食管鳞癌及癌前病变分子分型标志物研究

【摘要】有效的分子标志物或组合是辅助临床肿瘤分型、指导精确诊断和合理治疗乃至预防的重要手段之一。本研究利用免疫组织化学技术对可能在食管鳞癌发生发展过程中存在异常改变的蛋白进行检测,旨在鉴定可能用于食管鳞癌患者预后判断、早期检测及癌前预警的蛋白标志物。我们的初步候选蛋白包括本实验室前期工作中通过比较基因组杂交(array-CGH)和比较蛋白组学分析筛选出的食管鳞癌组织中发生高频率扩增的基因编码蛋白和发生异常表达改变的蛋白及其所涉及相关信号通路的关键节点分子。我们首先在小样本食管鳞癌及其配对的手术切端形态学正常的组织中筛选了226个蛋白的表达情况,初步鉴定出12个在食管鳞癌组织中显著高表达、而在手术切端组织中不表达或极低表达的候选蛋白,并进一步在独立样本中进行了扩大验证。结果发现,P53、EGFR、P13K-p85α及ANO1等在手术切端正常组织中的阳性率分别为2.9%(11/382)、3.5%(13/372)、1.4%(5/368)及0%(0/401),而在肿瘤中的阳性率分别为43.0%(232/539)、36.6%(185/506)、57.1%(303/531)及26.5%(140/529)。当P53、EGFR、P13K-p85α及ANO1等九蛋白中任意2个阳性时,对Ⅰ期食管鳞癌的检测阳性率可达90%以上,较单个蛋白的检测敏感性有较大的提高,且特异性为100%,有可能作为食管鳞癌早期检测的蛋白标志物组合。Kaplan-Meier总体生存分析结果显示,ANO1(P=0.00007)、PI3K-p85a(P=0.00111)、P53(P=0.00426)、EGFR(P=0.00001)、PTP1B(P=0.00617)、P62(P=0.024)及SKP2(P=0.027)蛋白阳性表达的患者,术后生存期较短。多因素Cox回归分析提示ANO1(P=0.0003)、P53(P=0.021)、PI3K-p85a(P=0.00002)、EGFR(P=0.00003)、PTP1B(P=0.005)和P62(P=0.014)与淋巴结转移是食管鳞癌根治术患者的独立预后因子。ANO1/PI3K-p85α/EGFR/PTP1B/P62/pN六指标组合中任意3个阳性时,患者术后生存可以被显著区分为高危组与低危组(P=0.0000000004),提示可能作为食管鳞癌预后判断的蛋白标志物组合。我们进一步在食管鳞癌高发现场2005-2007年内镜普查的队列人群活检组织中检测了上述候选蛋白的表达状况,发现P53、EGFR、SKP2、CHK2、PTP1B、ANO1六个蛋白检测癌前病变组织的阳性率和特异性均较高。结合此队列5-7年后的内镜复查结果,发现ANO1蛋白的阳性表达在食管癌前病变病程进展组比无进展组显著较强(P=0.0000001)。利用独立样本验证分析ANO1蛋白阳性表达与食管癌前病变癌变风险的相关性,发现其在独立样本癌前病变进展组的阳性表达也显著高于无进展组(P=0.004),提示ANO1蛋白联合内镜筛查可能作为高发现场无症状人群潜在的癌前预警蛋白标志物。以上结果表明,本研究发现的蛋白标志物对于食管癌的预后判断、早期发现以及癌前病变预警具有潜在的临床应用前景,有待通过大样本和多中心进行验证。
【作者】商利；
【导师】王明荣；
【作者基本信息】北京协和医学院，细胞生物学，2014，博士
【关键词】食管鳞癌；分子标志物；预后判断；早期诊断；癌前预警；

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