转StBADH基因T_1代番茄植株的耐盐性鉴定

【摘要】随着蔬菜设施栽培的发展,土壤盐渍化和次生盐渍化日益突出,已经严重地影响了蔬菜的产量和品质。植物对盐害耐性是有差异的,挖掘耐盐基因并培育耐盐作物能减小盐害损失。通过基因工程的方法将耐盐基因转入作物,培育耐盐作物新品种是开发利用盐碱地的一种经济、有效的手段。番茄（LycopersiconesculentumMill.）是一种耐盐性中等、栽培广泛并具有重要经济价值的蔬菜。番茄也是基因工程的模式生物之一,甜菜碱被认为是最有希望的耐盐渗透调节物质之一,但是番茄自身不能合成甜菜碱。如果利用基因工程技术把与甜菜碱合成相关的基因转入番茄中,使其积累甜菜碱,将有可能达到增强番茄耐盐性的目的。本试验的目的是验证转StBADH基因番茄的耐盐能力,即在200mmol-L”1的NaCl胁迫下,对转StBADH基因的T1代番茄植株和未转基因对照品种‘金棚一号’进行组织化学染色、PCR检测及耐盐性鉴定。取得的主要研究成果如下：结果表明,在200mmol·L-1的NaCl胁迫下,GUS组织化学染色和PCR鉴定结果均为阳性的转StBADH基因番茄植株和对照植株的相对电导率均有升高,但前者增加速率明显低于后者,转基因番茄的相对电导率始终低于对照。在胁迫15d时,转基因番茄的大分子渗漏值显著低于对照,而前者的BADH活性显著高于后者。此结果说明转基因番茄T1代植株耐盐性明显高于对照,目的基因正常表达。在NaCl胁迫下,转StBADH基因番茄植株和对照的SOD变化趋势均呈先上升后下降的趋势。转StBADH基因番茄植株的POD·活性呈先上升后下降最后略有回升的变化趋势,而对照到了后期不呈现回升的趋势。随着胁迫时间的延长,转StBADH基因番茄植株游离脯氨酸含量持续上升；而对照仅在胁迫前期和中期有上升,在胁迫9d时开始趋于平稳。总的来说,转StBADH基因番茄植株的各项指标均显著高于对照,表现出较强的抗氧化能力。转StBADH基因番茄植株和对照的02·-生成速率、膜脂过氧化产物MDA含量均显著增加,但前者的各项指标均显著低于后者,转StBADH基因番茄植株发生膜脂过氧化作用轻于对照,受到的氧化伤害较小。在NaCl胁迫下,转StBADH基因番茄植株和对照植株的APX、DHAR和GR活性均呈先上升后下降的趋势,但转StBADH基因番茄植株的各酶活性显著高于对照,AsA和GSH的再生率显著高于对照；两者的氧化还原力（AsA/DHA值和GSH/GSSG值）显著下降,但转StBADH基因番茄植株下降幅度显著小于对照,H202含量显著低于对照.表明NaCl胁迫下,转StBADH基因番茄植株能保持良好的AsA-GSH循环效率,清除H202效率较高,细胞受氧化损伤程度较轻,表现出对NaCl较强的耐受性。在NaCl胁迫下,转StBADH基因番茄植株和对照植株的株高、茎粗、相对叶绿素含量和叶片相对含水量均显著下降,但前者各项指标均显著高于后者,转StBADH基因番茄植株生长受抑制程度低于对照。转StBADH基因番茄植株盐害级别均显著低于对照。以上结果显示,StBADH基因的导入提高了番茄植株的耐盐能力。
【作者】殷武平；
【导师】朱月林；
【作者基本信息】南京农业大学，蔬菜学，2013，硕士
【关键词】NaCl胁迫；耐盐性；StBADH基因；转基因番茄；

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