大豆疫霉菌（Phytophthora sojae）抗甲霜灵菌株生物学特性及AFLP分析

【摘要】本研究以大豆疫霉野生菌株Pmg1为亲本，采用药剂驯化法获得抗甲霜灵菌株。初步研究抗药菌株的抗性水平、抗性的稳定性、菌落生长速率、菌落形态、游动孢子囊和卵孢子产生能力等生物学特性，并利用光学显微镜观察其菌丝、游动孢子囊和卵孢子的形态。应用64对引物组合对筛选到的抗药菌株及其野生亲本的基因组DNA进行AFLP分析。取得以下研究结果：1.获得5株抗甲霜灵菌株Pmg1-Mtr1、Pmg1-Mtr2、Pmg1-Mtr3、Pmg1-Mtr4、Pmg1-Mtr5，抗性水平在野生亲本的3793.7-5773.9倍之间。2.抗药菌株的抗药性可在菌丝阶段稳定遗传；抗性菌株的第一代、第二代、第三代游动孢子单孢株仍具有不同程度的抗性。3.与野生菌株Pmg1相比，抗药菌株的菌落生长速率有明显降低；菌丝、游动孢子囊和卵孢子在形态上与野生菌株相比没有明显变化，但抗药菌株游动孢子囊和卵孢子的产量有显著降低。4.AFLP分析共获得1087条条带，其中328条具有多态性，多态性百分比为30.17%，遗传相似系数为82%。差异片段E2M18152的延长序列与致病疫霉T30-4果糖二磷酸醛缩酶mRNA编码区序列的同源性为93%。5.根据3个较长差异片段的序列设计3对SCAR特异引物，并未在抗药菌株和野生亲本间扩增到具有长度多态性的片段，故没有成功地将AFLP标记转化为SCAR标记，但通过序列比对发现抗药菌株和野生亲本之间存在不同单碱基。以上研究结果表明，大豆疫霉菌对甲霜灵容易产生抗性，抗药菌株在菌丝阶段抗药性的保持对甲霜灵没有表现依赖性，且可在游动孢子后代遗传。抗药菌株除抗药性提高、游动孢子囊和卵孢子产生能力下降外，其它生物学性状没有发生显著变化。抗药菌株在分子水平上确实发生了变化，导致了多态性条带的出现，且抗药菌株与野生亲本在DNA水平上的差异在整个基因组上的分布是随机的，而这些差异可能与菌株抗性的形成有关。
【作者】国莉玲；
【导师】左豫虎；
【作者基本信息】黑龙江八一农垦大学，植物病理学，2014，硕士
【关键词】大豆疫霉菌；抗甲霜灵菌株；生物学特性；AFLP；多态性；SCAR；

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