夏秋绿茶中茶氨酸的提取分离纯化及对肠道微生态的影响

【摘要】茶氨酸是茶叶中特有的氨基酸,具有抗肿瘤,增强记忆力等多种活性,在功能食品方面有很大的应用前景。中国夏秋绿茶产量高,但年年积压严重,资源利用率低。从夏秋绿茶中直接提取,分离茶氨酸,能更好的保证其天然性质,是最直接,安全和有效的生产途径。本研究拟在前人研究的基础上,采用提取优化,超滤,静态吸附,动态层析结合的方法,建立一套纯度高,成本低,工业可行的茶氨酸提取分离和纯化的工艺,并研究该工艺制备得到的茶氨酸对肠道微生态的影响。主要研究结果如下1.利用正交试验优化得出茶氨酸提取的最佳条件为：提取料液比1：20,提取温度95℃,提取时间45min。2.直接水提的茶汤中含有大分子蛋白质,高分子多糖及絮状沉淀,需经过超滤处理。通过比较选择10K孔径的膜,操作压力为0.3MPa,溶液温度35℃时具有最佳的效果。经过超滤处理后的茶汤澄澈明净,大分子蛋白质和絮状沉淀基本去除,茶多糖除掉40%以上,茶多酚去除率达到30%,而咖啡碱和茶氨酸的量处理前后改变不大。3.吸附能进一步除去茶汤中的茶多酚等物质,本研究表明PA树脂对茶多酚的选择吸附量达到了76.36mg/g,且回收率高,对茶酸吸附量很少,利用PA树脂静态吸附可以很好的分离和富集茶多酚。4.分离茶氨酸和咖啡碱用的是NKA-Ⅱ树脂动态层析,上样后用蒸馏水以1BV/h的流速洗脱得到纯度99.12%的茶氨酸,一次得率59.26%,1.5-2.5BV之间的洗脱液浓缩后再次上样,茶氨酸的得率可提高至75.12%,之后用80%乙醇洗脱层析柱可得到纯度99%的咖啡碱副产品。NKA-Ⅱ树脂使用五次后分离效果没有明显的改变,具有很好的工业应用前景。5.采用体外厌氧粪样混合培养的方式对茶氨酸产品进行发酵培养,通过FISH技术对24小时内有益菌群、有害菌群以及总菌群的数量变化进行测定,运用HPLC(?)定24h内肠道短链脂肪酸的变化。结果发现茶氨酸在一定程度上能促进乳酸菌和真细菌梭菌属的生长,对其它三种细菌有一定的抑制作用,细菌总数比空白对照组略低。肠道短链脂肪酸的产生变化较大,茶氨酸在短期内促进了大量乳酸的产生。
【作者】葛艳；
【导师】叶红；
【作者基本信息】南京农业大学，食品工程，2013，硕士
【关键词】夏秋绿茶；茶氨酸；提取；分离纯化；肠道微生态；

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