基因枪和农杆菌介导的抗冻基因KN2对普通小麦品种的遗传转化

【摘要】低温胁迫是影响作物产量和品质的重要气象灾害之一,对农业生产造成损失很大。我国小麦南北跨度大,霜冻、倒春寒等情况频发,黄淮海麦区和长江中下游麦区为低温冻害重发区及频发区。通过转基因技术将优良外源抗冻基因导入小麦品种而培育出抗冻小麦新品种已有可能。本实验以华麦2668、华麦2152等6个小麦品种为材料,探讨基因枪不同轰击参数条件下愈伤组织的绿点率情况,以及基因枪介导法和农杆菌介导法对小麦遗传转化的影响。主要结果如下：1.基因枪轰击参数的优化：金粉浓度为250μg/枪时,小麦再生绿点率要高于500μg／枪的再生绿点率,金粉浓度增大,对组织细胞造成的伤害也就愈大；两次轰击幼胚,幼胚分化的愈伤组织所表现的绿点率要大于一次轰击情况,但同时会在一定程度上削弱细胞的分化能力；在靶距6cm的试验中,华麦2566的再生绿点率达到了46.72%,高于9cm处理的绿点率。2.基因枪介导的遗传转化：以科农199、华麦2566、郑麦9023、华麦2152、华麦2668品种幼胚为转化材料,Bar基因为选择标记基因,KN2基因为目的基因,共转化导入受体细胞。最终得到抗性植株共20株,转化率分别为：0.54%,0.49%,0.46%,0.34%,0.50%。3.农杆菌介导的遗传转化：以四倍体硬粒小麦Ldn以及普通小麦华麦2152幼胚分化的愈伤组织为受体材料,用农杆菌菌株AGL1进行侵染,最终仅有硬粒小麦Ldn得到2株阳性植株。
【作者】孔朋朋；
【导师】孙东发；
【作者基本信息】华中农业大学，作物遗传育种，2014，硕士
【关键词】小麦；抗冻基因；轰击参数；基因枪；农杆菌；

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