产甲壳素酶菌株的筛选、发酵条件优化和酶学性质研究

【摘要】甲壳素又被称为几丁质，甲壳素是N-乙酰氨基葡萄糖以β-1,4糖苷键聚合而成，是数量上第二大的自然聚合物，每年由生物产生的甲壳素总量十分巨大，据估约有一百亿吨。虽然甲壳素开发价值与前景很大，但是甲壳素中广泛存在的氢键使得它的性质十分稳定，它不溶于一般的酸、碱和许多有机溶剂，这一性质使得它的应用十分困难。甲壳素酶是能够催化连接N-乙酰-D葡糖胺的糖苷键断裂的酶类，可降解甲壳素为甲壳寡糖或者N-乙酰氨基葡糖。酶解法降解甲壳素工艺简单、反应条件温和、环境友好，有很高的研究价值。本研究经初筛、复筛得到一株产甲壳素酶的菌株。通过对该菌株发酵条件进行研究，其最优培养基组分为：粉末甲壳素0.5%、2%酵母浸粉、硫酸铵0.5%、硫酸镁0.15%、NaCl1%，K2HPO40.07%，KH2PO40.03%；最适条件为接种量3%、装液量100ml/250ml，起始pH6.0，摇床转速140rpm，培养温度30℃。在最适条件下发酵培养该菌株，发酵液离心、硫酸铵盐析、透析、冷冻干燥得到甲壳素粗酶，并对粗酶酶学性质进行了初步研究。研究发现最适温度45℃，25℃至45℃保温较长时间具有稳定性；酶的最适pH为6，pH5.5~7.5范围内，该酶的稳定性较好；Mg2+和Zn2+对酶活性有促进作用，Cu2+、Fe3+、Ca2+对酶活有抑制。对底物专一性的研究发现，该酶与甲壳素底物的作用具有专一性，对胶体甲壳素和甲壳素粉末水解活性很强，对淀粉与纤维素无水解能力。
【作者】孙鑫；
【导师】韩宝芹；
【作者基本信息】中国海洋大学，生物工程（专业学位），2014，硕士
【关键词】甲壳素酶；发酵条件优化；酶学性质；

【参考文献】
[1]李新鹏.射频IC量产化测试系统及其校正系统开发与实现[D].江苏科技大学,控制工程,2013,硕士.
[2]武培霞.两晋幕府与文学[D].郑州大学,中国古代文学,2013,硕士.
[3]冷丹.当前我国维护类劳工政策的缺陷与完善[D].湖南师范大学,行政管理,2013,硕士.
[4]张志亚.中印边界问题的历史、现状及展望[D].华东师范大学,国际政治,2013,硕士.
[5]陈佳.危险废物焚烧炉二恶英排放特性及BAT/BEP研究[D].浙江大学,2014.
[6]张宁.人民币升值背景下中美贸易的反J曲线效应研究[D].吉林大学,金融,2014,硕士.
[7]孟娟.我国城市房屋拆迁中的思想政治教育工作问题研究[D].长春师范大学,思想政治教育,2013,硕士.
[8]宋伟力.城市本质与城市多样性[D].苏州大学,马克思主义哲学,2013,硕士.
[9]彭政.镍催化的SP~2C-Cl键活化以及新型有机氟化物的合成[D].山东大学,有机化学,2013,硕士.
[10]初向华.扇贝裙边GAG对碱性成纤维细胞生长因子诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响[D].青岛大学,药理学,2004,硕士.
[11]谢蓉.基于分子印迹技术的莠去津竞争性金标试纸条研制[D].浙江大学,植物保护,2012,硕士.
[12]徐加民.北京轨道交通机场线线路方案研究[J].城市轨道交通研究.2007(11)
[13]李亚梅.涂阳肺结核60例临床分析[D].延安大学,内科学,2014,硕士.
[14]石莹,段广仁.广义离散系统多传感器信息融合Kalman滤波器[J].控制与决策,2006,03:339-342.
[15]谢帮海.以氯代仲丁烷为原料合成二仲丁基二硫醚的工艺研究[D].郑州大学,应用化学,2013,硕士.
[16]张应波.地震孔隙率反演方法和应用[J].石油地球物理勘探,1994,03:261-273+398.
[17]唐聃.乳腺癌患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的表达与临床病理的关系研究[D].遵义医学院,甲状腺乳腺外科（专业学位）,2013,硕士.
