舒心安神膏治疗阳虚失眠的疗效观察及机制研究

【摘要】失眠是睡眠和觉醒正常节律交替性紊乱,引起睡眠质量下降的一种身心疾病,是多种躯体、精神和行为疾病的常见临床表现,长期的失眠会引起社会功能和生活质量下降。随着生活方式的改变和生活压力的增大,失眠人群逐渐增多,2002年全球失眠流行病学调查,中国约有45.4%的人在过去一个月中经历不同程度失眠,1980-2009年,法国流行病学调查显示法国成年人中有30%-50%有失眠症状,2011年,美国失眠情况调查显示,一般人群失眠的现患率为22.1%。失眠与中医体质密切相关,偏颇体质人群阴阳不和、气血失衡,阳气夜不能及时入阴,昼不能及时出阴,引起睡眠节律紊乱而失眠,课题组国家“十一五”科技支撑计划《亚健康状态中医辨识与分类研究》对所调查的8438例体检亚健康人群进行身心健康辨识,结果显示失眠人群占16.61%,居第二位,其体质类型以阳虚质最为多见。可见,从中医体质的生理病理特征,判断失眠的病变性质和发展趋向,对于临床论治失眠具有重要的意义。目前,针对失眠的治疗手段多采用镇静催眠药、抗焦虑抑郁药和激素疗法,但服药过程当中出现的不良反应一直是该类治疗药物所面对的难点,如记忆力下降、疲倦乏力、依赖性和戒断反应等,而中医辨证论治、整体观念和辨体调治等治病理念对于失眠的调治具有独特优势,可从机体本身的自我修复调节能力和中药膏方的药物偏性来纠正身体的气血阴阳失衡,集合药物草本精华优势纠正机体内气血阴阳偏颇,膏方是调节体质状态最主要的手段,是辨病、辩证及辨体质相结合,补虚纠偏、平衡阴阳、调和气血,以协调脏腑功能为主要目的的复方方剂,也是顺应当代生物—社会—心理医学模式的发展潮流,可通过调治体质和平衡气血恢复体内阴阳气血衡态,祛除病邪,扶助正气来达到睡眠觉醒的正常生理规律。目的：1.通过临床症状特征、测评量表评估舒心安神膏治疗失眠的临床疗效,及其对该人群体质和生存质量的影响,以便向临床推扩运用。2.研究舒心安神膏急性毒性、对大鼠自发活动、镇静催眠作用及运动平衡能力的影响,客观评价舒心安神的安全性和有效性。3.通过高效液相色谱-电化学法(HPLC-TCD)研究舒心安神膏对睡眠剥夺大鼠脑组织单胺类神经递质的兴奋／抑制的影响,从神经递质含量变化研究舒心安神膏的镇静催眠作用。4.利用视频跟踪系统研究舒心安神膏不同组分对斑马鱼运动活性的影响,研究各中药成分的兴奋／抑制作用。方法：1.临床疗效观察研究：以广东省中医院内科门诊阳虚体质失眠患者作为研究对象,对受试者给予体质辨识、失眠诊断,予以舒心安神膏方治疗两个月,停药观察-个月。采用中医体质量表、匹兹堡睡眠指数量表、失眠严重指数、焦虑自评量表、抑郁自评量表和世界卫生组织生活质量评定量表对患者进行临床疗效评价,治疗前、治疗第1月、第2月及治疗结束1月时各进行评价1次。Epidata3.0数据库录入数据,采用SPSS18.0统计软件进行分析,评价患者失眠的症状改善情况、体质变化状态、治疗前后负性情绪和生活质量变化情况。2.急性毒性和药效学研究：以舒心安神膏的最大浓度和最大给药容积NIH小鼠给药,连续观察14d内NIH小鼠的不良反应及死亡状况,解剖观察小鼠主要脏器的病变情况,同时观察并记录动物有无死亡、体重、皮肤颜色、呼吸系统和神经系统症状；采用大鼠自发活动实验、戊巴比妥钠阈上剂量、阈下剂量和联合安定诱导大鼠睡眠实验,研究舒心安神膏的镇静催眠作用；采用转棒实验测定舒心安神膏对大鼠肌肉协调运动能力的影响。3.神经递质作用机制研究：通过大鼠腹腔注射对氯苯氨酸(PCPA)建立大鼠睡眠剥夺模型,高效液相色谱-电化学法(HPLC-ECD)测定睡眠剥夺后大鼠脑组织中5-羟色胺(5-HT)、5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)含量变化,研究舒心安神膏治疗失眠的神经递质作用机制。