嗜酸乳杆菌对健康及口蹄疫疫苗接种小鼠的免疫调节作用

【摘要】益生菌通过抑制或增强对细胞因子表达的调节影响肠道免疫反应。研究表明，口服嗜酸乳杆菌LactobacillusacidophilusSW1（LASW1）具有免疫增强作用，能增强病毒特异性免疫反应，动物以口服方式摄取该菌株后，能够调节体内细胞因子的表达水平。在本研究中，首先评估了LASW1对健康BALB/c小鼠全身性免疫反应的影响。结果表明饲喂LASW1后，与对照组相比，小鼠体内肿瘤坏死因子（TNF-α）的表达受到显著抑制，而Th1型细胞因子，包括干扰素-gamma（IFN-γ）和白细胞介素12（IL-12）的表达明显升高。实验还发现，口服LASW1后，小鼠体内转化生长因子（TGF-β）的水平也明显升高。此外，高剂量LASW1与低剂量LASW1分别饲喂小鼠，与对照组相比，外周血中CD3+CD4+和CD3+CD8+T细胞数量随之降低。同时发现，小鼠血清中免疫球蛋白的浓度也发生了明显的变化，并且这种变化呈菌株剂量依赖性。与体内试验相比，热致死型（heat-killed，HK）LASW1（HKLASW1）能诱导脾脏细胞大量分泌TNF-a，而细菌培养上清液（La-sup）能强烈的抑制HKLASAW1诱导后脾脏淋巴细胞产生的TNF-α量，但能增强TGF-β的产生。实验还证实La-sup也能引起脾脏淋巴细胞中调节性T细胞比例的增加。这些结果说明，LASW1对健康小鼠具有深远的免疫调节作用，且这种调节作用呈剂量依赖性。实验数据提示，LASW1诱导的免疫调节机制可能以依赖调节性T细胞的方式进行，LASW1分泌因子在其免疫调节过程中可能发挥着重要的作用。其次，研究了益生素调节特异性细胞免疫反应和体液免疫反应的功能。以小鼠为实验动物，设计了一项志在探讨LASW1对商用口蹄疫疫苗免疫反应的影响。30只小鼠随机分成三组，每组10只。小鼠接种口蹄疫疫苗后，一组小鼠连续饲喂5天LASW1，每次每天2-5×109CFU菌量。数周后，采血分离血清，检测其中特异性IgG及其亚型的含量，同时检测血清中细胞因子的变化。此外，免疫14天后，分别检测了ConA诱导的T细胞增殖反应、146S抗原的超敏反应（DTH）以及脾脏淋巴细胞分泌的细胞因子水平。结果表明，小鼠血清中产生了较高水平的IFN-γ和TNF-α。与单独免疫口蹄疫疫苗的对照组相比，血清中总IgG水平没有明显变化，但IgG1水平下降，而IgG2a水平上升。另外，口服LASW1也能增强DTH反应、ConA诱导的淋巴细胞增殖；当用146S抗原和LASW1共同刺激脾脏细胞时，与对照组相比，细胞上清液中IFN-γ和TNF-α的量明显增加。这些数据提示，LASW1可能会增强口蹄疫疫苗的Th1型免疫反应，也具有增强体液与细胞免疫反应的潜能。结果提示，LASW1可作为一种潜在口服调节剂或佐剂，改善口蹄疫疫苗引起的免疫反应。最后，探讨了嗜酸乳杆菌是对口蹄疫DNA疫苗的免疫增强作用。以BALB/c小鼠为实验动物，通过检测特异性抗体反应、T细胞增殖以及细胞因子分泌等指标，观察了嗜酸乳杆菌SW1株对DNA疫苗（pRC/CMV-vp1）免疫反应的影响。实验结果表明，嗜酸乳杆菌SW1株能增强口蹄疫病毒特异性免疫反应。与对照组相比，嗜酸乳杆菌SW1株明显的增强了pRC/CMV-vp1引起的口蹄疫病毒特异性抗体滴度。T细胞增殖实验表明，口服嗜酸乳杆菌SW1小鼠的脾脏细胞，经ConA和146S刺激后，细胞增殖的刺激指数值明显高于对照组。此外，实验还发现，受特异性抗原刺激后，口服嗜酸乳杆菌SW1小鼠脾脏细胞产生的IFN-γ浓度以及脾脏淋巴细胞中IFN-γ分泌性细胞数量明显增加，提示IFN-γ在嗜酸乳杆菌SW1对pRC/CMV-vp1的佐剂效应中，可能起着重要的作用。实验结果表明，嗜酸乳杆菌SW1株是口蹄疫DNA疫苗极具潜力的候选口服免疫增强剂。
【作者】苏君鸿；
【导师】才学鹏；
【作者基本信息】中国农业科学院，预防兽医学，2014，博士
【关键词】乳酸菌；免疫调节；免疫增强剂；口蹄疫；疫苗；

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