1、卵巢低级别、高级别浆液性腺癌分子标志物的研究2、40岁以下子宫内膜癌保留卵巢临床分析

【摘要】第一部分：卵巢低级别、高级别浆液性腺癌分子标志物研究背景卵巢浆液性腺癌(OSC)是卵巢上皮癌中最常见的组织学类型。2004年,Malpica等首先提出了OSC的两级分级系统,将OSC分为低级别浆液性腺癌(LGSC)和高级别浆液性腺癌(HGSC).研究发现LGSC和HGSC不仅组织学特征不同,在细胞起源、肿瘤发生演进过程、临床特征(尤其对化疗药物的敏感性及预后)等方面存在显著差异。因此,通过两级分级系统进一步了解OSC的发生发展机制,寻找肿瘤特异性的蛋白质分子标志物,为肿瘤的分子靶向治疗提供理论依据迫在眉睫。目的本研究旨在分析LGSC、HGSC的临床病理特点及预后。寻找在LGSC、HGSC中特异表达的蛋白,并在临床样本中进行验证,为卵巢浆液性腺癌的个体化治疗寻找新的靶点。方法由病理科医师对前期工作中原代培养的6例卵巢癌及挑选的OSC患者的病理切片进行复阅,按照MDACC的两级分级系统进行分级；继而采用DAVID和RSoftware软件对本实验室前期构建的卵巢癌相关分泌/释放蛋白质组进行GO富集和network分析；挑选出在LGSC和HGSC中特异表达的蛋白；采用双抗体夹心ELISA技术检测候选蛋白在265例卵巢浆液性腺癌患者和102例健康女性体检者血浆中的水平；采用IHC方法在不同卵巢肿瘤组织中检测候选蛋白的表达水平。此外,本研究对前期工作中鉴定出的NID1蛋白扩大样本量进行验证,分析NIDl在卵巢浆液性腺癌中的诊断及临床意义。结果：(1).本研究回顾性分析了271例明确两级分级的OSC患者的临床病例资料,分为低级别组(n=38,占12.7%)和高级别组(n=233,占87.3%)。低级别组和高级组在肿瘤家族史、术前CA125水平、手术病理分期、有无淋巴结转移、术前新辅助化疗、淋巴结切除及术后治疗情况等方面,均无显著差异(P>0.05)。两组中对铂类耐药的患者所占比例比较,无显著差异(P=0.280)。低级别组年龄≤50岁的患者所占比例较高级别组高,差异有统计学意义(P=0.027)。与传统WHO分级相比,低级别组中以高中分化(57.1%)为主,而高级别组中以中低分化(98.6%)为主。全组中位随诊时间为26.9个月(2.4～79.9个月),失访率为4.1%。预后单因素分析显示两级分级系统对全组患者OS有显著影响(P=0.034),对PFS无影响(P=0.225)。多因素分析显示两级分级系统并非为卵巢浆液性癌的独立预后因素。(2).通过生物信息分析,我们从数据库中挑选了β-catenin和Grb2两个蛋白,采用ELISA技术检测了其在OSC患者及健康女性血浆中的水平。研究发现,P-catenin和Grb2蛋白在OSC患者血浆中的水平显著低于健康体检者(P<0.001)；进一步分析显示,外周血中β-catenin和Grb2蛋白水平与OSC患者的发病年龄、术后残存肿瘤大小、FIGO分期、组织学分级(WHO)、两级分级系统、淋巴结转移个数、对铂类药物的敏感性及预后均无关(P>0.05),仅Grb2蛋白水平在行新辅助化疗的患者中显著高于直接手术者。(3).本研究采用IHC方法检测了p53、β-catenin和Grb2蛋白在不同卵巢肿瘤组织中的表达,特别是在OSC组织中的表达情况。研究发现,p53、Grb2蛋白在HGSC、LGSC中表达水平不同：在LGSC中,p53蛋白阳性表达率低,多为散在强阳性分布,Grb2蛋白呈高表达；在HGSC中,p53蛋白阳性表达率高,多为弥漫性强阳性分布,Grb2蛋白呈低表达；β-catenin蛋白与两级分级系统无关,β-catenin蛋白表达阳性者较表达阴性者预后好；p53、β-catenin口Grb2蛋白在OSC组织中的表达水平与发病年龄、有无肿瘤家族史、是否行新辅助化疗、术后残存肿瘤大小、FIGO分期及组织学分级(WHO)均无关(P>0.05)。(4).