东方山羊豆赤霉素受体和水通道蛋白基因功能研究

【摘要】东方山羊豆（GalegaorientalisL.）属于豆科山羊豆属，为优质多年生豆科牧草，具有重要的生态和经济价值。提高牧草生物量、抗逆性是牧草育种的主要内容。植物基因资源挖掘与利用，是牧草遗传改良的重要技术途径。本论文选择东方山羊豆赤霉素受体、水通道蛋白作为研究对象，开展了基因功能验证及转基因研究工作。本试验主要取得如下进展：1.通过酵母双杂交实验表明，东方山羊豆赤霉素受体（GoGID）可以与拟南芥DELLA蛋白在GA存在条件下互作。通过突变体回复实验表明，GoGID能够部分回复拟南芥突变体gid1ac；完全回复突变体gid1ab为正常表型。表明GoGID编码蛋白能够部分替代AtGIDs功能，具有生物学功能。2.构建表达载体pBI121-GoGID-GUS，通过农杆菌介导的花序浸染法转化拟南芥。经过后代的筛选、扩繁得到T3代转基因株系。研究表明，转基因拟南芥植株高度、鲜重、干重、种子产量都增加，其中植株干重比对照提高90%~160%。3.采用农杆菌介导的愈伤侵染法，转化紫花苜蓿。转基因苜蓿及对照经扦插繁殖，用于生物学观察及实验。结果表明，转基因紫花苜蓿GroupⅠ、GroupⅡ组，植株干重比对照提高8%-46%；GroupⅢ干重与对照相似，但叶/茎比提高。4.在东方山羊豆一个受盐诱导EST基础上，克隆得到与植物AQP同源的基因。该基因编码289个氨基酸，与植物的PIP基因序列同源性最高，属于PIP1亚类，命名为GoPIP1，在Genbank中登录HM991477。5.GoPIP1基因在根、茎、叶中都有表达，其中在根中表达量最高。受盐、干旱强烈诱导。亚细胞分析表明，定位于细胞膜。在非胁迫条件下，转基因植株地上部/地下部比例提高，叶片失水速率增加；在盐份条件下，转基因株系与对照基本没有差异，而且GoPIP1基因没有促进离子转运。在模拟干旱条件下，转基因拟南芥鲜重降低、含水量降低，体内脯氨酸含量降低、丙二醛含量提高；转基因拟南芥，离体叶片失水速率增加，叶片渗透势增加；同时转基因植株中，ABA合成途径及受ABA诱导基因表达量增加。GoPIP1增加了转基因拟南芥对干旱敏感性。
【作者】李俊；
【导师】高洪文；王学敏；
【作者基本信息】中国农业科学院，草业科学，2014，博士
【关键词】东方山羊豆；赤霉素受体；水通道蛋白；生物量；转基因紫花苜蓿；

【参考文献】
[1]卢向华.基于评价的信息系统价值促生模式研究[D].复旦大学,2004.
[2]赵琳.创业板上市公司董事会治理绩效影响因素研究[D].山东大学,企业管理,2014,博士.
[3]王景荣.狄拉克费米子体系中的量子相变和非费米液体行为[D].中国科学技术大学,2014.
[4]吴建成,张大力,刘家琦,田宗勇.用反射波旅行时对层状介质进行成像的新方法[J].石油地球物理勘探,1996,05:643-650+750.
[5]李晓.西部高校人才流失对策研究[D].南京航空航天大学,行政管理,2013,硕士.
[6]张晋娜.钙钛矿型新型氧吸附剂的制备及性能研究[D].辽宁石油化工大学,化学工艺,2014,硕士.
[7]赵海宝,秦宝荣,韩立光,王淑花.托盘自动供给装置的设计及研究[J].机械设计与制造工程,2013,02:10-13.
[8]刘超宇.氧化还原敏感和肿瘤靶向聚合物胶束的研究[D].西南交通大学,材料科学与工程,2013,硕士.
[9]贺冬梅.基于探索性因子分析和结构方程模型的学生成绩综合评价[D].东北师范大学,应用数学,2012,硕士.
[10]占文锋,王强,刘太福,吕怀杰.高分辨率地震反射技术在煤层风氧化带探测中的应用[J].煤炭工程,2015,01:53-56.
[11]智晓旭.心理支持护理对改善癌症化疗患者自我感受负担的效果研究[D].第二军医大学,护理学（专业学位）,2013,硕士.
[12]姜鑫.CUBA女篮运动员手纹特征的研究[D].东北师范大学,体育教育训练学,2012,硕士.
[13]王得水.冷弯型钢CAD网络化远程设计技术研究[D].燕山大学,机械设计及理论,2004,硕士.
[14]蒋连斌,陈道宏,高振山,廉国芬,刘学伟,何樵登.一种去面波的新方法[J].石油地球物理勘探,1997,S2:103-106+189.
