α-MSH对糖尿病视网膜血管内皮细胞保护作用的机制研究

【摘要】目的：氧化应激和细胞凋亡贯穿于早期糖尿病视网膜病变中。本研究的目的是检测α促黑素细胞激素(α-MSH)在早期糖尿病视网膜病变中对视网膜血管内皮细胞的抗氧化应激和抗凋亡作用及其机制的探索。方法：SD大鼠尾静脉注射链脲佐菌素诱发糖尿病,然后玻璃体腔注射α-MSH进行治疗。在糖尿病第5周,取出视网膜进行基因表达和活性氧簇分析。再1周后,取眼杯进行透射电子显微镜扫描和末端脱氧核苷酸转移酶dUTP缺口末端标记染色。体外实验中视网膜血管内皮细胞进行高糖处理,用或不用α-MSH进行干预。通过实时定量PCR检测O类叉头框蛋白(FoxOs)的表达。在内皮细胞中经瞬时转染过表达FoxO4基因,再经α-MSH和／或高糖处理,然后用CM-H2DCFDA和Annexin-V分别对氧化应激和细胞凋亡的水平进行分析。结果：在糖尿病大鼠的视网膜中,α-MSH治疗可以正常化NO2-/NO3-和H202的水平。糖尿病大鼠组的NO2-/NO3水平显著增高,而糖尿病α-MSH治疗组可以将NO2-/NO3水平正常化趋于正常水平(α-MSH治疗组与正常组相比,p=0.324)。糖尿病大鼠的H2O2显著增高,而糖尿病治疗组可以显著降低H2O2,使其降低到正常水平(α-MSH治疗组与正常组相比,p=0.949)。α-MSH可以大幅地减少糖尿病视网膜血管内皮细胞和神经细胞的凋亡细胞数.(α-MSH治疗组与DM组相比,P<0.001)。α-MSH有效地改善超微结构的病理损伤。实时定量PCR结果显示在糖尿病视网膜中,(NOS表达下调,iNOS,ICAM-1和TNF-α的表达上调,而这些基因表达的异常可以被α-MSH校正(α-MSH治疗组与DM组相比,P<0.1)。在糖尿病视网膜中检测到FOXO4的表达上调,α-MSH糖尿病视网膜玻璃体腔注射组FOXO4的表达上调受到抑制,接近于正常水平(DM组与α-MSH+DM组相比,P<0.05α-MSH+DM组与Normal组相比,P=0.03)。在体外实验暴露于高糖的内皮细胞中,α-MSH可以抑制FOXO4的上调。在视网膜血管内皮细胞过量表达FOXO4基因,α-MSH失去其抗氧化应激和抗凋亡的能力,证明α-MSH是通过抑制FOXO4基因的上调来实现其抗氧化应激及抗凋亡的机制的。结论：在早期糖尿病视网膜.α-MSH能正常化氧化应激水平,减少视网膜血管内皮细胞及神经细胞的凋亡,有效改善糖尿病所导致的超微结构的损伤,并纠正氧化应激及炎症相关基因表达的异常。α-MSH对视网膜血管内皮细胞的保护作用可能是通过抑制高糖诱导下转录水平上FOX04上调来实现的。本研究表明,α-MSH对早期糖尿病视网膜病变是一种有效的干预方法,并提出了一种涉及FOX04新型调节机制。
【作者】张丽娟；
【导师】李筱荣；
【作者基本信息】天津医科大学，眼科学，2014，博士
【关键词】糖尿病性视网膜病变；α-促黑素细胞激素；氧化应激；凋亡；

【参考文献】
[1]庞淑英,鲁明羽,陆玉昌.利用判定树归纳与面向属性归纳的组合方法对建筑业中施工企业的特征提取[J].计算机工程与应用,2003,16:208-211.
[2]施军华.全数字医用B超系统的研制[D].南京航空航天大学,通信与信息系统,2004,硕士.
[3]董旭.超支化聚合物的合成、功能化研究及应用[D].青岛科技大学,材料加工工程,2012,硕士.
[4]欧可升,郑津洋,花争立,毛宗强.国际氢安全领域研究热点及最新进展——记第五届国际氢安全会议(ICHS2013)[J].中外能源,2014,01:34-38.
[5]刘颖.论无痕语文教学之“痕”[D].湖南师范大学,教育（专业学位）,2013,硕士.
[6]叶莹.论假想防卫过当[D].吉林大学,法律,2013,硕士.
[7]于江,王欢.中信控股之战决胜于起点[J].数字财富,2005,01:25-31.
[8]袁川川.湘西南武冈浪石铺古村落研究[D].苏州大学,艺术设计（专业学位）,2014,硕士.
[9]张颖.铝镍合金镀层及其微弧氧化膜的性能研究[D].燕山大学,化学工程,2014,硕士.
[10]杨艳东.理工科院校人文社科专业建设中的问题与思考——以公共事业管理专业为例[J].高等理科教育,2013,01:85-90+97.
[11]范传恒.基于ZigBee技术的室内定位系统研究[D].青岛大学,控制科学与工程,2013,硕士.
[12]马江宏.急性STEMI患者急诊PCI围术期发生心衰的影响因素的分析[D].吉林大学,临床医学,2014,硕士.
