北方须鳅线粒体基因组序列测定及鳅科鱼类系统发育分析
【摘要】线粒体是真核生物所不可或缺的双层膜结构的细胞器,动物线粒体DNA(mitochondrialDNA)具有进化速度快,严格母系遗传,不存在基因重组等特征,因此是基因功能研究和物种遗传进化研究的好材料。北方须鳅(Barbatulatoni)隶属于鲤形目、鳅科、条鳅亚科、须鳅属,本研究通过参考北方须鳅的近缘物种须鳅的线粒体基因组全序列,共计设计了26对引物,采用温度梯度PCR技术扩增出了北方须鳅线粒体基因组的全序列,然后运用相关软件对其进行分析研究,结合NCBI中已公布的鳅科鱼类的线粒体基因组信息,构建鳅科鱼类系统发育树,研究结论如下:1.北方须鳅线粒体基因组全长16619bp,其中4721个碱基A,占28.4%,2978个碱基G,占17.9%,4399个碱基T,占26.5%,4521个碱基C,占27.2%,A+T含量为54.9%,明显大于G+C含量,其中D-loop区A+T的含量最高,达到67.3%。2.北方须鳅线粒体基因组总共编码37个基因,即13个蛋白质编码基因(PCGs),2个rRNA基因,22个tRNA基因与1个控制区序列。其中Gln、Pro、Ala、Cys、Asn、Glu、Tyr、SerUCN8个tRNA基因和蛋白质编码基因ND6共9个基因由L链编码,其余28个基因则是由H链编码。3.北方须鳅蛋白质编码基因中COⅠ的起始密码子是GTG,另外12个编码基因则是以ATG行使其功能,北方须鳅的终止密码子使用方面,把TAA作为终止密码子的有NDU、COI、ATP8、ATP6、ND4L、ND5、ND6共7个基因,把TAG作为终止密码子的有ND2、ND3共2个基因,以T作为终止密码子的有COⅡ,COⅢ、Cytb共3个基因,以TA作为终止密码子的有ND4。4.北方须鳅线粒体基因组编码22个tRNA基因,共1557bp,软件预测tRNA的二级结构,可以看出其二级结构为典型的三叶草构型。I2SrRNA基因位于tRNA基因Phe和Val之间,长度950bp,16SrRNA基因位于tRNA基因Val和Leu之间,长度1678bp,两个rRNA基因的A+T含量为53.7%,略低于全序列平均水平含量54.9%。5.通过进行系统分析,可把鳅科鱼类划分为条鳅亚科、沙鳅亚科和花鳅亚科三个亚科,通过研究鳅科鱼类的12SrRNA和16SrRNA基因,证明花鳅亚科是最为进化的类群,条鳅亚科次之,这2个亚科之间亲缘关系比较近,而位于进化树底部的是沙鳅亚科较为原始。其中须鳅和北方须鳅的亲缘关系最近,进化树的置信度为100。
【作者】赵习;
【导师】杨学芬;马徐发;
【作者基本信息】华中农业大学,水产养殖,2014,硕士
【关键词】鳅科;北方须鳅;线粒体基因组;序列分析;系统发育;
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