DHAV-1感染DEF和鸭的细胞因子IL-2、IL-12-B、IFN-γ基因mRNA表达水平研究

【摘要】鸭甲肝病毒A型(DuckHepatitisAVirus,DHAV-1)属于小RNA病毒科,禽肝炎病毒属。DHAV-1主要引起10d以内的雏鸭出现以肝损伤为特征的鸭病毒性肝炎病,该病传播迅速、致死性高,雏鸭一旦感染该病,死亡率高达90%以上,这给我国的养鸭业带来巨大的经济损失。本试验以DHAV-1分别感染原代鸭胚成纤维细胞(DEF)、4d雏鸭和21d中鸭,于DEF感染DHAV-1后的0h对照组和6h、12h、24h、48h、72h、96h试验组收取DEF,检测DEF中病毒含量和细胞因子IL-2、IL-12-B、IFN-γ基因mRNA表达水平。DHAV-1感染DEF后,在24h致细胞病变,经RT-qPCR检测病毒RNA增殖情况,DHAV-1在感染DEF后的6h-48h上升,48h到达高峰,而后下降。并于24h在透射电镜下观察到直径在30rnm左右的球形病毒颗粒。上述结果表明,本试验成功建立DHAV-1细胞感染模型。DEF感染DHAV-1后,细胞因子IL-2、IL-12-B、IFN-γ在6h-72h上调,96h下调,并存在显著差异。于DHAV-1感染后0h对照组与6h,12h、24h、48h、72h、96h实验组剖杀4d和21d鸭,取肝、脾、胸腺、法氏囊为试验材料,大体解剖和RT-qPCR结果证明动物感染模型复制成功。试验结果显示：4d雏鸭肝中病毒含量高于21d中鸭,均呈先上升后下降的趋势。4d雏鸭和21d中鸭脾中病毒含量大致呈先上升后下降的趋势,在24h-48h病毒含量最高。胸腺与法氏囊中的病毒含量变化不稳定。在4d雏鸭中,细胞因子IL-2在DHAV-1感染后的肝、胸腺、法氏囊的各时间点均上调,在脾中6h-12h上调,24h-96h下调。细胞因子IL-12-B在各个器官中均为上调。细胞因子IFN-γ在各个器官中的表达时有上调时有下调。在21d中鸭中,细胞因子IL-2在肝、脾、胸腺中主要于24h-48h下调,其他时间点上调,在法氏囊中于72h下调,其他时间上调。细胞因子IL-12-B在法氏囊感染后72h有微弱下调,在其他器官的各时间点均表现上调。细胞因子IFN-γ在各个器官中的表达时有上调时有下调。本试验成功建立DHAV-1感染DEF模型,并测定了DEF、肝、脾、胸腺、法氏囊中的病毒含量,检测了细胞因子IL-2、IL-12-B、IFN-γ基因mRNA表达量,试验结果证明细胞因子的变化与病毒增殖的趋势和病程发展有相关性。
【作者】任小交；
【导师】程国富；
【作者基本信息】华中农业大学，基础兽医学，2014，硕士
【关键词】DHAV-1；DEF；IL-2；IL-12-B；IFN-γ；mRNA表达量；

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