本研究发现,NID1蛋白在OSC患者血浆中较健康人群显著升高,尤其在晚期(Ⅲ/Ⅳ)及术前行新辅助化疗的OSC患者中显著升高(P<0.05);NID1蛋白水平与OSC患者术后残存肿瘤大小、组织学分级(WHO)、两级分级系统及化疗敏感性均无关(P<0.05)；采用ROC曲线下面积评估NID1的检验效能,结果显示,NID1可以区分OSC患者与健康人群(AUC0.65,95%CI0.59～0.71),但不能用于早期诊断(AUC0.65,95%CI,0.41～0.54),其并不优于CA125。结论(1).与HGSC相比,LGSC发病率低,发病年龄较年轻,预后较好。两级分级系统并非为卵巢浆液性癌的独立预后因素。(2).β-catenin和Grb2不适合作为卵巢浆液性腺癌的血清标志物。(3).在卵巢浆液性腺癌组织中,P53、Grb2蛋白在LGSC和HGSC组织中表达水平不同,β-catenin蛋白与两级分级系统无关,β-catenin蛋白表达阳性者较表达阴性者预后好。(4).NID1可能作为辅助诊断卵巢浆液性腺癌的分子标志物,可能用于监测肿瘤负荷。第二部分：40岁以下子宫内膜癌保留卵巢临床分析背景：近几年,随着子宫内膜癌发病率的增加,年轻患者的患病率呈上升趋势。子宫内膜癌的的主要术式为子宫双附件切除,对年轻的患者切除卵巢将严重影响其生活质量,增加总体的病死率。因此,如何在不增加年轻早期子宫内膜癌患者死亡风险的前提下,尽可能地保留患者的卵巢功能,提高患者生活质量,成为研究的热点问题。目的：本研究旨在分析40岁以下子宫内膜癌的临床特点及预后,探讨其合并卵巢恶性肿瘤的影响因素及Ⅰ期患者保留卵巢功能的安全性。方法：回顾性分析中国医学科学院肿瘤医院1999年1月至2012年1月收治的140例年龄≤40岁的子宫内膜癌患者的临床病理资料。纳入75例Ⅰ期患者,根据术中是否保留卵巢分为保留卵巢组(20例)及切除卵巢组(55例),比较分析两组的临床病理特征及预后。结果：(1).140例患者占同期收治的子宫内膜癌患者的7.9%；早期(Ⅰ-Ⅱ期)患者占73.6%,高、中分化患者所占比例为82.9%,88.6%患者为子宫内膜样腺癌。全组5年总生存率及无瘤生存率分别为90.3%、84.8%,多因素分析显示是否合并卵巢恶性肿瘤对年轻子宫内膜癌患者总生存率和无瘤生存率均产生显著影响(P<0.05)。本研究组合并卵巢恶性肿瘤者26例,占全组的18.6%,多因素分析显示合并卵巢恶性肿瘤的独立危险因素按危险强度排列依次为宫旁侵润、CA125水平、手术病理分期及年龄。(2).75例患者中,保留卵巢组13例保留双侧卵巢、7例保留单侧卵巢。保留卵巢组与切除卵巢组在在发病年龄、体质指数、手术病理分期、病理类型、病理分级、腹水或腹腔冲洗液细胞学结果及术后治疗方式等方面比较,差异均无统计学意义(P>0.05)；而术前血CA125水平升高保留卵巢组有5例(25%,5/20),切除卵巢组为10例(18%,10/55),两组比较,差异有统计学意义(P=0.029)。切除卵巢组行盆腔淋巴结切除或活检术的比例显著高于保留卵巢组[分别为35%(7/20)、84%(46/55)],两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。75例患者的中位随诊时间31.7个月(0～160个月),共有2例患者复发。保留卵巢组及切除卵巢组5年总生存率(分别为100%、100%)和5年无瘤生存率(分别为90.0%、95.5%)比较,差异无统计学意义(P=0.579)。结论：年轻子宫内膜癌患者多为早期,病理类型多为子宫内膜样腺癌,预后较好,但合并卵巢恶性肿瘤者预后差。保留卵巢对年轻Ia期、分化好的子宫内膜样腺癌患者的生存无显著影响,需除外合并卵巢恶性肿瘤的风险。对此类患者保留卵巢功能的安全性仍需大规模前瞻性临床研究进一步证实。
【作者】李林；
【导师】吴令英；
【作者基本信息】北京协和医学院，肿瘤学（专业学位），2014，博士
【关键词】卵巢浆液性腺癌；两级分级；P53；Grb2；β-catenin；NID1；子宫内膜肿瘤；卵巢；妇科外科手术；预后；发病年龄；保留生育能力；

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