巨噬细胞迁移抑制因子对肌原细胞增殖和分化的调控作用

【摘要】巨噬细胞迁移抑制因子(Microphagemigrationinhibitoryfactor,Mif)可抑制巨噬细胞的随机迁移,是调节炎症反应的重要细胞因子。已有报道表明MIF可调节脂肪细胞分化,并能够促进肥胖状态下脂肪组织募集巨噬细胞,进而引起炎症反应和胰岛素抵抗。最近的研究发现,肥胖状态下骨骼肌组织中的巨噬细胞数目也会增多,但其发生机制和可引发的生物学效应尚未清楚。鉴于其和能量代谢的密切关联,我们推测MIF可能会调控成肌细胞的增殖和分化,在机体内巨噬细胞、脂肪细胞和骨骼肌细胞互作网络中发挥关键作用。本课题利用体外成肌分化模型C2C12细胞,通过细胞转染技术超表达和敲减内源Mif基因研究其对肌原细胞增殖和分化的调节作用,并通过流式细胞技术、RealtimePCR和WesternBlotting等方法对其分子机制进行分析。本论文获得的主要结果如下：1.MifmRNA水平在C2C12细胞分化的早期(DO至D1)下降,而后持续上升,表明其可能在成肌分化早期发挥作用。2.免疫荧光结果显示在C2C12细胞中超表达Mif可抑制成肌分化过程,影响肌管的形成。3.敲减Mif可导致C2C12细胞阻滞在G1期,这种作用是通过下调CycinD1和CDK4的表达实现的。4.在C2C12细胞中超表达Mif可下调MyoDmRNA水平,而敲减Mif则可上调其水平并能显著降低Myf5的表达,此外还可上调p21的表达。C2C12细胞经MIF抑制剂ISO-1处理之后,MyoD、p21、MyoG的mRNA水平均呈现浓度依赖性上升。综上所述,在肌原细胞的增殖和分化过程中,MIF可阻止肌原细胞退出细胞周期,从而抑制成肌分化过程。
【作者】郑金；
【导师】雷霆；杨在清；
【作者基本信息】华中农业大学，生物化学与分子生物学，2014，硕士
【关键词】Mif；MyoD；Myf5；p21；细胞周期；成肌分化；

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