胰岛素样生长因子-1对Caco2细胞斯钙素1表达的影响
【摘要】斯钙素1(Stanniocalcinl,STC1)是一种首先在硬骨类鱼中发现的糖蛋白激素,由鱼类特有的内分泌腺斯坦尼氏小体(corpusclesofstannius,CS)所分泌。在鱼类体内,STC1通过降低鳃和肠对钙的吸收、增加肾脏对磷酸盐的重吸收,来维持体内矿物质代谢的动态平衡。研究表明STC1也在哺乳动物体内参与了钙磷稳态的调控,与已知多种钙磷代谢调节因子骨钙素(0C)、骨保护素(OPG)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)等有互为靶标的复杂联系。IGF-1是一具多种功能的调控因子,参与了机体细胞分化、增殖和成熟等有关的重要生理功能。研究表明,IGF-1与哺乳动物体内钙磷调节与代谢相关因子存在密切的联系。机体钙磷稳态的维持依赖于小肠、肾脏和骨骼三种器官以及维生素D、甲状旁腺素、降钙素等激素密切协调作用而实现的。因此,研究IGF-1在小肠上皮细胞中对STC1的影响,可以为钙磷代谢稳态的调控及代谢紊乱疾病防治提供新的理论基础和实验依据。本实验利用Caco2细胞作为小肠上皮细胞模型,研究IGF-1对STC1表达的影响。通过不同浓度的外源IGF-1不同时间段的处理,然后利用荧光定量PCR(包括相对定量和绝对定量)和Westernblot技术对Caco2细胞中STC1表达量进行检测。实验结果如下:1.Caco2细胞经不同浓度IGF-1处理12h后,只有10ng/mL和50ng/mL处理组中STC1mRNA表达量显著上调(P<0.05),其中尤以50ng/mL组上调作用最为明显(P<0.01);同样的,STC1蛋白表达量在50ng/mL组表达上调最为显著。2.Caco2细胞经50ng/mLIGF-1不同时间处理后,和对照比较STC1mRNA的表达量均有下调(P<0.05),其中以2h和8h处理组下调最为明显(P<<0.01);而在各处理组间,2h到12h组间表达量无明显变化,但24h组较其它组表达量显著上升(P<0.05),尤其相对于4h组上调更为明显(P<0.01);Caco2细胞经此系列处理后,STC1蛋白表达量的变化与mRNA变化的趋势并不完全一致,但整体上表现为下调趋势。实验结果表明,Caco2经一定的浓度的IGF-1处理后,STC1的表达是复杂的,并不简单的呈浓度或者时间依懒性,说明二者之间的相互影响可能还受到其他因素的调控,这还需要进一步的实验予以证明。
【作者】回琳;
【导师】郭定宗;
【作者基本信息】华中农业大学,临床兽医学,2014,硕士
【关键词】斯钙素1;胰岛素样生长因子-1;绝对定量PCR;Caco2细胞;
【参考文献】
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