4.斑马鱼生物模式行为学研究：将斑马鱼浸泡在不同浓度安神膏和膏中各组成中药提取液的养殖水中,视频跟踪系统记录给药后斑马鱼的轨迹图、运动速度、运动长度、运动时间等,同时给予光周期刺激,观察斑马鱼的运动活性。结果：1.经舒心安神膏治疗两个月后,在第一个月末、第二个月末和停药1月复诊的总有效率分别是：32.5%,42.5%,63.5%。与干预前比较,患者失眠严重指数(ISI)第一月、第二月和停药一月后显著下降(P<0.01)；在第二月末和停药一月末焦虑、抑郁症状总分显著下降(P<0.05),与干预前比较,患者停药1月后,生理领域、心理领域总分积分显著性提高(P<0.05)；社会关系领域和环境领域未见明显变化(P>0.05)。2.舒心安神膏低、中、高剂量组均可明显减少自发活动次数；延长阈上剂量、阈下剂量戊巴比妥钠所致睡眠时间,增加阈下剂量戊巴比妥钠所致小鼠睡眠率；转棒实验中,与阳性药物安定比较,膏方组明显降低大鼠的跌落率。3.四种神经递质在9min内完全洗脱,分离效果良好,在1～1000ng·mL-1浓度范围有较好的线性关系,其相关系数不低于0.997,四种神经递质绝对回收率不低于95.56%；舒心安神膏低、中、高剂量组,大鼠脑干、大脑皮质中5-HT、5-HIAA、NE的含量显著低于模型组(P<0.05),DA含量无明显差异(P>0.05)。4.斑马鱼在光周期刺激下运动活性明显增强,具有周期规律性,幼鱼在光照条件下的10min平均活力要低于在黑暗条件下的平均运动活力。经安神膏低、中、高浓度给药后,随着舒心安神膏浓度的升高,幼鱼运动活性逐渐降低。光照条件下,低剂量舒心安神膏显著增强幼鱼运动活性(P<0.05),中、高剂量组降低斑马鱼幼鱼运动活性,但与对照组无统计学差异(P>0.05)；黑暗条件下,低剂量组与对照组无显著差异,中、高剂量组明显降低斑马鱼幼鱼的运动活性(P<0.05)在光照条件下,桂枝汤、龙骨牡蛎汤和乌梅山萸肉组斑马鱼运动活力显著高于空白对照组(P<0.05)；在黑暗条件下,四逆汤组斑马鱼运动活力显著高于空白对照组,四逆桂甘龙牡汤组和桂枝汤组斑马鱼幼鱼运动活力显著低于空白对照组(P<0.05)。在光照条件下,熟附子、砂仁、乌梅、山萸肉组斑马鱼幼鱼运动活力显著增强(P<0.05)；在黑暗条件下,干姜、砂仁组斑马鱼幼鱼运动活性显著降低,熟附子、山萸肉、乌梅组斑马鱼幼鱼运动活性明显增强(P<0.05)。结论：1.舒心安神膏疗效稳定可靠,对失眠症的疗效不仅体现在睡眠过程方面(睡眠质量、睡眠时间、入睡时间、睡眠效率等),而且能很好改善失眠症患者的生理领域、心理领域和情绪状态。2.舒心安神膏对大鼠具有镇静催眠作用,且不影响大鼠的活动能力和肌肉协调性。3.高效液相色谱-电化学法灵敏度高、重复性好,能有效分离检测大鼠脑组织中单胺类神经递质。舒心安神膏调治失眠作用可能与降低脑组织NE水平有关,通过调节5-HT、5-HIAA与NE等神经递质水平来恢复正常睡眠节律。4.安神膏中、高剂量组可明显降低幼鱼运动速度,并且不改变斑马鱼的周期规律性。随着服用舒心安神膏浓度的升高,斑马鱼幼鱼运动活性逐渐降低。在光照条件下,桂枝汤、龙骨牡蛎汤、乌梅山萸肉组、熟附子、砂仁、乌梅、山萸肉组斑马鱼幼鱼运动活力显著增强；在黑暗条件下,四逆汤组、熟附子、山萸肉、乌梅组斑马鱼运动活力显著升高,四逆桂甘龙牡汤组、桂枝汤组、干姜和砂仁组斑马鱼幼鱼运动活力显著降低。
【作者】徐福平；
【导师】杨志敏；
【作者基本信息】广州中医药大学，中医内科学（专业学位），2014，博士
【关键词】失眠；舒心安神膏；体质；斑马鱼；神经递质；

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