PGC-1α对鼠视网膜新生血管调控作用的研究

【摘要】第一章PGC-1α在鼠视网膜新生血管模型中的表达目的：建立氧诱导小鼠视网膜新生血管的模型,检测正常鼠和氧诱导视网膜新生血管模型鼠的视网膜PGC-1α的表达,探讨PGC-1α在小鼠视网膜新生血管形成过程中的作用。方法：将鼠龄7天(P7)的健康C57BL/6J小鼠共152只,随机分成正常组(76只)和模型组(76只),正常组在空气环境中喂养,不做任何处理。模型组在(75士2)%的氧气浓度的密闭氧舱中喂养,5天后鼠龄12天(P12)时出氧舱,出舱后按时间点继续在正常空气环境中喂养,以建立氧诱导小鼠视网膜新生血管模型；正常组和模型组小鼠在鼠龄17天(P17)时行FITC-Dextran血管造影视网膜铺片,观察视网膜血管的形态和变化；石蜡组织切片H&E染色观察突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数量。提取各鼠龄正常组和模型组小鼠的视网膜总RNA和总蛋白,采用Real-timePCR及Westernblot技术检测视网膜各时间点组织中PGC-1α的表达水平。结果：视网膜铺片显示：正常组小鼠视网膜血管清晰,走行规则,无新生血管生成；而模型组视网膜有大量新生血管生成及明显的荧光素渗漏和无灌注区出现；石蜡组织切片显示：模型组中有大量的新生血管内皮细胞核突破视网膜内界膜。模型组中视网膜PGC-1αmRNA和蛋白质的表达水平随着缺氧时间的延长而逐步上调,在P17时表达量上调明显；结论：在氧诱导的小鼠视网膜新生血管模型当中,PGC-1α的表达量逐渐上调,其表达趋势与视网膜新生血管生成的时间基本同步。证明PGC-1α参与调控视网膜新生血管的形成过程。第二章PGC-1αsiRNA调控鼠视网膜新生血管的形成目的：检测PGC-1αsiRNA对视网膜新生血管形成的抑制作用,研究PGC-1α调控视网膜新生血管的作用,为视网膜新生血管性疾病提供新的治疗靶点。方法：将鼠龄7天(P7)健康的C57BL/6J小鼠共184只,随机分成PGC-1αsiRNA注射组(45只)、阴性对照组(45只)、模型对照组(49只)、和正常组(45只)。正常组在空气环境中喂养,不做任何处理。PGC-1αsiRNA注射组、阴性对照组和模型对照组小鼠放置于(75士2)%的氧气浓度密闭舱中喂养5天,在鼠龄12天(P12)时出舱,出舱后继续在空气环境中喂养,建立氧诱导的视网膜新生血管的模型；其中,PGC-1αsiRNA注射组在P13时予以玻璃体腔内注射lulPGC-1αsiRNA-脂质体混合物；阴性对照组则在P13时予以玻璃体腔注射1ulsiRNA阴性对照-脂质体混合物；模型对照组不做任何处理。各实验组在鼠龄17天(P17)时采用Real-timePCR和Westernblot技术观察小鼠视网膜PGC-1αmRNA、蛋白质和VEGFmRNA、蛋白质的表达变化；各组小鼠左心室行FITC-Dextran灌注并视网膜铺片,观察新生血管的形态和分布变化；视网膜石蜡组织切片H&E染色用以观察并计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数量；免疫荧光检测PGC-la和VEGF的表达。结果：PGC-1αsiRNA注射组的视网膜PGC-1αmRNA和蛋白质表达与模型对照组相比分别下调了46.76%和47.67%,两者差异具有统计学意义(P<0.05);PGC-lasiRNA注射组视网膜VEGFmRNA和蛋白质的表达与模型对照组相比分别下调了48.84%和44.44%,差异具有统计学意义(P<0.05)；视网膜铺片显示：PGC-1αsiRNA注射组与模型对照组及阴性对照组相比较,视网膜新生血管、无灌注区都显著减少,荧光渗漏也明显减少；石蜡组织切片显示突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数量上PGC-1αsiRNA注射组较模型对照组减少62.28%,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论：PGC-1αsiRNA对视网膜新生血管的形成有抑制作用,同时也证实了PGC-1α在视网膜新生血管中具有调控作用,并有望成为血管增殖性视网膜病变新的治疗靶点。图36幅,参考文献82篇
【作者】张枥心；
【导师】夏晓波；
【作者基本信息】中南大学，临床医学，2014，博士
【关键词】PGC-1α；视网膜新生血管；小干扰RNA；VEGF；

【参考文献】
[1]刘慧旎.现代瓷绘的水墨语言探索研究[D].长春工业大学,设计艺术学,2013,硕士.
