临床常用蛋白类检验项目检测方法可比性与参考物质互通性研究

【摘要】目的研究常用蛋白类检验项目主要检验方法检测结果的可比性,为我国相关检验项目标准化和实验室检测的有效临床应用提供科学依据；研究常用蛋白类检验项目可能参考物质的互通性,为我国相关检验项目室间质评计划、标准化计划等遴选可能的参考物质。方法将在两医院检验科收集的病人剩余血血清盘(含50或75个样本)和相应的可能参考物质分成5-9份,将可能参考物质随机插入血清盘中,统一标签后分发。根据不同的项目,每个样本检测2次或3次。涉及可能的参考物质包括：(1)新鲜冰冻混合人血清(HSP),由人剩余血清汇集而成。(2)国际标准物质,制作方法按照说明书。(3)室间质评物,按照室间质评计划的使用方法制备。(4)纯化物质,购自清华长三角有限公司,提取自人的组织液。(5)动物血清,来自屠宰场和模型动物实验室。(6)人胸水,由检验科直接收集。本研究包括的检验项目共22项,分别是：IgA、IgG、IgM、C3、C4、PA、β2M、CystatinC、RF、ASO、TRF、CRP/HsCRP、cTnI、CK-MB、MYO、TSH、PSA、AFP、CEA、CA125、CA153和CA199;涉及的检验方法共27种,分别是：进口A1-A4、进口B1-B3、C1、C2、D1-D3、E、F、G,H、I、J、国产A1、A2、B、C、D、E、F、G和H。对某一具体项目,剔除不完整结果和离群值后进行统计分析：(1)相关性与可比性分析,根据两两比较的最小二乘法得到平均值剩余标准差(Sy.x)。将某方法与其他方法的2倍Sy.x与血清盘中位值的平均百分比(R)与生物学变异度导出的最低允许总误差(mTEa)相比较作为判断依据,同时参照散点图,按项目将方法间相关性分为好、中、差。若多数方法R小于mTEa,则认为方法间的相关性好,剔除少数R>mTEa的方法后进行相关性分析；若多数方法R略大于mTEa,则认为方法间的相关性一般,则剔除R值异常大的方法；若多数方法R远大于mTEa,则认为方法间的相关性差,仅对R值较小的方法进行相关性分析；对以上进入相关性分析的方法,考察其可比性。以各方法2倍均值的CV与mTEa相比较,如果前者小于后者,则认为方法间具有可比性。(2)互通性：采用C53的方案,对浓度范围窄的项目(IgA、IgG、C3、C4、PA和TRF),直接进行可能参考物质互通性评价；对浓度范围宽的项目(IgM、p2M、CystatinC、RF、ASO、CRP/HsCRP、cTnl、CK-MB、MYO、TSH、PSA、AFP、CEA、CA125、CA153和CA199),log转化后进行互通性评价。结果1.相关性和可比性依照相关性同时参照散点图,可将所有项目分成3类。第1类,多数方法间相关性好(R小于mTEa),包括11项,即：IgA、IgG、IgM、C3、C4、PA、β2M、CystatinC、TRF、CRP/HsCRP和MYO,其中IgA、IgM、PA、CRP/HsCRP等4项结果方法之间具有可比性,其余7项某一(些)方法存在系统误差,结果不可比。第2类,多数方法的相关性一般(R略大于mTEa),包括9项,即：ASO、cTnI、CK-MB、TSH、PSA、AFP、CEA、CA125和CA153,其中CK-MB和PSA结果方法之间具有可比性,其余7项方法之间结果不可比。第3类,多数方法间相关性差(R远大于mTEa),包括2项,即：RF和CA199。RF涉及的进口B2、进口D3和国产D之间相关性好,方法间结果不可比；而CA199涉及的进口B4、进口D2、进口E、国产A1之间相关性好,结果可比。2.参考物质互通性在评估的22个项目中,新鲜冰冻混合人血清(HSP)方法间几乎全有互通性；欧洲标准物质ERM470k、471和474包含的IgA,IgG,IgM,C4,PA,TRF,CRP和CystatinC所有方法间全有互通性,但在C3仅部分组合有互通性；SRM2921(cTnI)仅部分组合有互通性；采用生理盐水和牛血清白蛋白稀释的国际标物NIBSC81/565(TSH)全有互通性,但是采用人血清和猪血清稀释时,互通性不足；采用生理盐水,牛血清白蛋白稀释的国际标物NIBSC96/670(PSA)互通性不足。