核盘菌弱毒菌株SX247中两种病毒分子特性的研究

【摘要】核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary)可以侵染作物,引起作物菌核病等病害,对作物的产量和品质造成很大的破坏。同时,核盘菌地理分布广泛,传播方式多样化,导致防治难度大。具有传染性的弱毒相关真菌病毒,对于油菜菌核病的防治具有很大的潜力。本研究自陕西省油菜残株的菌核中分离到核盘菌菌株SX247,通过对该菌株的生物学性状进行观察、分析,发现菌株SX247菌丝生长缓慢、菌落形态异常、不能形成成熟的菌核,并且在油菜上表现为弱毒或不致病。因此,菌株SX247是一株弱毒菌株。通过提取SX247菌丝的dsRNA,发现其中存在两条dsRNA片段,大小分别为15Kb和5.4Kb左右。对这两条片段分别进行序列克隆分析,结果显示为两个不同的病毒。将大片段dsRNA命名为Sclerotiniasclerotiorumhypovirus2(SsHV2/SX247),小片段dsRNA命名为SclerotiniasclerotiorumDebilitation-AssociatedRNAVirusstrainSX247(SsDRV/SX247)。其中,病毒SsHV2/SX247与减毒病毒科病毒有较低的氨基酸相似性(23%-28%),基因组全长15219nt(不包含PloyA),编码一个大的ORF,包含3个保守结构域,分别为蛋白酶(Prot),依赖RNA的RNA聚合酶(RdRp)和解旋酶Helicase区域。系统发育分析显示,虽然SsHV2/SX247与减毒病毒科阿尔法减病毒属(Alphahypovirus)的病毒具有最近的亲缘关系,但其在基因组结构及序列相似性与已报道的病毒有显著区别,因此建议以SsHV2/SX247为模式种建立一个新的减病毒属伽玛减毒病毒属(Gammahypovirus)。病毒SsDRV/SX247基因组全长5493nt(不包含PolyA),含有一个ORF,编码的多聚蛋白具有3个保守结构域,分别是甲基转移酶(Methyltransferase)、RNAHelicase和RdRp,与本实验室之前报道的SsDRV氨基酸同源性为81%。分别通过病毒的水平传播和原生质体再生技术,研究了病毒SsHV2/SX247和SsDRV/SX247与寄主弱毒特性的相关性。病毒水平传播与原生质体脱毒研究表明SsHV2/SX247能够引起寄主生长缓慢、菌落形态改变、不产生菌核以及致病力衰退等生物学性状变化,并且可以通过菌丝融合进行传播。而病毒SsDRV/SX247对寄主的影响还不明确。总之,对病毒SsHV2/SX247进行研究,可以丰富真菌病毒种类、为病毒的起源进化提供参考,还可以为菌核病的生物防治、核盘菌致病机理及病毒与寄主互作研究提供生物资源。
【作者】胡孜进；
【导师】付艳苹；
【作者基本信息】华中农业大学，植物病理学，2014，硕士
【关键词】核盘菌；真菌病毒；弱毒病毒；复合侵染；生物防治；

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