柑橘果实主要苦味物质含量变化及相关基因表达分析

【摘要】苦味是柑橘品质的重要组成成分,它不仅是影响柑橘风味的重要因素之一,还具有很多对人体有益的生物学功能。为了探究柑橘果实中苦味物质的形成机理进而调控苦味物质的积累,本实验从生理水平和分子水平两方面进行了研究,主要研究结果如下：1.通过HPLC测定2010、2011年‘国庆一号’温州蜜柑(CitrusunshiuMarc.)和2010年’Oroblanco’葡萄柚(C.paradisiMacf.)各个发育时期不同组织层的主要苦味物质(柠檬苦素、诺米林、柚皮苷)含量,并结合2008、2009年的苦味数据对结果进行分析。首先,在柑橘果实整个发育阶段,虽然三种苦味物质的含量波动很大,但是整体上呈下降趋势。其次,不同年份间柑橘果实中苦味物质的含量差异很大,受当年气候影响较大。再次,苦味物质在柑橘果实不同组织层中的分布不均匀,囊衣中积累了较多的柠檬苦素和诺米林,而黄皮层中柚皮苷的积累较少。最后,通过偏相关分析发现两个品种果实白皮层与对应囊衣中的三种苦味物质含量都分别呈显著相关性,而柚皮苷的含量与柠檬苦素或诺米林显著相关。2.通过实时荧光定量PCR对苦味合成途径中两个重要基因柠檬苦素糖苷转移酶基因(Limonoidglucosyltransferasegene,LGT)和1,2-鼠李糖苷转移酶基因(1,2-Rhamonsyltransferasegene,1,2RhaT)的表达进行分析,结果表明这两个基因的表达与其对应的果实中苦味物质的积累有部分对应的趋势。3.分别克隆了‘国庆一号’温州蜜柑(C.unshiuMarc.)、’Oroblanco’葡萄柚(C.paradisiMacf.)、翡翠柚(C.grandisOsbeck)、华农本地早橘(C.reticulataBlanco)、清家脐橙(C.sinensisOsbeck)、红肉脐橙(C.sinensisOsbeck)6个柑橘品种中的LGT全长,在每个品种中都得到了两种类型的克隆,而且序列对比分析发现’Oroblanco’葡萄柚、红肉脐橙、清家脐橙中共有的一个克隆存在连续6个碱基的缺失,且提前终止了翻译。此外,通过Southernblot分析以上6个柑橘品种中的柠檬苦素糖苷转移酶基因(LG7),发现其在‘国庆一号’温州蜜柑、翡翠柚、华农本地早中是单拷贝,而在’Oroblanco’葡萄柚、红肉脐橙、清家脐橙中有2个拷贝。
【作者】李绍杰；
【导师】徐娟；
【作者基本信息】华中农业大学，果树学，2014，硕士
【关键词】‘国庆一号’温州蜜柑；‘Oroblanco’葡萄柚；柠檬苦素；诺米林；柚皮苷；柠檬苦素糖苷转移酶基因；

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