EQA物质包含的IgM,PA,β2M,TRF,CRP,MYO,TSH,AFP,CEA和CA153全具有互通性,其余项目仅部分互通或全不互通。人血清稀释长三角物质在PA,β2M,CA125有互通性,在PSA部分有互通性。猪血清(包括心肌梗死猪和屠宰猪)包含的IgG,IgM,cTnI,CK-MB和MYO方法间不具有互通性,而IgA,C3,C4和PA所有检测试剂对其均无反应性。大鼠血清包含的cTnI,MYO仅少部分组合有互通性,对CK-MB无反应性。采用猪血清稀释的人高值血清包含的β2M和RF有互通性,而PA,CystatinC,CRP/HsCRP,TSH,PSA和CA125部分组合具有互通性。人血清或猪血清稀释的人CA125高值胸水具有互通性。结论蛋白类检验项目不同检验方法结果可比性依检验项目而异,部分检验项目主要检验方法结果无明显差异,部分项目检验方法存在明显校准偏倚,另有部分项目检验方法存在特异性问题；不同类型参考物质表现不同互通性,新鲜冰冻混合人血清对各检验项目和各检验方法表现良好互通性。各种制备物和动物血清在不同程度上缺乏互通性。针对不同的情况选择适宜参考物质,建立适宜检验质量监测和改进机制,将是蛋白类检验项目标准化下一步工作任务。
【作者】张顺利；
【导师】陈文祥；
【作者基本信息】北京协和医学院，临床检验诊断学，2014，博士
【关键词】血清蛋白类；常用检验方法；方法对比；参考物质；互通性；

【参考文献】
[1]姜付仁.以流域为单元的可持续发展理论研究——以海河流域为例[D].中国水利水电科学研究院,2001.
[2]张莉立.电子制造企业供应商的选择评价体系研究[D].浙江大学,管理科学与工程,2013,硕士.
[3]王寅.慢性阻塞性肺疾病患者功能残气量与通气功能参数之间的关系[D].复旦大学,内科学,2013,博士.
[4]崔喜贵.中油吉化“厂办集体”企业改革发展战略探索[D].吉林大学,高级管理人员工商管理,2012,硕士.
[5]殷宗华.中美印地缘政治博弈与中国的战略选择[D].南京师范大学,国际政治,2012,硕士.
[6]甘迎.论我国工业废弃物循环利用制度[D].广西师范大学,法学理论,2013,硕士.
[7]刘超.潍坊银行信贷业务拓展研究[D].兰州商学院,金融学,2014,硕士.
[8]张宁.3G时代：手机媒体对受众媒介接近权实现的突破[D].辽宁大学,新闻学,2012,硕士.
[9]徐闵.贯通供电系统中的多电平三相—单相交直交变换器设计[D].西南交通大学,电力系统及其自动化,2013,硕士.
[10]韩铁权.使用双室平衡容器的汽鼓水位检测[J].冶金自动化,1983,01:53-55.
[11]胡亮,车喜龙.基于Nu-支持向量回归的网格资源监控与预测系统(英文)[J].自动化学报,2010,01:139-146.
[12]周琪琪.苏州古典园林简介的归化与异化翻译[D].苏州大学,翻译（专业学位）,2014,硕士.
[13]翟飞.MMP-2及IL-6在大鼠肝内胆管癌模型中表达的研究[D].川北医学院,外科学,2014,硕士.
[14]宋睿.砷胁迫下硫对土壤—水稻中砷迁移的影响及其机制研究[D].河南农业大学,作物栽培学与耕作学,2014,博士.
[15]王宁.双频与宽带圆极化天线研究[D].西南交通大学,电磁场与微波技术,2014,硕士.
[16]徐丽萍.“不稳定家庭子女”学校适应问题研究[D].华东师范大学,教育管理,2012,硕士.
[17]王玮.内蒙古大众健身操与蒙古族文化元素的融合研究[D].内蒙古师范大学,体育（专业学位）,2013,硕士.
[18]张勇.基于特征检测入侵检测系统的研究与改进[D].华东师范大学,系统分析与集成,2002,硕士.