[15]翟建平.气动载荷下高速列车动力学性能及参数优化研究[D].西南交通大学,载运工具运用工程,2013,硕士.
[16]田应庭.小学数学教师课堂提问的调查研究[D].湖南师范大学,教育（专业学位）,2013,硕士.
[17]符磊.年轻中子星自旋演化的研究[D].南京大学,天文学,2014,博士.
[18]曹玥.纳米TiO_2的表面改性及提高其光催化活性的策略探索[D].黑龙江大学,物理化学,2013,硕士.
[19]丁佳.长春高新技术产业开发区社会事业管理探析[D].东北师范大学,公共管理（专业学位）,2012,硕士.
[20]肖波.融合多线索的视频中人体对象分割技术研究[D].宁波大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[21]胡余龙.多元时间序列流动态关联规则挖掘[D].哈尔滨工业大学,计算机科学与技术,2013,硕士.
[22]董玥颖.mKATP在七氟烷后处理大鼠心肌保护作用中的影响[D].山西医科大学,麻醉学,2013,硕士.
[23]孙成.中国邮政储蓄银行房地产信贷风险管理研究[D].山东大学,项目管理（专业学位）,2013,硕士.
[24]冯钢.基于GCC的嵌入式系统编译器研究与开发[D].浙江大学,计算机软件与理论,2004,硕士.
[25]魏娟.湿式电除尘器进气段气流分布的模拟研究[D].河北科技大学,材料加工工程,2013,硕士.
[26]刘占伟.基于DWT与2DLDA的人耳识别算法研究[D].东北石油大学,精密仪器及机械,2013,硕士.
[27]周百灵.基于垂直视差消除的立体视觉疲劳缓解技术研究[D].吉林大学,通信与信息系统,2014,硕士.
[28]白宝焕.政府管制下我国房地产业SCP范式研究[D].西安建筑科技大学,工程经济与管理,2013,硕士.
[29]范学方.河南华纬公司市场营销策略研究[D].兰州大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[30]李杨.我国股市主板与创业板的市场质量比较研究[D].山东财经大学,金融学,2012,硕士.
[31]王清平.Cr含量对铜铬锆合金性能及组织的影响[D].西安建筑科技大学,材料加工工程,2013,硕士.
[32]冯威.城市生活垃圾焚烧炉炉排系统设计及其优化[D].重庆理工大学,机械制造及其自动化,2012,硕士.
[33]李慧,祝红,闫莉,谷婧丽,郝维,曹济民.多壁碳纳米管抑制RAW264.7巨噬细胞的吞噬功能[J].医学研究杂志,2014,11:20-24.
[34]张习军.无刷直流电动机模糊神经网络控制算法的研究[D].山东大学,电子与通信工程（专业学位）,2013,硕士.
[35]刘昳.《对话吸血鬼：殖民时期非洲的谣言与历史》（第二章）翻译项目报告[D].四川外国语大学,翻译（专业学位）,2013,硕士.
[36]代曼漫.语用标记等效原则探析[D].四川外国语大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[37]李斐斐.软交换ISSTAR自动维护系统的开发及应用[D].内蒙古大学,电子与通信工程,2013,硕士.
[38]姚名泽.南疆机采棉膜下滴灌土壤水分运移特征、耗水规律及产量品质研究[D].甘肃农业大学,农业水土程,2013,硕士.
[39]肖潇.明清宫廷服饰图案的创新设计方法研究[D].浙江理工大学,艺术设计（专业学位）,2014,硕士.
[40]刘宁.D类音频功放中数字脉宽调制器的研究与设计[D].西安电子科技大学,电路与系统,2012,硕士.
[41]刘雁.单色光退偏器及液晶退偏效应的研究[D].曲阜师范大学,光学,2004,硕士.
[42]张迎辉.出租汽车公司财务管理问题研究[D].吉林大学,项目管理,2014,硕士.
[43]高辉远,李卫军,何永革,尚新刚.Na_2SO_4胁迫对四种抗盐性不同牧草膜脂过氧化和活性氧清除系统的影响[J].植物生态学报,1995,02:192-196.
[44]毕九川.进化心理学视角下的中国官员腐败研究[D].外交学院,国际政治,2014,硕士.
[45]高文静.基于时空特征的人体动作识别方法研究[D].燕山大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[46]李麒豫.抑郁症中医证候要素量表的信度和效度研究[D].北京中医药大学,中医学,2013,硕士.
[47]罗小勇.论我国证券监管法律模式的完善[D].湘潭大学,经济法学,2003,硕士.
[48]朱星光.质子交换膜燃料电池控制策略研究[D].西南交通大学,电气工程,2013,硕士.
[49]单薇.基于复制粘贴的数字图像篡改检测研究[D].苏州大学,计算机技术（专业学位）,2014,硕士.
[50]季铮.近景目标三维重建的自动化方法研究[D].武汉大学,2007.