉林大学,临床医学,2014,硕士.
[9]刘东梅.p型掺杂层用于提高有机太阳能电池和有机发光器件性能的研究[D].吉林大学,集成电路工程,2013,硕士.
[10]叶钰亭.淡色库蚊PSMB6基因克隆及其在抗药性中的作用[D].南京医科大学,病原生物学,2013,硕士.
[11]张思复.基于操作者感受的数控机床概念设计[D].东北大学,机械设计及理论,2010,硕士.
[12]翁启献,段裘龙.〈八〉主机选型与轴系设计[J].江苏船舶.1990(01)
[13]孙丙香,姜久春,张维戈,王震坡,姜君,毕太伟.基于内部收益率法的动力电池租赁价格测算[J].电力系统自动化,2011,13:27-30.
[14]杜强泽.ZT公司济南平陵城项目投资分析与风险控制研究[D].西南交通大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[15]倪丽娟.电石生成过程中的界面行为研究[D].北京化工大学,化学工程与技术,2013,硕士.
[16]朱兴华.印制电路板传输线制作工艺对信号完整性的影响与仿真[D].电子科技大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[17]宋平,阮明波,刘京,冉光钧,徐维林.燃料电池非铂基氧还原电催化剂的最新研究进展[J].电化学,2015,02:130-137.
[18]邓博贤.公共空间中的现代涂鸦艺术[D].中央美术学院,壁画系,2013,硕士.
[19]周同.面向集合和方向的空间数据库关键字查询[D].燕山大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[20]曹兆银.阐释学视角下《庄子》英译研究[D].苏州大学,外国语言学与应用语言学,2013,硕士.
[21]陈君豪.我国轴承毛坯锻压设备的发展前景[J].轴承.1992(04)
[22]周志伟.银行网点选址规划管理信息系统的设计与实现[D].吉林大学,软件工程,2012,硕士.
[23]马春燕.miRNA-124在肺泡上皮细胞和巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染中的免疫调控机制研究[D].宁夏大学,草业科学,2014,博士.
[24]涂杰.论我国亲属作证豁免权制度的完善[D].华中师范大学,法律,2013,硕士.
[25]宋威.基于手机控制的智能家居系统设计[D].中北大学,测试计量技术及仪器,2013,硕士.
[26]朱旭斌,刘娅梅,孙书存.南京地区落叶栎林主要木本植物的展叶动态研究[J].植物生态学报,2005,01:128-136.
[27]侯玉婷,刘名轩,薛怀国.石墨烯/P(AN-co-AA)复合纳米纤维膜固定血红蛋白及其电催化[A].中国化学会高分子学科委员会.2013年全国高分子学术论文报告会论文摘要集——主题J：高分子复合体系[C].中国化学会高分子学科委员会:,2013:1.
[28]刘顺航.新疆喀什及阿克苏地区中软场地建筑基坑失稳分析及治理方法的研究[D].新疆大学,结构工程,2013,硕士.
[29]赵文杰李伟.客户关系管理：实现以客户为中心[N].金融时报,2002-04-15005.
[30]和敬涵,谢毓毓,叶豪东,王小君,李智诚.电动汽车充电模式对主动配电网的影响[J].电力建设,2015,01:97-102.
[31]张恒.城市交通干道内机动车污染物排放和扩散的仿真模拟研究[D].山东大学,流体机械及工程,2013,硕士.
[32]徐衍.哈尔乌素露天煤矿边坡稳定性研究[D].内蒙古科技大学,采矿工程,2014,硕士.
[33]俞婕.铁皮石斛的内生细菌多态性与优势种群分析[D].浙江理工大学,生物化学与分子生物学,2013,硕士.
[34]王娅楠.论网络小说电影改编的特色和文化意义[D].华中师范大学,影视文学,2014,硕士.
[35]赵幸.可定制的嵌入式实时Linux研究与开发[D].西北工业大学,计算机应用技术,2004,硕士.
[36]张勋,赵瑞珍,岑翼刚,胡绍海.基于字典学习与稀疏表示的灰度图像颜色重建算法[J].计算机辅助设计与图形学学报,2014,07:1092-1098+1108.
[37]蔡红艳.Lixisenatide对淀粉样β蛋白所致大鼠认知障碍的拮抗效应研究[D].山西医科大学,生理学,2014,博士.
[38]江元英.ISO/FDIS19011《质量/环境管理体系审核指南》简介(一)对审核员能力的要求[J].质量与可靠性.2002(06)
[39]陈宇昕.10kA底部阴极稀土电解槽电—磁—流多物理场耦合仿真[D].内蒙古科技大学,钢铁冶金,2013,硕士.
[40]张伟伟.我国房地产开发贷款信用风险评价研究[D].哈尔滨工业大学,技术经济及管理,2014,硕士.
[41]储丽阳,王立新.折纸艺术形式在箱包设计中的运用探析[J].品牌(下半月),2015,01:184-185.
[42]刘畅.浅析中学思想政治课认同障碍的成因与对策[D].苏州大学,学科教学,2012,硕士.
[43]朱新鹏.梁子湖浮游动物群落结构及其与环境因子的关系研究[D].华中农业大学,水产养殖,2014,硕士.
[44]刘松林.论新时期民办教育政策的变化及实践[D].中共中央党校,中共党史,2004,硕士.
[45]刘娇.城市社区科普现状与对策研究[D].东北大学,科学技术哲学,2009,硕士.
[46]唐伟峰.电源分配网络中去耦电容器Spice建模[D].西安电子科技大学,电子与通信工程,2012,硕士.
[47]刘曦.《西双版纳傣文报》对傣族文化传承的效果研究[D].云南师范大学,新闻学,2013,硕士.
[48]王彦波.论罪刑法定原则的中国困境与出路[D].重庆大学,法律（专业学位）,2014,硕士.
[49]罗双双.扬州市县域经济发展差异的变迁规律研究[D].扬州大学,区域经济学,2011,硕士.
[50]贾真.甘肃泾川西王母信俗研究[D].西北师范大学,文物与博物馆学（专业学位）,2013,硕士.