植物开花基因FT的遗传转化及其参与开花调控的研究
【摘要】植物营养生长到生殖生长的转化是植物生命过程中重要的一环。小麦开花、结实的特性不仅影响到植株的世代交替,而且与产量性状密切相关,对国家的粮食安全具有重要影响。麦类作物开花基因的功能研究及利用,对于调节小麦花期、培育适应性更好的品种具有重要意义。目前,控制麦类植物开花的几个主要基因位点已被克隆,其中包括FloweringLocusT(FT),FT与春化基因VRN3实际为同一基因。为了更好地理解麦类作物开花的分子机制,我们利用转基因后代及EMS诱变突变体,研究了小麦、短柄草和大麦FT基因的功能,分析了FT基因的异常表达对相关基因的表达和植株发育的影响,确定了FT基因表达的水平与麦类植物开花时间和成熟早晚的关系。本项研究的主要结果如下:1.从数据库中鉴定出19个大麦和19个短柄草的FT家族成员,根据蛋白序列分析将其分为四类:FT-likeI、FT-likeII、MFT-like和TFL-like。利用已知FT蛋白序列在GenBank中检索其它物种的同源序列,在152种已测序物种中,发现26种单子叶植物中有12个物种携带FT基因;112个双子叶植物种中有44个物种携带FT基因;9种裸子植物中有3个物种携带FT基因;4种藻类植物以及1种苔藓植物中未检索到FT基因。2.利用基因枪轰击法转化小麦和农杆菌介导法转化短柄草,均获得FT转基因植株。FT基因过量表达导致植物过早开花,转基因植株在培养基上的再生阶段就能开花;FTRNAi转基因小麦植株花期推后,极端情况出现不抽穗现象,植株生长10个月后死亡。短柄草FT基因的转化效果和小麦一致,FT过量表达引起组培阶段的异常开花,FT基因沉默导致转基因植株不抽穗直至死亡。以上结果表明FT基因在开花中具有决定性作用。3.FT基因沉默影响其他有关开花基因的表达。FT基因的沉默引起光自主途径中GI、CO和SOC1基因的表达上调,开花抑制因子VRN2和VRT2基因的表达增加,与FT基因互作的FDL2基因表达上调。而春化基因VRN1表达量下调。FT基因受上游CO基因调控,与FDL2互作调控VRN1表达。FT2基因表达受到FT基因直接或间接调控。4.筛选大麦突变体库,检测到HvVRN1基因的5个突变体,其中2个发生蛋白编码终止突变。筛选到HvFT基因的6个突变体,其中2个突变体的单个氨基酸改变。筛选到HvFT2基因的5个同义突变体。5.麦类开花途径中FT基因直接促进开花;VRN1基因通过抑制VRN2基因促进开花。
【作者】吕波;
【导师】付道林;
【作者基本信息】山东农业大学,作物遗传育种,2014,博士
【关键词】小麦;遗传转化;荧光定量;基因沉默;FT;FT2;VRN1;
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