[2]廖国庭.竞技体育中使用兴奋剂问题的伦理审问[D].湖南师范大学,伦理学,2013,硕士.
[3]马晓军,韩存武,文传源.变结构控制实现非线性系统的输出调节和鲁棒输出调节[J].控制与决策,1995,06:492-497.
[4]谢娜秦.浅谈维吾尔族题材中国画创作中艺术语言重彩装饰[D].湖南师范大学,美术（专业学位）,2013,硕士.
[5]林琦.兼顾预测用户室温的供热系统动态模型研究[D].大连理工大学,供热、供燃气、通风及空调工程,2013,硕士.
[6]张鸿宾.基于轮廓线匹配的二维重迭物体的识别[J].自动化学报,1991,04:439-446.
[7]王伟.转cry2A和cry1C基因水稻对非靶标害虫黑尾叶蝉生态适合度影响的评价[D].浙江大学,植物保护（专业学位）,2012,硕士.
[8]吴涛.特长公路隧道监控系统的冗余控制设计与实现[D].长安大学,交通运输工程（专业学位）,2013,硕士.
[9]徐静.诈骗罪中财产性利益研究[D].沈阳师范大学,法律,2013,硕士.
[10]梁祎明.跳水运动表象与时空知觉的信息加工特征研究[D].上海体育学院,运动人体科学,2014,博士.
[11]黄明星.沈从文湘西小说的形式意义[D].南京师范大学,中国现当代文学,2011,硕士.
[12]张洪瑞.探析校园足球可持续发展对中国足球的重要性[D].山东大学,体育教学（专业学位）,2013,硕士.
[13]林达,陈敬寅,李建儒,陈高.褪黑素减轻蛛网膜下腔出血后的早期脑损伤[J].中风与神经疾病杂志,2014,04:317-320.
[14]赵晓璞.基于改进的PCA与Fisher鉴别相结合的人脸识别[D].河北大学,控制工程,2014,硕士.
[15]赵梦瑶.论美国南北战争中的印第安人的历史角色及作用[D].西安外国语大学,英语语言文学,2013,硕士.
[16]桑运云,李振春,张凯.抛物旅行时插值最短路径射线追踪[J].石油地球物理勘探,2013,03:403-409+506+328.
[17]于永玲,史瑞芬.数据仓库在决策支持系统中的应用[J].郑州航空工业管理学院学报(社会科学版),2001,03:78-80.
[18]梁淑芳.EGFR、KRAS突变状态晚期肺腺癌患者一线TKI治疗效果比较[D].吉林大学,肿瘤学,2014,硕士.
[19]张灿铭.Si/Al复合材料溶渗组织及性能[D].南昌航空大学,材料工程（专业学位）,2014,硕士.
[20]杨建明.基于BizTalk的企业信息化整体解决方案的研究[D].东南大学,2005.
[21]游代安,余旭初,王建荣.一种基于知识的遥感图像模糊分类算法[A].中国工程图学学会.中国图象图形学会第十届全国图像图形学术会议（CIG’2001）和第一届全国虚拟现实技术研讨会（CVR’2001）论文集[C].中国工程图学学会:,2001:6.
[22]夏雯.FOXA1及ERβ在三阴性乳腺癌中的表达情况及相关性研究[D].北京协和医学院,临床医学,2014,博士.