[13]李飞鹏.基于信息及行为传播的社交网络拓扑模型[D].吉林大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[14]熊翥.一条好的地震偏移剖面从何而来[J].石油地球物理勘探,1993,01:112-119+126.
[15]陈路.事业单位编制外用工管理对策研究[D].宁波大学,行政管理（专业学位）,2013,硕士.
[16]宋延杰,刘宪伟,张庆国.碳氧比能谱测井曲线的质量评价[J].石油地球物理勘探,2004,02:191-197+123-248.
[17]蒋天颖,吴福象.基于网络嵌入的高新技术集群企业知识创新研究[J].情报杂志,2013,04:202-207.
[18]宋薇.大规模风电场超短期风电功率预测的误差分析与评价[D].东北电力大学,电气工程,2013,硕士.
[19]王珂玮.C_3N_4基复合光催化剂的制备和性质研究[D].河北工业大学,2014.
[20]彭海峰.测绘仪器计量检测数据处理方法研究与信息管理系统研制[D].西南交通大学,大地测量学与测量工程,2014,硕士.
[21]白波.荧光定量PCR检测白血病WT1基因表达及其临床意义[D].山西医科大学,血液学,2003,硕士.
[22]戚芬强.Pt纳米线选择性催化合成仲胺类化合物[D].苏州大学,应用化学,2013,硕士.
[23]朱囡囡.徐州市休闲农业形象整合营销传播研究[D].山西财经大学,旅游管理,2013,硕士.
[24]汪禹喆,雷英杰,周林,李润玲.直觉模糊离散粒子群算法[J].控制与决策,2012,11:1735-1739.
[25]杨志强.舞蹈教育对孤儿教育的价值及实践研究[D].湖南师范大学,音乐学,2013,硕士.
[26]徐颖.15-PGDH、COX-2及β-catenin与大肠癌发生发展的关系[D].遵义医学院,消化内科,2014,硕士.
[27]陆东梅,杨瑞霞,孙信华,吴华,郝建民.石墨烯的SiC外延生长及应用[J].半导体技术,2012,09:665-669.
[28]陈琦颖.叶尔达钢琴组曲《安代主题变奏曲》的演奏技法研究[D].内蒙古师范大学,音乐学,2013,硕士.
[29]张琳.“健康城市”视角下大型体育建筑的综合化发展研究[D].长安大学,建筑设计及其理论,2014,硕士.
[30]丛胜男.我国境外影视作品版权保护制度研究[D].大连海事大学,民商法,2012,硕士.
[31]王桂红.被动式电磁阻尼器的理论与实验研究[D].浙江大学,化工过程机械,2004,硕士.
[32]霍旭阳.训练强度监测技术中运动速度和角度识别方法的研究[D].第四军医大学,生物医学工程,2004,硕士.
[33]胡春平,毛保华,朱宇婷,甘恬甜,张政.一种交通枢纽流线优化设计的方法[J].交通运输系统工程与信息,2014,02:158-161.
[34]冯舒军.MESH网络SIP协议改进方法研究[D].湖南大学,计算机科学与技术,2010,硕士.
[35]苏萍.套利定价理论的检验及在证券组合投资决策中的应用研究[D].南京气象学院,系统分析与集成,2004,硕士.
[36]希木格.《蒙古秘史》战争描写艺术[D].内蒙古大学,中国少数民族语言文学,2014,硕士.
[37]刘跃.中美高校德育教育差异性研究[D].杭州电子科技大学,思想政治教育,2012,硕士.
[38]李政.基于QoS的Web服务组合优化研究[D].燕山大学,计算机软件与理论,2014,硕士.
[39]毕英琦.自身心理学视域下奶娃的成长[D].黑龙江大学,英语语言文学,2013,硕士.
[40]刘静静.唐代江南地区佛教文化环境与诗歌创作[D].西北大学,中国古代文学,2013,硕士.
[41]张彦霞,赵永恒,崔辰州.天文学中的数据挖掘和知识发现[J].天文学进展,2002,04:312-323.
[42]郑秀明.基于绿色WLAN的AP能效管理研究[D].哈尔滨工业大学,信息与通信工程,2014,硕士.
[43]强晨.清华简与西周开国史研究[D].河北师范大学,中国古代史,2014,硕士.
[44]刘文韬.中西绘画比较研究的现状与走向[D].鲁东大学,美术学,2014,硕士.
[45]车恂.新刑事诉讼法下监视居住制度研究[D].安徽大学,诉讼法学,2014,硕士.
[46]孙晶晶.虚拟数据在人工湿地模型建立过程中的理论方法与应用研究[D].青岛理工大学,市政工程,2012,硕士.
[47]周亭.新型两亲分子/DNA复合物的制备与性能研究[D].山东大学,化学,2014,博士.
[48]张振龙.稀土氧化物Nd_2O_3对亚共晶Al-Si-Cu合金组织和性能的影响[D].吉林大学,材料加工工程,2013,硕士.
[49]杨玉英.石墨烯在电化学生物传感器领域的研究进展[J].广东化工,2014,19:87-88.
[50]王星.男子网球运动员肘关节屈伸肌群的等速测试研究[D].沈阳体育学院,体育教育训练学,2014,硕士.