凋亡抑制基因Bcl-2和Bcl-x1在菌核病和黄萎病抗性中的研究

【摘要】棉花是世界上最重要的经济作物之一,是天然纤维的最主要来源,我国是世界棉花生产的主要国家之一,棉花生产的持续稳定发展,对于我国的经济社会的发展具有重要的意义。然而棉花黄萎病却成为我国棉花发展的严重阻碍之一,在生产上一直没有选育出能抗多菌系的棉花品种。油菜是我国最主要的油料作物,但菌核病的存在是发展油菜生产的主要限制因素之一。前人的研究结果证明抗凋亡基因Bc1-2和Bc1-x1能够促进植物细胞对生物和非生物的抗性,但其作用机制不是很清楚。本文通过克隆这2个基因并在拟南芥中异位表达,通过分别接种菌核病和黄萎病菌系,以其阐明抗凋亡基因Bc1-2和Bcl-xl在促进植物对菌核病和黄萎病抗性中的作用。通过构建抗凋亡基因Bc1-2和Bcl-xl植物双元表达载体,利用Floraldip法将其转入拟南芥哥伦比亚生态型中。通过Kan抗性筛选,获得可遗传的转基因阳性苗,并通过DNA、RT-PCR和GUS等多水平检测,证明了抗凋亡基因Bc1-2和Bc1-x1成功整合到拟南芥基因组中。为了证明抗凋亡基因Bc1-2和Bc1-x1是否对菌核病和黄萎病具有抗性作用,利用转基因拟南芥T1代阳性苗接种核盘菌和黄萎病菌VD8,观察接种后的拟南芥发病特征。发现转Bc1-2和Bc1-x1的转基因阳性苗对于核盘菌具有明显的抗性。但转基因阳性苗接种黄萎病后表现的症状与对照相比并无显著区别,在不同发育时间段的发病程度也未见差异。研究表明抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xl可有效增加植物抗菌核病能力,但对黄萎病的防治效果不明显。
【作者】雷俊杰；
【导师】王心宇；
【作者基本信息】南京农业大学，生物化学与分子生物学，2013，硕士
【关键词】抗凋亡基因；Bcl-2；Bcl-xl；拟南芥；转基因；黄萎病；菌核病；

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