一株产胶原蛋白酶肠道菌的分离及鉴定

【摘要】胶原蛋白是一种白色、不透明、无支链的天然的纤维蛋白质，其独特的三螺旋结构使胶原蛋白非常稳定，难以降解，从而造成其消化吸收困难。将胶原蛋白水解为胶原蛋白肽可使其在消化、吸收、功能等方面得到显著提高。利用生物酶降解胶原蛋白是制备胶原蛋白肽的最佳途径。随着对胶原蛋白的深入研究和其提取技术的发展，胶原蛋白肽的生理功能也逐渐被认识，胶原蛋白及胶原蛋白肽已经成为生物、食品、医学等领域的研究热点。本研究主要以黑鲪肠道为菌源，筛选出一株高活性胶原酶产生菌，对其发酵条件和培养基组分进行全面优化，并对该菌株所产的胶原酶的动力学性质，包括酶解条件及其热稳定性等进行了初步的探讨，为产业化生产胶原蛋白肽提供了一定的技术参考。对黑鲪简单处理后，经过初筛和复筛，得到一株产胶原酶活力较大的菌株。通过对该菌株的形态特征和生理生化特征，初步认定所筛菌属于气单胞菌属，暂命名为Aeromonassp.F3。采用单因素试验法对Aeromonassp.F3的发酵条件及培养基组分进行全面优化，提高该胶原酶生产菌的产酶效率。经优化试验结果表明，该菌株最佳发酵条件为：培养时间24h，温度40°C，初始pH为8，装瓶量80～100mL/250mL；培养基组分为：葡萄糖3g/L，酵母浸粉9g/L，NaCl5g/L，MnSO410mg/L。经优化试验明显提升了该菌株的产酶能力。以海洋微生物Aeromonassp.F3为酶源，采用单因素试验法对其所产的胶原酶性质进行研究，包括该胶原酶的反应条件及热稳定性，并对该胶原酶水解鱼皮的效果进行了分析。结果表明，微生物Aeromonassp.F3源胶原酶在50°C热处理40min之后明显失活，该胶原酶的最适反应温度为40°C，最适pH为8.6，金属离子Ca2+在0.5mmol/L浓度时对酶有激活作用。该酶在其最适条件下，对鱼皮胶原有显著水解效能。
【作者】白杨；
【导师】钱斯日古楞；
【作者基本信息】大连工业大学，发酵工程，2011，硕士
【关键词】胶原蛋白；胶原酶；筛选；酶活；优化；

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