[23]孙冬喆.中国学分银行制度建设研究[D].华东师范大学,教育政策学,2014,博士.
[24]袁树刚,王京,杨荃.全连续冷连轧机带钢厚度自动控制策略研究及实现[J].冶金自动化,2006,06:55-59+62.
[25]孙诗尧.“石头”意象的原型研究[D].贵州民族大学,中国少数民族语言文学,2013,硕士.
[26]郑红高,张天民,刘英利.糖钙在混凝土中掺量的技术探讨[J].建筑技术开发.1999(04)
[27]魏天颖.二代测序技术和外显子捕获技术在遗传病基因诊断中的应用研究[D].浙江大学,医学遗传学,2014,硕士.
[28]张诗朦.重庆地区多联机节能运行模式研究[D].重庆大学,环境工程（专业学位）,2014,硕士.
[29]李宛洋.普通高校滑冰课中引用“双分”教学法的实验研究[D].东北师范大学,体育教育训练学,2012,硕士.
[30]师雪莲.Studies on Tourism Publicity Text Translation from the Perspective of Skopostheorie[D].西安外国语大学,MTI翻译,2014,硕士.
[31]马波涛.Nrf2在液压冲击脑损伤抗神经细胞凋亡中的作用[D].河北医科大学,外科学,2014,硕士.
[32]李伏欣.铁路信息共享平台技术初探[J].中国铁道科学,2002,05:31-38.
[33]张巍.气压制动系统ABS硬件在环测试平台研究[D].武汉理工大学,车辆工程,2013,硕士.
[34]吴德宇.基于偏序集的耦合不动点定理及其应用[D].郑州大学,应用数学,2013,硕士.
[35]杨雪.反倾销对中国出口的影响及我国的应对策略[D].广东外语外贸大学,世界经济,2013,硕士.
[36]翟化龙.SM保险公司人才流失的成因及对策[D].山东大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[37]李晓.MnSOD与SBP1在大肠癌中的表达及临床病理相关性分析[D].辽宁医学院,内科学,2012,硕士.
[38]李雅静.辽宁省生产性服务业发展的问题研究[D].沈阳理工大学,企业管理,2012,硕士.
[39]范开明.关注精确舆情认知提升攻心作战效能[J].南京政治学院学报,2004,06:98-101.
[40]郭延,王志红,刘立凡,阮彩群,骆科枢.广州两个景观内湖营养状况的变化趋势和分析[J].广东工业大学学报,2014,04:121-126.
[41]肖胜杰.代谢型谷氨酸受体组成性活性突变体的构建和功能检测[D].华中科技大学,生物化学与分子生物学,2013,硕士.
[42]李秋艳.Ni(OH)_2及其复合材料电化学性能的研究[D].燕山大学,材料物理与化学,2013,硕士.
[43]玉梅娇.几类神经网络模型的振动性研究[D].广西师范大学,应用数学,2013,硕士.
[44]王静.论我国小城镇化进程中地方政府治理模式创新[D].河北大学,行政管理,2014,硕士.
[45]汪娟娟,禤小聪,罗敬华,肖磊磊,梁泽勇,余涛.共站同塔双回高压直流输电系统双回控制功能及其仿真[J].电力系统自动化,2014,23:119-126.
[46]杨琳梓.当代雕塑的跨界现象[D].大连理工大学,美术学,2013,硕士.
[47]金守利,钱忠平,王成祥.GeoEast叠前时间偏移处理技术及应用[J].石油地球物理勘探,2014,S1:82-86+4.
[48]王钟雅.基于EVA的我国上市银行经营绩效评价研究[D].中北大学,管理科学与工程,2013,硕士.
[49]王伟佳.长链非编码RNA MEG3、ANRIL、TUC338在结直肠癌组织中表达的意义[D].河北医科大学,外科学,2014,硕士.
[50]于硕.化学基本概念教学中教学行为的描述与解读[D].河北师范大学,学科教学,2014,硕士.