[19]陆凯.中国政府治理机制演变及其对经济增长的影响分析[D].南京大学,理论经济学,2012,博士.
[20]许蕾.移动梦网SP客服自服务系统[D].山东大学,软件工程（专业学位）,2013,硕士.
[21]刘慧婷.EMD方法的研究与应用[D].安徽大学,计算机应用技术,2004,硕士.
[22]孙如喜.资产评估偏差的实证研究[D].河北农业大学,农业经济管理,2004,硕士.
[23]张鑫.林蛙皮多肽提取工艺的建立及其对HaCaT细胞作用的研究[D].吉林大学,生物工程,2014,硕士.
[24]李阳.文园狮子林与苏州狮子林的对比研究[D].北京林业大学,城市规划与设计,2013,硕士.
[25]胡公才.井下炸药库抗冲击波活门和密闭门的设计和应用[J].煤炭科学技术.1991(04)
[26]谢恒.城市商业银行价值创造能力差异性研究[D].兰州大学,金融学,2013,硕士.
[27]张欣欣.修理工休假且带有温贮备部件可修系统的可靠性分析[D].燕山大学,概率论与数理统计,2013,硕士.
[28]王冬青.软脂酸诱导血管内皮细胞Toll样受体4表达[D].山西医科大学,老年医学,2013,硕士.
[29]穆森.马克思恩格斯可持续发展思想及其对我国经济建设的启示[D].渤海大学,马克思主义基本原理,2013,硕士.
[30]万莹.运用计划行为理论分析高血压患者遵医服药行为的影响因素[D].华中科技大学,流行病与卫生统计学,2013,硕士.
[31]代勤.基于运动模型的模糊图像复原技术研究[D].中国科学院研究生院（长春光学精密机械与物理研究所）,光学工程,2012,硕士.
[32]马咪咪.基于用户测试的启发式评估研究[D].山东大学,设计艺术学,2013,硕士.
[33]王治清.矿产资源税费法律制度研究[D].山西财经大学,经济法学,2014,硕士.
[34]姚雪莲.银仙通肺宝颗粒的药学及药效学研究[D].湖北中医学院,中药学,2004,硕士.
[35]范锐展.河北一平调方言声调问题研究[D].河北师范大学,汉语言文字学,2013,硕士.
[36]申成凯.白介素-1β基因多态性与晚期膝骨性关节炎易感性的关联性研究[D].青岛大学,外科学,2013,硕士.
[37]郑丽芳.三维超声图像分割方法的研究与实现[D].华南理工大学,电子与通信工程,2012,硕士.
[38]张全发.对质量管理小组活动的几点思考和意见[J].铁道通信信号.2003(11)
[39]亢建忠.山西仁景医院知识型员工的工作满意度对其离职的影响研究[D].宁夏大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[40]李春慧.SiC陶瓷非球面器件磨削轨迹的研究[D].哈尔滨工业大学,机械工程,2013,硕士.
[41]朱秋影,刘洪林,吴清岭,李艳玲,张学娟.K-L变换在AVO交会图分析中的应用[J].石油地球物理勘探,2006,03:295-298+302+362+16.
[42]滕光耀.卫星导航系统中LDPC码的研究[D].哈尔滨工业大学,信息与通信工程,2013,硕士.
[43]于树玲.β—环糊精聚轮烷的合成、药物负载及抗肿瘤研究[D].南京大学,2013.
[44]杨柳.T公司商用车转向器国产化供应商开发流程研究[D].吉林大学,工商管理,2012,硕士.
[45]高晓琳.网络书签服务系统与Web挖掘技术应用[D].大连理工大学,2002.
[46]崔杰,刘思峰,曾波,谢乃明.灰色Verhulst预测模型的数乘特性[J].控制与决策,2013,04:605-608.
[47]吴富英.新型有机液体储氢剂乙基咔唑的加氢催化剂研究[D].浙江大学,工业催化,2014,硕士.
[48]刘德武.物探在河北团榆树金矿找矿中的应用[D].石家庄经济学院,矿产普查与勘探,2012,硕士.
[49]杨启乐.当代中国生态文明建设中政府生态环境治理研究[D].华东师范大学,政治学,2014,博士.
[50]王淑红.淋巴细胞主动免疫治疗URSA的免疫效应机制研究[D].广州中医药大学,临床检验诊断学（专业学位）,2013,硕士.