基于光学比浊法和VASP磷酸化法评价STEMI患者血小板反应性的差异性分析

【摘要】研究目的：冠状动脉内血栓形成引起的急性心肌梗死(myocardialinfarction,MI)是影响全球人口健康水平的重要原因之一。血小板在血栓形成过程中扮演着重要角色。动脉粥样硬化斑块破裂引起血管内皮受损后,血小板黏附于受损的血管内皮下基质,相互聚集并促进血凝块的形成,进而引起血管的阻塞。因此,以血小板激活通路为靶点的治疗—包括血栓素A2合成、二磷酸腺苷(AdenosineDiphosphate,ADP)介导的信号通路及GPⅡb/Ⅲa信号通路在心血管疾病的治疗中起着重要作用。当前,最常用的抗血小板药物包括阿司匹林、氯吡格雷和替罗非班等。已有明确的证据证实MI患者抗血小板治疗能够显著降低病死率和心血管事件的发生率。但是,在临床上有一部分患者,尽管应用了标准的联合抗血小板治疗,仍无法有效降低心血管事件的发生,这一现象被称为血小板反应多样性(variabilityofresponse,VPR)。影响血小板反应多样性的因素很多,包括患者基线存在的危险因素,药物与药物之间相互作用,如应用质子泵抑制剂(protonpumpinhibitors,PPI),细胞色素P450系统的基因多态性等。目前常用于检测血小板功能的方法很多,包括光学比浊法(lighttransmissionaggregometry,LTA)测量ADP诱导的血小板聚集率(plateletaggregation,PAG)和通过流式细胞术测定的血小板血管舒张剂刺激磷蛋白(vasodilatorstimulatedphosphoprotein,VASP)磷酸化水平[评价指标为血小板反应指数(plateletreactivityindex.PRI)]以及血栓弹力图等,在这些方法中,LTA法和VASP磷酸化法是广泛应用的经典方法。已有研究显示,应用不同的检测方法对血小板功能的检测也存在差异性,直接导致了评价结果的差异,但其影响因素尚不明确。鉴于此,本研究以急性心肌梗死患者为研究对象,应用LTA法和VASP磷酸化法两种方法评估血小板对氯吡格雷的反应性,并分析两种方法检测的一致性及差异性,探讨影响评价结果差异的因素,为临床实践中合理判断血小板反应性提供参考。研究内容与方法：以连续入选的在中国人民武装警察部队后勤学院附属医院心脏中心接受急诊经皮冠状动脉介入治疗(percutaneouscoronaryintervention,PCI)的ST段抬高型心肌梗死(STsegmentelevatedmyocardialinfarction,STEMI)患者90例为研究对象,所有入选患者STEMI的诊断符合2013《ACC/AHA急性ST段抬高型心肌梗死管理指南》的诊断标准。记录入选患者的一般临床资料、病史及用药情况；进行各项血细胞参数、生化参数的检验。所有入选患者于入院后即刻口服阿司匹林300mg和氯吡格雷300mg,PCI术后继续接受氯吡格雷(75mg,1/日)和阿司匹林(100mg,1/日)双联抗血小板治疗。在PCI术后第6天取肘正中静脉血进行CYP2C19*2/*3基因多态性、PAG及PRI的检测。分别以LTA法和VASP磷酸化法探讨入选患者血小板对氯吡格雷的反应性,并评价两种方法检测血小板功能的一致性及评估结果出现差异的影响因素。结果：本研究共纳入符合标准的STEMI患者90例,其中男性70人,平均年龄(58.83±10.47)岁,女性20人,平均年龄(64.80±9.39)岁。1)依据LTA法测定的血小板聚集率(PAG)的中位数水平(65.5%)将入选患者分为两组：PAG-正常反应(PAG-normalresponders,PAG-NR)组,PAG<65.5%,男性39例,女性10例；PAG-低反应(PAG-lowresponders,PAG-LR)组,PAG>65.5%,男性30例,女性11例。两组患者年龄、性别、吸烟史、BMI、临床用药、病史资料、CYP2C19*2/*3基因多态性、各项血细胞参数及生化参数的检验结果比较差异无统计学意义(P>0.05)；相关性分析结果示,PAG与年龄、BMI、各项血细胞参数及生化参数的检验结果均无相关性(P>0.05)。