[18]刘汉辉,高扬.中国民航的安全文化建设(之三)[J].中国安全科学学报.2002(03)
[19]牛海艳.基于改进的进化算法的态势推理研究[D].西安电子科技大学,模式识别与智能系统,2013,硕士.
[20]詹媛.新城疫病毒通过激活真核翻译起始因子4F促进病毒增殖[D].中国农业科学院,预防兽医学,2014,博士.
[21]周燕宁.七国之乱与汉初文学[D].西北大学,中国古代文学,2014,硕士.
[22]王桐.基于Android智能移动终端的无线远程管控系统研究与应用[D].西南交通大学,计算机技术,2013,硕士.
[23]邵海燕.激励在事业单位人事管理中的有效性研究[D].苏州大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[24]邢铁英.打通中国西部向西的出海口努力提升大陆桥的竞争力[J].大陆桥视野.2005(12)
[25]王进.水压驱动式打桩机系统动力学建模与仿真分析[D].湖南科技大学,机械工程,2013,硕士.
[26]江宇.利用粉煤灰制备硅纳米线[D].内蒙古工业大学,化学工程与技术,2013,硕士.
[27]国婷婷.论对蒙汉语教学中色彩词的文化导入[D].内蒙古师范大学,汉语国际教育（专业学位）,2013,硕士.
[28]张岩江.PaaS云平台能力组件通用框架的设计与实现[D].北京邮电大学,计算机科学与技术,2013,硕士.
[29]张文义,关伟,樊玲玲,马继辉,毛保华.多模式交通网络路径动态调整模型[J].交通运输系统工程与信息,2014,03:126-130.
[30]蔡杰.机械式平地机燃油经济性仿真研究[D].长安大学,机械工程（专业学位）,2014,硕士.
[31]邵阳.数字媒体终端监测客户端软件的设计与实现[D].华中科技大学,计算机技术,2013,硕士.
[32]刘琳.任务的交互特点对口语复杂度的影响[D].复旦大学,对外汉语教学,2012,硕士.
[33]孔海宾.企业股权结构、成长性和企业价值关系的实证研究[D].复旦大学,企业管理,2012,硕士.
[34]苏晓芳.黄土丘陵沟壑区空间贫困及其分异机制研究[D].宁夏大学,人文地理,2014,硕士.
[35]郭海峰.美国教科书《地理：地质学、环境与宇宙》对地理必修Ⅰ“过程与方法”内容编制的启示[D].东北师范大学,课程与教学论,2012,硕士.
[36]李雅楠.财政分权、地方财政支出结构对城乡居民收入差距的影响[D].南京财经大学,西方经济学,2011,硕士.
[37]刘路璐,许剑,吕剑,揭柳.面向多工厂的一体化质量管理系统[J].冶金自动化,2013,04:28-32.
[38]段昆.离退休老人生活质量状况及影响因素研究[D].首都经济贸易大学,社会保障,2013,硕士.
[39]潘清.京师大学堂译学馆研究[D].华中师范大学,中国近现代史,2014,硕士.
[40]李丽.转型期中国农村医疗保障制度性缺失分析[D].西南财经大学,金融学,2004,硕士.
[41]雒艳芳.普通高中英语歌曲选修课的实施现状调查分析[D].西安外国语大学,课程与教学论,2013,硕士.
[42]黄丹君.图与超图的带宽和问题[D].浙江师范大学,应用数学,2004,硕士.
[43]胡中华.鑫仑公司净化工程事业部采购管理研究[D].兰州大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[44]王欢欢.俄语法律术语探究[D].黑龙江大学,俄语语言文学,2013,硕士.
[45]孙璐.电子商务网站的许可Email营销研究[J].市场周刊(研究版),2005,12:34-36.
[46]朱易.肉制品无甲醛无3,4-苯并芘液熏技术研究[D].南京农业大学,食品科学,2013,硕士.
[47]周雪枫.上海市节能减排公共政策成效分析[D].华东师范大学,行政管理,2013,硕士.
[48]范丽龙,杨杨,朱伯荣,曾洪波,倪彤元,马成畅.泡沫混凝土凝结时间的实验研究[J].新型建筑材料,2012,07:46-48.
[49]张英,李晏.ZPW-2000A型自动闭塞单区段故障案例分析[J].铁道通信信号.2006(08)
[50]周洋帆,贾顺平,关伟,刘爽.可变信息屏对北京市交通拥堵缓解的评价研究[J].交通运输系统工程与信息,2014,06:201-206.