2)依据流式细胞术测定的VASP磷酸化水平即血小板反应指数PRI的中位数水平(41.85%)分成2组：PRI-正常反应(PRI-normalresponders,PRI-NR)组,PRI<41.85%,男性34例,女性11例；PRI-低反应(PRI-lowresponders,PRI-LR)组,PRI>41.85%,男性36例,女性9例。两组患者年龄、性别、吸烟史、BMI、临床用药、病史资料、CYP2C19*2/*3基因多态性、各项血细胞参数及生化参数的检验结果比较差异无统计学意义(P>0.05)；相关性分析结果示,PRI与年龄、BMI、各项血细胞参数及生化参数的检验结果均无相关性(P>0.05)。3)PAG与PRI的相关性分析结果显示,二者呈正相关(r=0.4278,P<0.0001)；PAG与PRI的Bland-Altman一致性分析结果显示,偏倚=-19.07,标准差=21.64。4)把PAG与PRI均判断为低反应组或正常反应组者定义为结果一致组,反之,PAG判断为低反应组而PRI判断为正常反应组者或PAG判断为正常反应组而PRI判断为低反应组者定义为结果不一致组,建立新的变量,探讨影响两种检测方法结果差异的因素；经单因素分析显示,BMI、白细胞计数、单核细胞计数、吸烟、高血压、脑卒中及应用ARB类药物可能影响两种检测方法结果的一致性；经Logistic多元回归分析显示,吸烟是PAG与PRI对血小板反应性结果判读不一致的独立相关因素(OR：3.333,95%CI：1.120-9.917,P=0.030),而且在经年龄、性别、高血压、糖尿病等传统心血管疾病危险因素校正后,结果仍有统计学意义(OR：4.399,95%CI：1.105-17.522,P=0.036)。结论：本研究首次探讨了STEMI患者在双联抗血小板治疗后采用LTA法和VASP磷酸化法评价患者血小板反应性不一致的潜在原因。我们的结果显示吸烟是独立的与两种方法检测结果差异相关的因素,为临床实践中合理判断血小板反应性提供了参考依据,但本研究的结果尚需在更大样本中进一步证实。
【作者】孙婧；
【导师】李玉明；
【作者基本信息】天津医科大学，内科学（专业学位），2014，博士
【关键词】心肌梗死；血小板；VASP；PAG；氯吡格雷；血小板氯吡格雷低反应性；流式细胞术；

【参考文献】
[1]黄河.银行信贷管理系统的设计与实现[D].吉林大学,软件工程,2014,硕士.
[2]李丹.科学实践理念下美国《新一代科学教育标准》（NGSS）研究[D].西南大学,比较教育学,2014,硕士.
[3]张少娜.基于均值漂移的目标跟踪算法研究[D].南京邮电大学,信号与信息处理,2013,硕士.
[4]陈锋.两型社会背景下的浏阳市新农村村庄规划研究[D].湖南大学,建筑与土木工程,2011,硕士.
[5]黄铭海.FDI规模影响我国通货膨胀的传导机制及其效应研究[D].浙江工商大学,国际贸易学,2012,硕士.
[6]杜秋红.UFST公司V系列新产品营销策略研究[D].西南交通大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[7]邱彪.倒装芯片键合机精度优化设计方法研究[D].桂林电子科技大学,机械电子工程,2014,硕士.
[8]蒲创国.“天人合一”正义[D].上海师范大学,中国哲学,2012,博士.
[9]李彦.平衡训练对体育院校网球专修学生击球稳定性的影响研究[D].沈阳体育学院,体育教育训练学,2013,硕士.
[10]崔广伟.高中生父亲教养方式、自我价值感与人际信任的关系研究[D].河北师范大学,应用心理,2013,硕士.
[11]方正.融入剧情 专注细节[D].云南艺术学院,MFA声乐,2013,硕士.
[12]李扬州.辽宁省创新型企业创新动力评价研究[D].辽宁大学,技术经济及管理,2012,硕士.
[13]吴丰.表面等离子体增强TiO_2纳米材料光催化活性及光解水制氢研究[D].西北大学,工业催化,2013,硕士.
[14]田燕歌.调补肺肾三法调控JAK/STAT信号通路治疗COPD模型大鼠的作用及远后效应机制[D].河南中医学院,中医内科学,2012,硕士.
[15]MohammadEyakubAli.有机物料在中国典型土壤中的分解特征和机制[D].中国农业科学院,土壤学,2014,博士.
[16]赵凡淞.西方马克思主义人本思想浅析[D].吉林大学,国外马克思主义研究,2013,硕士.
[17]郭婷.湘产吴茱萸药材质量研究及HPLC指纹图谱分析[D].湖南中医药大学,临床中药学,2014,硕士.
[18]张雅涵,朱万展,施咏凤,邓志新,欧阳效鹏.快速检测空调冷却水中Lp1型嗜肺军团菌实时荧光定量PCR方法的建立[J].现代预防医学.
[19]王斌云.新型煤矸石膏体巷旁支护充填材料的研制[D].济南大学,材料学,2012,硕士.
[20]原博.我国信贷资金配置效率的区域比较研究[D].浙江理工大学,区域经济学,2013,硕士.
[21]李兆亮.云南省虚拟耕地战略研究[D].云南财经大学,土地资源管理,2014,硕士.
[22]李冉.当前我国慈善事业发展的困境及对策研究[D].苏州大学,行政管理,2012,硕士.
[23]韩旭.基于网络的教师专业发展支持平台研究[D].首都师范大学,2005.
[24]陈尘.我国军队转业干部培训问题研究[D].福建师范大学,公共管理（专业学位）,2012,硕士.
[25]张跃宇,吴宇红.基于数据挖掘的WLAN告警分析[J].电子科技,2004,12:15-17+32.
[26]胡加强.从关联理论看冯小刚电影的字幕翻译[D].广东外语外贸大学,外国语言学及应用语言学,2004,硕士.
[27]杨佳.日本对非洲的政府开发援助分析[D].吉林大学,世界经济学,2013,硕士.
[28]倪海龙.林时胜:在交叉学科研究中自由驰骋[J].中国发明与专利,2013,10:114-115.
[29]杨伟龙.电力市场下自动发电控制（AGC）辅助服务的交易计划制定方法[D].华北电力大学（北京）,电力系统及其自动化,2004,硕士.
[30]范纯雄.灾难场景下无线传感器网络容错数据收集协议研究[D].杭州电子科技大学,计算机软件与理论,2011,硕士.
[31]商登莹.煤层增透与顶板弱化聚能爆破技术研究[D].中国矿业大学（北京）,安全技术及工程,2014,博士.
[32]王雅轩.Y86处理器模拟器的设计与实现[D].中国地质大学（北京）,计算机技术,2013,硕士.
[33]张杰.美国社区银行经验与中国发展路径探讨[D].中国社会科学院研究生院,金融市场与组织（专业学位）,2014,硕士.
[34]侯道娟.康德人性论探析[D].西南大学,伦理学,2013,硕士.
[35]姚军.磷酸铁锂/晶须状碳纳米管复合材料制备及其电化学性能研究[D].南昌大学,2014.
[36]谢慧玲.人民币外汇市场压力与我国货币政策相互影响的研究[D].暨南大学,金融学,2013,硕士.
[37]董全英.海南五指山国家级自然保护区附生兰科植物生态习性研究[D].华东师范大学,植物学,2013,硕士.
[38]王雾凇.对我国银行电子化建设发展的预测[J].华南金融电脑,2002,03:4-6.
[39]李东.Q币对大学生网络游戏成瘾者冲动性行为的影响[D].西南大学,应用心理学,2013,硕士.
[40]黄健旅.影响甲胎蛋白水平的候选单核苷酸多态性位点在肝癌细胞株中的验证[D].广西医科大学,外科学,2013,硕士.
[41]胡林尧.浅谈水彩风景画中色调表现的艺术魅力[D].湖南师范大学,美术（专业学位）,2013,硕士.
[42]陈晓荟.基于关联紧密度的蛋白质网络挖掘算法研究[D].华中师范大学,计算机软件与理论,2014,硕士.
[43]韩正.美国大学生非目的语环境“了”字结构习得与教学初探[D].华东师范大学,汉语国际教育（专业学位）,2013,硕士.
[44]陈洪转.我国商业银行核心竞争力评价研究[D].河海大学,2004.
[45]宋艳涛,纪则轩,孙权森.基于图像片马尔科夫随机场的脑MR图像分割算法[J].自动化学报,2014,08:1754-1763.
[46]白勇华.陆机心态—人格研究[D].福建师范大学,中国古代文学,2004,硕士.
[47]杨帆.青海河湟地区传统民居生态策略研究及在当代的运用[D].西安建筑科技大学,建筑设计及其理论,2013,硕士.
[48]张玥.由中国古琴曲改编的钢琴曲研究[D].东北师范大学,钢琴演奏与教学研究,2012,硕士.
[49]嵇天浩,马楠.冲淡石墨烯溶液[J].科技创新导报,2014,11:70.
[50]徐泽芳.基于压缩感知的宽带频谱感知的研究[D].杭州电子科技大学,通信与信息系统,2014,硕士.